胰腺癌组织端粒酶逆转录酶的表达与临床病理的关系研究

薛福龙

（暨南大学附属第四医院/广州市红十字会医院普通外科，广东 广州 510220）

胰腺癌组织端粒酶逆转录酶的表达与临床病理的关系研究

薛福龙

（暨南大学附属第四医院/广州市红十字会医院普通外科，广东 广州 510220）

目的研究胰腺癌组织端粒酶逆转录酶（hTERT）的表达与临床病理的关系。方法回顾性分析我院在2009年6月至2014年2月间收治的46例胰腺癌患者的临床资料，对胰腺癌病灶大小、具体部位与临床分明、组织分级进行描述。利用SABC免疫组化，对hTERT表达进行检测。同时取46例患者癌旁组织进行对照。结果经研究发现，患者肿瘤部位和hTERT表达无关联（P＞0.05）。通过对胰腺癌患者胰腺组织观察可得知，有39例患者呈现hTERT表达为阳性，阳性率为84.8%，在癌旁组织中，有12例标本呈现为阳性，阳性率为26.1%。hTERT表达在临床分期中具有统计学意义（P＜0.05），其在Ⅰ期的hTERT表达阳性率最低，明显低于Ⅲ期和Ⅳ期。它与肿瘤分级、大小、位置无关联。结论人端粒酶逆转录酶在胰腺癌组织中表达较高，它的表达与肿瘤临床分期有很大关联，这表明hTERT表达在肿瘤组织与癌旁组织中的表达差异非常大。

胰腺癌；人端粒酶逆转录酶；胰腺组织

1 资料与方法

1.1 一般资料

以我院在2009年6月至2014年2月间收治的46例患者为研究对象，所有患者均行肿瘤切除术，对46例患者的石蜡包埋标本进行分析。男性25例，女性21例，患者年龄35～79岁，平均年龄（51.25±2.74）岁。同时取46例患者的癌旁组织进行对照分析。病理科医师均对患者标本重新切片，实施HE染色后，对疾病进行确诊。根据手术情况，记录肿瘤的大小与具体位置。

1.2 标本处理

胰腺癌患者标本通过手术对胰腺癌及癌旁组织进行收集获取。所有标本均行石蜡包埋连续切片，厚度约为5 μm，并贴于玻片上，在温度为60 ℃的条件下进行烘烤，1～2 h后，可熔蜡，熔蜡后使其置于37 ℃条件下备用，切片分别进行免疫组化染色与HE染色。

1.3 端粒酶逆转录酶检测

利用SABC法，阴性对照为PBS，阳性对照为hTERT表达的乳腺癌细胞。如果细胞质染色中包含棕黄色颗粒，则表明其为阳性细胞。于光镜下对细胞数量进行观察，若阳性细胞数超过了5%，则表明其为阳性。

1.4 胰腺癌组织分级与临床分期标准

雨又淅淅沥沥地下起来了。杨局长、王敬凯和侦技人员等化了装，前往大架子山。在一条小道边，有一棵落叶松的树干被砍了一个小平面，刷着红油，他们立即围着树干用手抠已被雨水浸得松软的土地，不一会儿，又一个茶色玻璃药瓶出现了。经检验，玻璃瓶上还是没留下指纹。打开密封的瓶盖，里面一张纸条上写着一行字：

根据权威组织分级标准，将其分为1级、2级、3级。以TNM临床分期标准为依据，将胰腺癌组织临床分期分为0期、Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期。

1.5 统计学方法

对本组研究的数据采用SPSS16.0统计软件进行分析，计量资料以均数±标准差（）表示，采用t检验，对计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

通过对患者胰腺癌端粒酶逆转录酶（hTERT）的表达观察可得知，有39例患者呈现为阳性，阳性率为84.8%。在癌旁组织中，有12份标本显示为阳性，阳性率为26.1%。胰腺癌hTERT表达阳性率明显高于癌旁胰腺组织的hTERT表达阳性率，对比存在较大差异，具有统计学意义（P＜0.05）。

如表1所示，从表中可得知，hTERT表达同肿瘤的具体位置和肿瘤大小无关，无统计学意义（P＞0.05）。hTERT表达在胰腺组织分级中也无统计学意（P＞0.05）。hTERT表达在临床分期中具有统计学意义（P＜0.05），其在Ⅰ期的hTERT表达阳性率最低，明显低于Ⅲ其和Ⅳ期。

3 讨 论

端粒酶是一种核糖核蛋白酶，其主要组成物质为蛋白质与RNA。可以自身RNA作为模板，对端粒DNA序列进行逆转录合，并在染色体末端添加[4]。据相关研究表明，在恶性肿瘤组织中，端粒酶检出率非常高，比例为85%～95%，不过在正常组织与良性肿瘤中，端粒酶检出率约为3.5%，明显低于恶性肿瘤端粒酶检出率[5]。

人类端粒酶的构成成分主要有三种，分别为RNA、端粒酶催化亚单位、端粒酶相关蛋白。根据临床研究显示，端粒酶催化亚单位是端粒酶活性的必要物质，它在乳癌、肺癌等疾病中，表达非常高，端粒酶催化亚单位与端粒酶活性在mRNA水平上一致。曾有研究者以直肠癌患者为例，取患者组织标本对其进行观察，通过观察发现，肿瘤组织的hTERT表达与癌旁组织相比明显要高。

据研究表明，端粒酶催化亚单位是端粒酶活性最需要的物质，在肺癌与乳癌中有表达较高，染色体5P是端粒酶催化亚单位的基因定位。从本次研究结果中可看出，hTERT表达在肿瘤组织中的表达非常高，且明显高于癌旁组织，不过二者并未存在太大关联。通过抗hTERT抗体，可实施免疫组化检测，经检测可发现，对于端粒活性太低的胰腺组织而言，其hTERT表达十分显著。对hTERT蛋白实施原位测定，有利于将端粒酶活性展现出来，对恶性肿瘤进行诊断。

从本次研究可得知，hTERT表达与肿瘤大小、位置、分级均无太大关联，它与临床分期关系较大，在癌旁组织中，阳性率为26.1%，这表明hTERT表达在肿瘤组织与癌旁组织中的表达存在很大差异。

[1] 钟英强,沈溪明,李海刚,等.hTERT在人胰腺癌组织中的表达及其与COX-2、P-gp、Bcl-2蛋白表达和临床病理特征的关系[J/OL].中华临床医师杂志(电子版),2008,2(8):877-885.

[2] 林若芸.重组人端粒酶逆转录酶基因表达载体的构建及检测端粒长度新方法初探[D].南宁:广西医科大学,2011.

[3] 梁旭竞,陈小佳,陈友鹏,等.人端粒酶逆转录酶慢病毒载体的构建及人肝细胞的初步筛选[J].中国病理生理杂志,2009,25(4): 826-829.

[4] 李姣,屈艺,母得志.端粒酶逆转录酶在神经系统疾病修复中的研究进展[J].中国修复重建外科杂志,2010,24(9):1138-1142.

[5] 林若芸,黎丹戎,钟艳平,等.过表达人端粒酶逆转录酶促进人脐静脉血管内皮细胞增殖[J].中国生物化学与分子生物学报,2011, 27(1):84-89.

表2 研究指标与感染的关系分析

经Logistic分析显示，未进行产前阻断、母体HBV DNA阳性、阴道顺产及出生后未24 h内接种疫苗均是乙型肝炎病毒携带孕产妇母婴传播的危险因素，详细分析数据见表2。

3 讨 论

乙型肝炎病毒携带孕产妇是孕产妇中极为特殊的一类人群，不仅其自身的疾病需进行有效防控[2,3]，且关于母婴传播方面的干预控制也极为重要。而要做到有效的防控母婴传播的目的，对于母婴传播的影响因素全面且细致的掌握是必要的。临床中对于此方面的研究并不少见，但是对于其中较多研究指标的研究差异不同程度存在[4,5]，如对于母乳喂养的合理性研究争议较大，另外，对于其他方面研究结果的差异也提示我们需进一步对此方面进行研究分析。本文中我们即就乙型肝炎病毒携带孕产妇母婴传播的影响因素进行分析研究，结果显示，251例乙型肝炎病毒携带孕产妇中新生儿感染的发生率为5.18%，基本与以往的较多研究一致，且其中未进行产前阻断、母体HBV DNA阳性、阴道顺产及出生后未24 h内接种疫苗的新生儿感染率相对更高，但是母乳喂养与人工喂养的感染率之间则无显著性差异，说明只要做好一定的相关措施，对于此类产妇仍提倡母乳喂养[6-8]，其并未造成感染率的明显提升，另经Logistic分析处理显示，未进行产前阻断、母体HBV DNA阳性、阴道顺产及出生后未24 h内接种疫苗均是乙型肝炎病毒携带孕产妇母婴传播的危险因素，应注意对上述方面的控制。

参考文献

[1] 尹玉竹,周瑾,张培珍,等.影响阻断乙型肝炎病毒母婴传播的危险因素分析[J].中华肝脏病杂志,2013,21(2):105-110.

[2] 钟凤娣.乙型肝炎病毒母婴传播相关因素分析[J].浙江预防医学,2012,24(2):69-71.

[3] 谌小卫,潘文涛,杨越波,等.乙型肝炎病毒母婴垂直传播相关临床因素分析[J].新医学,2011,42(12):778-781.

[4] 闫妙娥,张华,柳鑫,等.乙型肝炎孕妇母婴传播影响因素分析[J].肝脏,2011,16(4):283-285.

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[6] 张薇莉,赵隽,李伟.乙型肝炎病毒母婴传播影响因素探讨[J].中国当代儿科杂志,2011,13(8):644-646.

[7] 孙莲英,曾雪霞,符振旺,等.海南省新生儿接种乙肝疫苗阻断母婴传播影响因素调查[J].中国热带医学,2010,10(2):135-136.

[8] 刘东洋,肖小敏,周娟,等.影响乙肝病毒母婴传播中新生儿乙肝表面抗原转阴的因素探讨[J].中国妇幼保健,2008,23(9):1220-1222.

Pancreatic Cancer Telomerase Reverse Transcriptase the Relationship between the Expression and Clinical Pathological Study

XUE Fu-long
(Department of General Surgery, the Fourth Affiliated Hospital of Jinan University, Guangzhou Red Cross Hospital, Guangzhou 510220, China)

ObjectiveResearch on pancreatic cancer telomerase reverse transcriptase (hTERT) expression and clinical pathologic relationship.MethodsRetrospective analysis of our hospital from June 2009 to February 2014 were clinical data of 46 cases of patients with pancreatic cancer, on pancreatic cancer lesion size, site and clinical grading, organization clearly described. Using SABC immunohistochemistry, the expression of hTERT for testing. At the same time take 46 patients with tissue adjacent to carcinoma were compared.ResultsThe study found that patients with tumor site and expression of hTERT unrelated (P＞0.05). Through the observation of patients with pancreatic cancer in the pancreas, 39 patients present expression of hTERT positive, positive rate was 84.8%, in the tissue adjacent to carcinoma, 12 cases with specimen appears as positive, positive rate was 26.1%. Expression of hTERT in clinical stage statistically significant (P＜0.05), and its expression of hTERT positive rate in stage Ⅰ, the lowest significantly below its Ⅲ and Ⅳ. It has to do with tumor grade, size,location.ConclusionHuman telomerase reverse transcriptase in pancreatic cancer tissues is higher, its expression associated with tumor has a great clinical stage, indicating that hTERT expression in tumor tissue and the expression of tissue adjacent to carcinoma difference is very big.

Pancreatic cancer; Human telomerase reverse transcriptase; The pancreas

R735.9

B

1671-8194（2014）11-0004-02