蒙兰青,陆婉杏,黄建敏,黄晓华,黄清,袁胜山
(右江民族医学院附属医院神经内科,广西 百色 533000 E-mail:menglanqing@sina.com)
2008年中国第三次死因回顾抽样调查资料表明,脑卒中已上升为中国的首位死因,幸存者中残疾率高达75%[1]。脑卒中中缺血性卒中占60%~80%,缺血性脑损伤机制繁多复杂又相互联系,脑缺血不仅导致脑神经元损伤,而且还损伤胶质细胞和作为供给胶质细胞、神经元氧和营养物质的微血管,即神经血管单元 (neurovascular unit,NVU)的均受损[2]。我们前期研究和目前的研究已发现三七总皂苷具有抑制脑卒中后的细胞凋亡、脑水肿和炎症反应等多种作用。但是三七总皂苷对脑缺血后NVU 的影响目前报道较少。因此,我们基于NVU 整体概念,观察三七总皂苷对脑缺血后神经元、胶质细胞、微血管的影响,进一步探讨其在脑缺血中的作用特点。
1.1.1 动物 Wistar大鼠60只,体重 (240±20)g,清洁级,购自右江民族医学院实验动物中心。
1.1.2 药物与试剂 三七总皂苷 (血塞通注射液,昆明兴中制药有限公司,批号:20051102),小鼠抗大鼠NeuN 单克隆抗体和兔抗鼠GFAP 多克隆抗体购自美国Millipore公司,兔抗鼠Laminin多克隆抗体购自英国Abcam 公司。
1.2.1 动物分组与造模 所有大鼠随机分为对照组 (20只),假手术组 (20只)和三七总皂苷组 (20只),每个组又按手术后24h、7d分为2个亚组,每个亚组大鼠10只。参照Longa等[3]大鼠大脑中动脉缺血模型的造模方法。大鼠以10%水合氯醛 (350mg/kg)腹腔注射麻醉,颈正中切开逐层分离暴露右颈总动脉大、颈外动脉,线栓沿颈总动脉经颈内动脉入颅阻断大脑中动脉,遇到阻力即停止,从颈总动脉分叉处计算插入深度 (18±2)mm,假手术组插入深度小于10 mm。……