冠心病病人血清MMP-9与Hcy浓度变化及临床意义

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(1 青岛大学医学院诊断学教研室,山东 青岛 266021; 2 青岛市海慈医疗集团血液净化中心; 3 青岛大学医学院2011级本科生)

基质金属蛋白酶-9(MMP-9)是一种锌离子依赖性蛋白水解酶，最早由SOPATA等[1]在人的中性粒细胞中提纯。MMP-9能够降解细胞外基质，破坏粥样斑块的稳定性，因此，其在冠心病(CHD)的发生发展过程中发挥重要作用[2-3]。同型半胱氨酸(Hcy)可参与低密度脂蛋白的氧化，促进泡沫细胞的生成，还可激活多种细胞因子及黏附分子，发挥促炎作用，加速动脉粥样硬化的形成[4]。因此，Hcy被认为是CHD的独立危险因素之一。本研究检测不同类型CHD病人血清MMP-9、Hcy浓度的变化及其相关性，探讨两者在CHD发病中的作用及临床意义。现将结果报告如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

1.1.1CHD组 根据WHO关于CHD的诊断标准，从我院附属医院2011年3—6月的住院病人中选取CHD病人60例，男32例，女28例；年龄38～85岁，平均(61.96±11.23)岁。其中急性心肌梗死(AMI)组20例，男11例，女9例，平均年龄(61.75±14.34)岁；不稳定型心绞痛(UAP)组20例，男10例，女10例，平均年龄(62.80±13.16)岁；稳定型心绞痛(SAP)组20例，男11例，女9例，平均年龄(59.85±8.61)岁。

1.1.2对照组 选取同期健康体检者20例作为对照组，其中男9例，女11例，年龄为55～86岁，平均(63.45±8.01)岁；经询问病史及常规体格检查未见异常。

CHD组和对照组均排除炎症、感染、心肌病、糖尿病、肿瘤、肝肾功能衰竭、自身免疫性疾病等疾病，无近期手术或创伤史。各组间年龄、性别比较，差异无统计学意义。

1.2 检测指标及方法

所有研究对象均于清晨采集空腹静脉血4 mL，37 ℃水浴30 min后，3 000 r/min离心10 min分离血清，分装于两个EP管中，并于-20 ℃密封保存。MMP-9、Hcy均采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定，试剂盒由美国ADL公司提供。

1.3 统计学处理

2 结 果

2.1 各组MMP-9和Hcy浓度的比较

CHD组MMP-9和Hcy浓度均高于对照组，差异有显著性(t′=6.73、6.40，P<0.01)。AMI组MMP-9和Hcy浓度显著高于UAP组、SAP组及对照组(F=35.91、40.75，q=4.95～14.14，P<0.01)；UAP组高于SAP组及对照组(q=5.08～7.49，P<0.01)；SAP组与对照组比较差异无统计学意义(q=0.39、1.48，P>0.05)。见表1。

2.2 CHD病人血清MMP-9和Hcy浓度的相关性

CHD病人血清MMP-9和Hcy浓度呈正相关(r=0.490，P<0.01)。

2.3 CHD病人血清MMP-9和Hcy浓度的受试者工作曲线(ROC)分析

AMI病人血清MMP-9和Hcy浓度的ROC曲线下面积(AUCROC)均大于0.9，分别为0.996和0.981，对AMI的诊断价值较高，同时具有较高的灵敏度和特异度。见表2。血清MMP-9和Hcy浓度对UAP也具有较高的诊断价值，其AUCROC分别为0.940和0.914。见表3。SAP组血清MMP-9和Hcy浓度的AUCROC分别为0.531和0.661，对SAP无诊断价值。

表1 CHD组与对照组血清MMP-9和Hcy浓度比较

表2 AMI病人血清MMP-9和Hcy诊断价值的比较

表3 UAP病人血清MMP-9和Hcy诊断价值的比较

3 讨 论

MMP-9又称明胶酶B，是一种高度保守的、以无活性酶原形式分泌的、依赖于锌离子的蛋白水解酶，主要由中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞等分泌。MMP-9可降解组织的Ⅳ型胶原、弹性蛋白等，从而破坏细胞外基质的完整性，导致血管中层平滑肌细胞(VSMC)移行至内膜层，并大量增殖形成斑块。因此，MMP-9在动脉粥样硬化(AS)的发生、发展过程中发挥重要作用。另外，MMP-9可诱发VSMC释放TNF-α，使大量VSMC发生凋亡，导致斑块肩部无法发挥支撑作用；MMP-9还可降解斑块纤维帽的胶原及结缔组织，使纤维帽变薄，斑块抵抗应力的能力减弱，稳定性遭到破坏，易于破裂，继发血栓，进而导致CHD的急性发作。已有研究显示，不稳定斑块中MMP-9的浓度可达稳定斑块的3～5倍，证实MMP-9与AS斑块的稳定性密切相关，是导致斑块不稳定的重要因素[5]。

本研究结果显示，CHD病人血清MMP-9浓度明显高于对照组，AMI组、UAP组血清MMP-9浓度明显高于SAP组，并随CHD病情严重程度增加而呈增高趋势。MMP-9是一种新型的炎症递质，在炎症反应过程中，AS斑块中浸润的炎性细胞可释放大量的MMP-9，增强IL-1β、TNF-α等炎性递质的活性，并相互诱生、循环作用，使炎症反应进一步扩大，CHD病情加重。另外，在IL-6、IL-18等炎性因子的作用下，炎性细胞释放MMP-9加强，导致CHD病人血清MMP-9浓度进一步升高[6]。CHD病人AS斑块中MMP-9与其他炎症因子共同作用，导致斑块的炎性状态，最终破坏粥样斑块的稳定性，引起斑块破裂[7]。因此，血清MMP-9浓度在一定程度上可反映CHD的严重程度，对CHD的病变程度有一定的预测价值。

Hcy是甲硫氨酸代谢过程中产生的含硫氨基酸，其合成及代谢过程中酶缺乏或叶酸、维生素B12缺乏可导致血清Hcy浓度显著升高，高于15 μmol/L被称为高Hcy血症(HHcy)。Hcy可参与血管内皮舒张因子一氧化氮(NO)的代谢过程，导致舒张障碍，对血管内皮造成损伤，进一步引起血管痉挛及局部血栓形成[8]。Hcy合成及代谢过程中产生大量的氧自由基及过氧化物，可氧化低密度脂蛋白(LDL)，形成OX-LDL，而OX-LDL可促进泡沫细胞的生成，引起血管壁增厚、血管阻力增加，导致AS斑块形成[9]。

本研究结果显示，CHD组Hcy浓度显著高于对照组，AMI组、UAP组血清Hcy浓度明显高于SAP组，随CHD病情严重程度增加，血清Hcy浓度呈上升趋势，提示Hcy浓度可反映CHD的病情严重程度。PAN等[10]研究显示，降低血清Hcy浓度并不能减少心血管疾病的病死率和心血管事件的发生率，Hcy浓度与CHD患病风险之间并无联系，两者之间只是一种伴随关系。此观点存有争议，BOUSHEY等[11]研究表明，血清Hcy浓度越高，罹患CHD的风险越高。因此，Hcy是动脉粥样硬化性疾病的危险因子，可导致CHD的发生，而不是CHD的伴随现象。SHASTRY等[12]研究表明，Hcy可上调MMP-9 mRNA的表达，增加MMP-9的合成并促进其分泌，因此，CHD病人血清MMP-9与Hcy浓度呈正比。本文研究结果与其相符。

根据ROC曲线分析，当AUCROC>0.9时对疾病的诊断具有较高的准确度。本文的研究结果显示，AMI和UAP病人血清MMP-9和Hcy浓度的AUCROC分别为0.996、0.981和0.940、0.914，均具有较高的灵敏度和特异度，但UAP较AMI病人低。SAP病人AUCROC分别为0.531和0.661，提示血清MMP-9和Hcy浓度对SAP无诊断价值，这可能与SAP病人的AS斑块较稳定有关。血清MMP-9和Hcy浓度变化对AMI、UAP具有较高的诊断价值，其升高程度可用于判断CHD病情的严重程度，因此，检测血清MMP-9和Hcy对CHD的诊断、危险分层及预后预测具有重要意义。

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