老年慢性心力衰竭患者血清中亲环素、内皮素－1、同型半胱氨酸和半胱氨酸蛋白酶抑制剂C的表达及意义

梁 雪 张佩生 高 瑜 (郑州大学第五附属医院心内二科，河南 郑州 450052)

近年来学者提出了心-肾机制、心-周围循环机制、神经体液机制及细胞因子学说等来试图解释慢性心力衰竭病变的机制〔1〕，其理论的共同特征是病变在进展中多种相关细胞因子参与，使心脏和内环境相关的动态平衡失调。研究证实血清中亲环素(CypA)、内皮素-1(ET-1)、同型半胱氨酸(Hcy)和半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CystatinC)表达的失调在心血管疾病中的作用〔2，3〕。但是四者联合检测在老年人慢性心力衰竭病变进展时的作用及相关性尚未见报道。本实验探讨慢性心力衰竭老年患者血清中CypA、ET-1、Hcy和CystatinC的表达及临床意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料 2011年1月至2012年6月我院确诊为慢性心力衰竭老年患者97例为观察组。排除标准:①伴有严重感染;②伴有恶性肿瘤;③伴有肺、肾及四肢疾病的患者。其中男52例，女45例，年龄60～83〔平均(66.0±6.5)〕岁。收集同期在我院进行健康检测，认定为各器官功能正常的健康老年人79例作为对照组，其中男40例，女39例，年龄60～78〔平均(65.5±6.9)〕岁。

1.2 CypA、ET-1、Hcy和CystatinC的检测 观察组于确诊后的次日清晨抽取静脉血10 ml，对照组常规抽取清晨静脉血10 ml，分离血清后进行蛋白的检测。CypA、ET-1、Hcy和CystatinC试剂盒均购自北京中杉金桥公司，检测均应用ELISA法，并由主管检验师完成，减少误差，严格质量控制。

1.3 统计学方法 应用SAS6.12软件进行方差分析或t检验。

2 结果

2.1 两组血清中CypA、ET-1、Hcy和CystatinC的表达比较与对照组比较，观察组CypA、ET-1和Hcy高表达，而CystatinC低表达(P ＜0.01，P ＜0.001)，见表1。

2.2 观察组中不同心功能分级患者血清中CypA、ET-1、Hcy和CystatinC的表达 随着心功能分级的增加，血清中cypA、ET-1和Hcy的表达明显升高，而血清中CystatinC的表达明显下降(P＜0.05，P＜0.01)。见表2。

2.3 观察组患者血清中CypA、ET-1、Hcy和CystatinC表达的相关性分析 观察组患者血清中CypA和ET-1(r=0.45，P=0.012 0)、CypA 和 Hcy(r=0.41，P=0.010 4)、ET-1 和 Hcy(r=0.43，P=0.018 2)的表达呈正相关性;Hcy和CystatinC的表达呈负相关性(r= －0.47，P=0.018 2)。

表1 两组血清中CypA、ET-1、Hcy和CystatinC的表达比较(ng/L，±s)

表1 两组血清中CypA、ET-1、Hcy和CystatinC的表达比较(ng/L，±s)

分组 n CypA t值 P值 ET-1 t值 P值 Hcy t值 P值 CystatinC t值 P值观察组 97 105.14±30.25 13.43 0.000 4 79.51±12.23 10.47 0.009 7 17.79±4.51 16.87 ＜0.000 1 0.96±0.2915.47 0.000 1对照组 79 50.68±19.61 46.69±10.50 7.81±2.49 1.87±0.96

表2 观察组不同心功能分级患者血清中CypA、ET-1、Hcy和CystatinC的表达比较(ng/L，±s)

表2 观察组不同心功能分级患者血清中CypA、ET-1、Hcy和CystatinC的表达比较(ng/L，±s)

心功能分级 n CypA F值 P值 ET-1 F值 P值 Hcy F值 P值 CystatinC F值 P值Ⅱ 37 89.13±20.37 10.24 0.008 0 68.71±17.61 8.78 0.012 0 14.69±6.54 11.37 0.007 4 1.14±0.35 9.47 0.009 7Ⅲ 31 100.23±27.94 80.75±14.42 16.53±5.84 0.94±0.26Ⅳ 29 125.68±31.43 98.65±20.32 20.86±6.51 0.82±0.26

3 讨论

CypA是一种具有趋化功能的细胞因子，能够趋化损伤因子向炎症部位的聚集。CypA还可以促进细胞外信号调节激酶的活性，并通过 PI3K的作用，调节新生血管平滑肌细胞(VSMC)的生长和发育。当体内细胞或组织中出现明显的氧化反应和较强应激时，受损伤的细胞分泌CypA增加，使内环境中CypA的表达均升高，而心力衰竭在病变进展时会出现明显的氧化反应，因此认为心力衰竭时CypA的表达升高。CypA在作用过程中可能与生长因子可能具有共同的信号通路位点，并能激活ERK1/2，增加DNA的合成，抑制细胞的凋亡。ET-1是由内皮细胞合成和释放的21个氨基酸构成的多肽，是已知最强的缩血管物质之一，其中心力衰竭中也有明显的促进作用〔4〕。Hcy是甲硫氨基酸转甲基后生成的中间代谢产物，Hcy水平升高对血管内皮有损害，而且通过多种途径促进血管病变的发生〔5〕。CystatinC在有核细胞均有表达，可以参与细胞内外蛋白水解的调控，保护细胞免受不适当的内源性或外源性蛋白酶水解〔1〕。有研究认为CystatinC也是重要的组织蛋白酶蛋白酶抑制剂，在动脉壁蛋白溶解和抗蛋白溶解活性平衡中发挥重要作用，并参与血管壁和细胞外基质产生和降解的动态平衡，对心力衰竭有重要的调节作用〔6〕。

本研究提示四种蛋白异常表达与心力衰竭的发生发展有关。CypA、ET-1、Hcy和CystatinC可能具有协同正向作用，也提示四种蛋白在疾病进展中可能存在明显的级联反应。CypA激活后诱导3个重要的生物学反应及过程:首先，分泌到细胞外的CypA和ET-1刺激VSMC的ERK1/2、AKt和JAK磷酸化，引起下游NFκB通路激活，促进血管平滑肌细胞的大量增生，同时放大活性氧(ROS)的产生。其次，CypA也是直接的炎症细胞趋化物质，可诱导炎症细胞分泌Hcy、白细胞介素(IL)-6和IL-12，并可以有效地通过活化NFκB通路，刺激单核巨噬细胞的表达，并通过激活基质金属蛋白酶(MMPs)调节蛋白水解活性，为炎症细胞迁移创造条件。CypA、ET-1、Hcy和CystatinC是心力衰竭级联反应过程中的一部分，但是其调节的具体机制尚不完全清楚。也有研究认为Hcy和CystatinC可能通过调节血管内皮细胞合成和降解一氧化氮，影响心肌的舒张功能〔7〕，或者通过对氧化作用的调节，使心肌细胞膜脂质过氧化，对心肌细胞形成损伤〔8〕。

总之，老年慢性心力衰竭患者血清中 CypA、ET-1、Hcy和CystatinC异常表达，四者的协同作用在疾病的发展中具有重要促进作用，联合检测可能对判断病变程度有一定价值。

1 胡 欣，徐 岩，史学功，等.CystatinC、Hcy及TNF-α在慢性心力衰竭患者血清中的表达变化〔J〕.中国现代医学杂志，2006;16(23):3604-6.

2 杨玉雯，王德国，王 新，等.老年心力衰竭患者血浆CGRP和ET-1水平的相关性分析〔J〕.实用老年医学，2005;19(4):187-8.

3 张 永，张友亮，黄宇理.血浆脂联素、同型半胱氨酸与慢性心力衰竭关系的分析〔J〕.中华全科医学，2011;9(8):1244-5.

4 胡咏梅，赵思勤，李 秋，等.慢性心力衰竭患者血浆脑钠肽和内皮素-1水平与血流动力学的相关性〔J〕.临床心血管病杂志，2006;22(11):672-4.

5 孙云鹏，郭 宏.心力衰竭患者同型半胱氨酸和基质金属蛋白-9的相关性研究〔J〕.齐齐哈尔医学院学报，2011;32(4):2248-9.

6 张 良，周胜华，方臻飞，等.慢性心力衰竭患者胱抑素C的变化及意义〔J〕.现代生物医学进展，2010;10(7):1291-3.

7 张书敏，王永梅，杜贻萌，等.胱抑素C对大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响〔J〕.山东大学学报(医学版)，2010;48(10):9-13.

8 张绍武，宁 洁.心力衰竭患者血清N端脑钠肽前体和同型半胱氨酸的测定及临床意义〔J〕.陕西医学杂志，2011;40(8):979-80.