子宫内膜癌中抑癌基因P27蛋白与癌基因P185蛋白的表达及临床意义

钱沁佳

（海南省第三人民医院妇产科，海南三亚570000）

子宫内膜癌是妇科常见恶性疾病，临床诊断除常规检查外，基因检测在临床诊断中也起到积极作用。P27蛋白是细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂因子，其在细胞周期调控中起重要作用，与肿瘤发生、发展的机制相关；P185蛋白是一种癌基因，临床已应用于多种恶性肿瘤诊断［1］。作者为研究应用P27特异性单克隆抗体、P185特异性单克隆抗体联合检测在子宫内膜癌诊断及判断预后的应用价值，对本院2008年1月至2010年3月收治的子宫内膜癌、子宫非典型增生病变及同期正常子宫内膜组织进行检测，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取本院2008年1月至2010年3月收治的子宫内膜癌患者66例（癌症组），年龄42～82岁；子宫非典型增生病变患者29例（增生组），年龄41～83岁；正常子宫内膜组织31例（对照组），年龄39～81岁。

1.2 试剂 S－P免疫组化试剂盒，P27单克隆抗体、c－erbB－2单克隆抗体，均购自福州迈新公司。

1.3 方法

1.3.1 采用S－P免疫组化方法 步骤：（1）石蜡切片4μm厚，脱蜡水化后，用磷酸盐缓冲液（PBS），pH＝7.4冲洗3次，每次5min；（2）加入50μL过氧化酶阻断溶液，室温孵育10min；（3）用PBS冲洗3次，每次5min；（4）加非免疫性动物血清50 μL，室温孵育5min，后用PBS冲洗；（5）加第一抗体50μL（P27抗体或P185抗体），室温孵育60min；（6）用PBS冲洗3次，每次5min；（7）加生物素标记的第二抗体50μL，室温孵育10min；（8）用PBS冲洗3次，每次5min；（9）加链亲和素－过氧化物酶溶液50μL，室温孵育10min；（10）用PBS冲洗3次，每次5min；（11）加新鲜配制的DAB溶液2滴显色；（12）自来水冲洗，苏木素复染，中性树胶封固。

1.3.2 结果判定 光镜随机观察10个高倍视野，计数1 000个细胞，以细胞核／浆（P27）、细胞膜／浆（P185）阳性为棕黄色颗粒。……