肝癌病人癌组织与血浆p16及APC基因甲基化检测及意义

，，，

(青岛大学医学院营养研究所，山东 青岛 266021)

原发性肝癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，而在临床上80%～90%的肝癌病例为肝细胞性肝癌(HCC)。HCC的发生是一个多因素、多阶段的复杂过程，其发病的分子机制尚不清楚。研究表明，HCC的发生不仅与基因突变有关，抑癌基因启动子区CpG序列异常甲基化导致的基因失活也是肝癌发生的一个重要途径[1-3]。多肿瘤抑制因子p16和结肠腺瘤样息肉基因(APC)是两个重要的肿瘤抑制基因，其中p16基因是细胞周期的负调控因子[1]，APC基因可控制细胞分裂过程中起关键作用的基因的表达[4]。已有研究结果显示，肝癌、胃癌等多种肿瘤组织及血浆标本中p16、APC基因的启动子区域CpG岛常发生异常甲基化[2,5-6]，但不同研究者报道的p16、APC基因甲基化在肝癌组织及血浆标本的检出率有一定差异，特别是基因甲基化在癌组织与对应血浆标本表达的情况存在较大差异。本研究采用实时荧光PCR技术测定86例病人HCC组织及相应癌旁正常组织、血浆中p16、APC基因启动子区CpG岛甲基化情况，分析p16、APC基因甲基化在癌组织与血浆标本检出情况及其与HCC病人临床特征关系，并探讨其临床意义。

1 材料与方法

1.1 材料来源

选取2008年6月—2009年6月于青岛大学医学院附属医院行外科切除术的HCC病人标本86例，男69例，女17例；以24例正常人及良性肝病病人正常肝组织作为对照。全部病例均经组织病理学检查证实，根据国际抗癌联盟(UICC)分期标准对HCC进行分期。

1.2 标本的获取

术前采集受检者外周静脉血5 mL，2 h内离心分别取血浆和血细胞置于1.5 mL塑料离心管中；……