基于颜色判定的LAMP 方法快速检测结核分枝杆菌

刘威 李奉京 黄留玉 袁静

1 中国人民解放军疾病预防控制所 （北京 100850）

2 北京蓝谱生物科技有限公司 （北京 100027）

结核分枝杆菌(Mycobacterium. tuberculosis)，俗称结核杆菌，是引起结核病的病原菌。结核分枝杆菌为细长略带弯曲的杆菌，大小1～4×0.4μm，牛分枝杆菌则比较粗短。据WHO 统计，全世界约每3 个人中就有1 个人感染了结核分枝杆菌，在某些发展中国家成人中结核分枝杆菌携带率高达80%，其中约5%～10%携带者可发展为活动性结核病。2010 年，有880 万人罹患结核病，140万人死于结核病（WHO，2010）。我国是世界上22 个结核病高负担国家之一，约三分之一的人口已感染了结核分枝杆菌，受感染人数超过4亿。人感染结核后，治疗周期长，药物毒副作用大，而且耐药及多重耐药菌株的出现，给结核病患者的治疗带来很大困难。因此，建立快速、特异、灵敏的检测方法是当今结核病诊断和治疗的迫切需要，也是结核病疫情发生后，对密切接触者进行早期诊断、隔离、治疗，防止更多人员感染的前提。

目前，显微镜下观察仍是很多国家沿用的结核分枝杆菌检测手段（WHO，2008），但灵敏度低，需要对病人进行多次采样，反复检测。与此相比，痰培养检测的敏感性提高了100 倍[1]，同时也因其高度的特异性，是目前结核病诊断的金标准。然而在临床上，结核分枝杆菌在培养基上生长缓慢，使用传统的罗氏培养基培养所需时间长达1～2 个月[2]。因此在全世界与结核病的斗争中，寻找一种简单、快速、高效的诊断方法仍是一个关键性的问题。基于分子技术的PCR 方法在一定程度上解决了上述问题[3,4]，虽然该方法在灵敏度和特异性方面都有所提高，但整个检测过程仍需要5-6 个小时，且该方法需要专业的技术人员、特定的实验区域、精密的温度控制来进行开展。……