商庆华, 黄盼华, 吴文斌, 汤家铭*
(1.上海基赛生物医药科技有限公司, 上海 201203; 2.上海中医药大学实验动物中心, 上海 201203)
小鼠淋巴瘤 tk 基因突变试验检测雄黄的致突变性
商庆华1, 黄盼华1, 吴文斌2, 汤家铭2*
(1.上海基赛生物医药科技有限公司, 上海 201203; 2.上海中医药大学实验动物中心, 上海 201203)
目的 用小鼠淋巴瘤 tk基因突变试验检测雄黄浸出液的致突变性。 方法 在加或不加 S9 (萃巴比妥钠 +β萘黄酮诱导鼠肝匀浆上清液) 条件下, 用不同质量浓度雄黄浸出液可溶性砷处理小鼠淋巴瘤 L5178Y细胞, 采用微孔板法进行细胞毒、平板接种效率和突变频率测定,用统计学方法进行评价。结果 非活化条件下用雄黄浸出液处理3 h和24 h后, 随着浸出液可溶性砷质量浓度的增加, 小鼠淋巴瘤细胞的平板效率 (PE0和 PE2)、 相对存活率 (RS0)、 相对悬浮生长 (RSG)、 相对总生长率 (RTG) 逐渐下降, 24 h 作用后最高剂量 3.0 μg/mL的 RS0仅为 6.72%、 RSG仅为 3.94%、 RTG仅为 0.34%, 表明雄黄对小鼠淋巴瘤细胞有明显的毒性, 且作用时间长细胞毒性更明显。 随着浸出液可溶性砷质量浓度的上升, 抗性突变频率 (MF) 呈现上升趋势, 表明雄黄具有致突变性。 延长处理时间, 雄黄的致突变性增强。 活化条件下小鼠淋巴瘤细胞的 PE0、 PE2、 RS0、 RSG、 RTG和 MF的变化与非活化条件下结果相似,表明浸出液可溶性砷的毒性和致突变性不依赖于 S9 的活化。 结论 雄黄浸出液可溶性砷对小鼠淋巴瘤 L5178Y细胞具有致突变性。
小鼠淋巴瘤 L5178Y细胞; tk基因突变; 雄黄; 可溶性砷; 致突变
小鼠淋巴瘤细胞 tk基因突变试验 (mouse lymphoma tk genemutation assay,MLA)是一种体外哺乳动物细胞遗传毒性评价试验方法,已被广泛用于检测药物和化合物的遗传毒性,被认为是最敏感的体外致突变试验之 一[1-4]。……