长阳皱皮木瓜化学成分研究

廖矛川，熊姝颖，杨芳云，葛岚岚

(中南民族大学 药学院，武汉430074)

皱皮木瓜为蔷薇科木瓜属植物贴梗海棠［Chaenomeles speciosa(Sweet)Nakai］的近成熟果实，为一种常用的中药，含有糖类，挥发油类，黄酮类，萜类，有机酸类，氨基酸等成分［1-4］，具有舒肝和胃、祛风顺气、祛湿止痛之功效，用于胸闷不适，风湿筋骨疼痛，止吐，止泻［5］.

目前木瓜的研究多从农林业的角度研究其中的营养成分，药用研究仅集中在有机酸、黄酮等少数几种化学成分，研究的木瓜品种较混乱，易混淆.本实验的皱皮木瓜产自全国最早的木瓜GAP种植基地湖北长阳县［6］，资丘木瓜已成为道地药材.采用系统的提取分离方法，研究不同结构种类的化学成分，从氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取部分共分离得到5个化合物，经过鉴定确定了结构，分别是齐墩果酸(化合物Ⅰ)，胡萝卜苷(化合物Ⅱ)，β-谷甾醇(化合物Ⅲ)，咖啡酸(化合物Ⅳ)，咖啡酸正丁酯(化合物Ⅴ).其中化合物Ⅴ是首次从本种植物中发现.

1 实验部分

1.1 材料与仪器

皱皮木瓜购买自湖北长阳土家族自治县，经中南民族大学药学院万定荣教授鉴定为Chaenomeles speciosa(Sweet)Nakai的果实.

核磁共振波谱仪(TMS内标，德国BrukerAM-400)，中压柱层析系统(HEP-50A型，武汉金帝)，旋转蒸发器(RE-52型)，高效液相色谱仪(Ultimate-3000半制备型，美国Dionex公司)，电子天平(精度0.1mg，AR2140型，上海奥豪斯仪器有限公司)，提取罐、浓缩罐(武汉市江汉医疗制药设备有限公司)，循环水真空泵(SHZ-Ⅲ型，上海亚荣生化仪器)，电热鼓风干燥箱(101-0AB型，天津市泰斯特)，实验试剂为分析纯(天津博迪有限公司)，硅胶(柱层析用，200-300目，青岛海洋化工厂分厂)，氘代氯仿、氘代甲醇(J ＆ K CHEMICAL LTD).

图1 化合物Ⅰ-Ⅴ的结构Fig.1 Structures of compound I～V

1.2 提取分离

皱皮木瓜干燥果实约20 kg，粉碎过筛，90%乙醇回流提取3次，每次3 h，得提取液.减压浓缩回收乙醇，得浸膏6123 g.浸膏用等质量的蒸馏水溶解分散得混悬液，分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取.将氯仿部分的萃取物过正相硅胶(200～300目)，环己烷-乙酸乙酯梯度洗脱(体积比分别为15︰1，9︰1，4︰1，7︰3，3︰2，1︰1，2︰3，1︰4)分离后的流分，经离心沉淀得化合物I(1.32 g);将乙酸乙酯部分的萃取物用大孔树脂D101，乙醇-水梯度洗脱(体积比分别为1︰9，3︰7，1︰1，7︰3，9︰1)，再经过正相硅胶色谱，二氯甲烷-丙酮梯度洗脱(体积比分别为15︰1，12︰1，10︰1，8︰1，4︰1，2︰1，1︰1)分离，离心过滤后得化合物II(455.9 mg)和化合物 III(157.8 mg)，提取物经半制备高效液相，甲醇-水梯度洗脱，分离得化合物IV(6.3 mg);将正丁醇部分经大孔树脂D101，乙醇-水梯度洗脱(体积比分别为1︰9，3︰7，1︰1，7︰3，9︰1)，经过葡聚糖凝胶LH-20分离，再经过高效液相色谱分离得化合物V(9.4 mg).

2 结构鉴定

化合物 I:白色粉末(氯仿).EI-MS m/z:456［M］+.分子式 C30H48O3，分子量为 456.1H NMR(400MHz，CDCl3)δ:5.27(1H，brs，H-12)，3.20(1H，dd，J=11.2，4.8Hz，H-3)，1.13(3H，s，H-27)，0.99(3H，s，H-25)，0.93(3H，s，H-30)，0.91(3H，s，H-29)，0.90(3H，s，H-24)，0.77(3H，s，H-23)，0.75(3H，s，H-26).13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:183.6(C-28)，143.6(C-13)，122.6(C-12)，79.0(C-3)，55.2(C-5)，47.6(C-9)，46.5(C-17)，45.9(C-19)，41.6(C-14)，40.9(C-18)，38.8(C-4)，39.3(C-8)，38.4(C-1)，33.8(C-21)，33.0(C-29)，32.4(C-7)，32.4(C-22)，30.9(C-20)，28.1(C-23)，27.7(C-15)，27.2(C-2)，25.9(C-27)，23.6(C-16)，23.3(C-11)，22.9(C-30)，18.3(C-6)，17.2(C-26)，15.5(C-24)，15.3(C-25)，以上数据与文献［7，8］报道数据基本一致，鉴定为齐墩果酸.

化合物 II:白色粉末(吡啶).EI-MS m/z:414［M-Glc］+.分子式为 C35H60O6，分子量为 576.1HNMR(400MHz，C5D5N)δ:5.37(1H，d，J=3.5Hz，H-6)，5.01(1H，d，J=7.7Hz，glcH-1')，4.02(1H，m，H-3)，3.80～4.63(6H，m，glc H-2'～6')，1.07(3H，d，J=8.1Hz，H-21)，0.95(3H，s，H-19)，0.91(3H，t，J=7.7Hz，H-29)，0.89(3H，d，J=8.7Hz，H-27，26)，0.67(3H，s，H-18).13C NMR(100MHz，C5D5N)δ:142.5(C-5)，124.8(C-6)，103.9(glc C-1')，79.9(glc C-3')，79.8(C-3)，79.4(glc C-5')，76.7(C-2')，72.9(glc C-4')，64.1(glc C-6')，58.1(C-14)，57.6(C-17)，51.6(C-9)，47.3(C-24)，43.8(C-13)，38.8(C-12)，38.2(C-4)，37.7(C-10)，37.7(C-1)，35.5(C-20)，33.4(C-22)，33.3(C-25)，31.6(C-7)，30.7(C-8)，29.8(C-2)，27.7(C-16)，24.5(C-15)，26.4(C-23)，22.8(C-28)，21.3(C-11)，20.7(C-26)，20.5(C-27)，20.3(C-19)，20.3(C-21)，13.5(C-29)，13.3(C-18)，以上数据与文献［9，10］的数据基本一致，鉴定为胡萝卜苷.

化合物 III:白色粉末(氯仿).EI-MS m/z:414［M+］.分子式为 C29H50O，分子量为 414.1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ:5.35(1H，d，J=5.3Hz，H-6)，3.51(1H，m，H-3)，1.03(3H，s，H-19)，0.96(3H，d，J=8.1Hz，H-21)，0.88(3H t，J=7.8Hz，H-29)，0.83(3H，d，J=8.7Hz，H-27)，0.81(3H，d，J=8.7Hz，H-26)，0.67(3H，s，H-18).13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ:140.8(C-5)，121.7(C-6)，71.8(C-3)，56.8(C-14)，56.1(C-17)，50.1(C-9)，45.8(C-8)，42.3(C-4)，42.3(C-13)，39.8(C-12)，37.3(C-1)，36.5(C-10)，36.2(C-20)，33.9(C-24)，31.9(C-7)，31.9(C-29)，31.7(C-2)，29.1(C-28)，29.1(C-25)，28.3(C-16)，26.1(C-22)，24.3(C-15)，23.1(C-23)，21.9(C-11)，19.8(C-26)，19.4(C-27)，19.0(C-19)，18.7(C-21)，11.9(C-18)，以上数据与文献［11］的数据基本一致，鉴定为β-谷甾醇.

化合物IV:黄色结晶(丙酮).分子式为C9H8O4，分子量为 180.1H-NMR(400MHz，C3D6O)δ:7.52(1H，d，J=15.9Hz，H-7)，7.14(1H，d，J=2.0Hz，H-2)，7.02(1H，dd，J=8.2，1.9Hz，H-6)，6.85(1H，d，J=8.2Hz，H-5)，6.25(1H，d，J=15.9Hz，H-8).13C-NMR(100MHz，C3D6O)δ:67.1(C-9)，147.6(C-3)，145.3(C-4)，144.9(C-7)，126.8(C-1)，121.5(C-6)，115.4(C-8)，114.9(C-2)，114.2(C-5)，以上数据与文献［12］的数据基本一致，鉴定为咖啡酸.

化合物 V:棕褐色结晶(氯仿).分子式为C13H16O4，分子量为 236.1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ:7.56(1H，d，J=15.9Hz，H-7)，7.07(1H，d，J=1.9Hz，H-2)，6.98(1H，d，J=8.0Hz，H-5)，6.86(1H，dd，J=8.5，1.9Hz，H-6)，6.24(1H，d，J=15.9Hz，H-8)，4.16(2H，m，H-10)，1.67(2H，m，H-11)，1.39(2H，m，H-12)，0.93(3H，t，H-13).13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ:167.9(C-9)，146.3(C-3)，144.7(C-7)，143.8(C-4)，127.6(C-6)，122.3(C-1)，115.8(C-8)，115.5(C-2)，114.5(C-5)，64.6(C-10)，30.8(C-11)，19.1(C-12)，13.7(C-13)，以上数据与文献［13］的数据基本一致，鉴定为咖啡酸正丁酯.

3 结语

通过对长阳皱皮木瓜的系统分离，已初步得到了5个化合物，1个为三萜类化合物，2个为甾醇类化合物，2个为有机酸类化合物，分别为齐墩果酸、胡萝卜苷、β-谷甾醇、咖啡酸和咖啡酸正丁酯.其中化合物V是首次从该种植物中分离得到，这些化合物的发现为进一步研究该药奠定了一定的基础.

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