负压创面治疗对烧伤创面脓毒症小鼠死亡率的影响

刘 洋，胡大海，董茂龙，白晓智，李小强

负压创面治疗(negative pressure wound therapy，NPWT)已在临床使用了20多年，大量文献表明，NPWT治疗针对创面愈合，尤其是对于复杂的难愈性创面能显著控制创面感染［1］、缩短创面愈合时间［2］。Kubiak 等［3］研究表明 NPWT 可以明显减轻腹腔脓毒症的全身炎性反应，保护脏器功能。Steven等［4］的研究表明，NPWT能降低开放性骨折创面中铜绿假单胞菌的含量，然而其作用机制还未彻底阐明。NPWT对深二度烧伤创面的早期应用，能显著降低烧伤淤滞带的范围，促进创面愈合［5-6］。本研究建立了铜绿假单胞菌感染的小鼠烫伤创面模型，观察NPWT治疗对由创面感染导致脓毒症小鼠病死率的影响，为进一步探索其相关作用机制奠定基础。

1 材料与方法

1.1 实验动物 清洁级成年雄性C57小鼠108只，体质量18～20 g，8～12周龄，清洁环境饲养，由第四军医大学动物实验中心提供。

1.2 主要仪器与试剂 RNPT 1型负压治疗仪及一次性负压治疗海绵购自山西以诺医疗科技有限公司，Xenogen IVIS 200小动物活体成像系统购自美国，由美国Bio-Rad公司生产，DU@800分光光度仪由美国Beckman Coulter公司生产。细菌荧光素酶目的基因luxCDABE标记的野生型铜绿假单胞菌菌株PAO1-1ux由西北大学生命科学院段康民教授惠赠，使用前将菌株扩增培养至对数生长期，以比浊法调整菌液浓度约达(1.0×109)cfu/ml。

1.3 动物模型建立

1.3.1 烫伤动物模型建立:用3%戊巴比妥钠按40 mg/kg剂量腹腔注射行全身麻醉，背部脱毛。脱毛、用清水洗涤后擦干背部皮肤，在小鼠背部脱毛区正中部位，放置烫伤模具，开启蒸汽烫伤仪电源，将蒸汽喷头伸入圆筒，保持在距离皮肤1 cm位置，形成一个直径2 cm的Ⅲ度圆形烫伤创面，造成的烫伤深度采用病理切片证实。……