齐朝阳 高宇琳 黎琳欢 陈艳 曾鸿 罗睿玲
妊娠高血压疾病是妊娠产科特有的并发症,该病严重影响母婴健康,是孕产妇和围产儿发病率和死亡率增高的主要原因之一。国内发病率为9.4%,国外发病率为7%~12%[1]。近年来有研究发现滋养层细胞侵蚀缺陷,尤其是血管重塑障碍是妊娠高血压疾病的主要发病机制[2]。本研究试验通过检测各组妊娠高血压疾病胎盘的CD31的表达情况及微血管密度(MVD)测定,以期探讨胎盘血管病变与妊娠高血压疾病发生发展的关系,现报道如下。
1.1 一般资料 选择本院2008年-2012年住院孕妇149例,年龄20~31岁,孕周37~41周,均无其他产科并发症及其他原发性内科疾病。其中正常妊娠对照组29例,试验组轻度子痫前期、重症子痫前期、子痫、HELLP综合征各30例,其诊断标准参照丰有吉主编的统编教材《妇产科学》第二版[1],各组病例均经剖腹产结束分娩的初产妇,术前均未进入产程。
1.2 标本收集及处理 胎盘娩出后立即从胎盘中央切取全层胎盘组织,分成4个组织块,大小约1.5 cm×1.5 cm×0.3cm,再入中性甲醛固定24h,石蜡包埋切片,HE染色,镜下观察每例切片,再选取一块母体面完整、无明显梗死、无纤维素沉积及出血的组织蜡块做免疫组化实验。
1.3 免疫组化染色 鼠抗人单克隆抗体CD31抗体及二抗均购于福建迈新公司,严格按照试剂盒说明书指导步骤进行染色。所有组织蜡块5μm层厚切片,常规脱蜡至水,3% H2O215min阻断内源性过氧化物酶活性,置入预热到95℃的EDTA中加热15min,室温中冷却20min后洗涤。滴加一抗CD31后湿盒中孵育,在37℃恒温箱2h,PBS充分洗涤(含吐温20,pH7.2),滴加二抗,温室孵育30min,PBS充分洗涤,滴加增强剂,温室孵育10min,PBS充分洗涤,DAB显色。……