从大豆的β—伴大豆球蛋白中发掘β亚基缺失的遗传

卫会君　司晓霞　田怀东

摘 要：大豆β-伴大豆球蛋白是大豆种子蛋白的主要成分之一，由α′，α和β亚基组成。通过SDS-PAGE方法，筛选289份具有多样种子外观性状的大豆种质，发掘出17份具有β亚基缺失性状的遗传资源。所发掘的遗传资源可用于改善大豆蛋白质营养品质的育种研究。

关键词：大豆；β-伴大豆球蛋白；β亚基；遗传

中图分类号：Q504 文献标识码：A 文章编号：2095-6835（2014）04-0159-01

大豆是一年生草本植物，起源于中国，是世界上广泛栽培的农作物之一。β-伴大豆球蛋白由76 kDa的α′、72 kDa的α和52-54 kDa的β亚基组成。其中，β亚基含量最少，几乎不含含硫氨基酸。人体对β亚基的摄入可降低对大豆蛋白中其他氨基酸的吸收率，因此，该亚基对大豆蛋白的营养品质有着重要影响。从多样的大豆种质资源中发掘β亚基缺失的遗传资源，有望为提高大豆种子蛋白质的营养价值提供珍贵素材。

1 材料与方法

1.1 实验材料

选择289份籽粒外观性状不同的大豆种质作为供试材料。

1.2 实验方法

参照Tian的方法，称取0.03 g大豆粉末，加入0.15 mL正己烷，在室温下振荡1 h脱脂，将离心所得脱脂粉末清洗后加入物质的量浓度为0.03 mol/L的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液（Tris-HCl）振荡，取其上清液。在上清液中加入物质的量浓度为1 mol/L的SBS，调pH为 6.4静置过夜，再取出上清液。在该上清液中加入2.5 mol/L的NaCl，调pH为5.5，振荡后离心，而后继续提取出上清液。在此上清液中加等量超纯水静置，再离心调pH为4.8，冰浴静置得球蛋白。在其中加入由质量体积比为4%（w/v）的十二烷基硫酸钠（SDS）、物质的量浓度为4 mol/L的尿素（Urea）、体积比为5%的2-Me、物质的量浓度为1.5 mmol/L的EDTA、物质的量浓度为2 mmol/L的PMSF、物质的量浓度0.125 mol/L、pH为6.8的三羟甲基氨基甲烷（Tris）构成的全蛋白提取液，用于聚丙烯酰氨凝胶电泳（SDS-PAGE）。

〔编辑：陈文强〕

Abstract： Soybean beta with soybean globulin is one of the major components of soybean seed protein and by alpha， alpha and beta subunit composition. By sds-page method， screening of 289 soybean germplasm， the seed appearance diversity unearthed 17 beta subunits loss characteristics of genetic resources. Discovered by genetic resources can be used to improve the soybean protein nutritional quality breeding research.

Key words： soybean， beta - with soybean globulin； beta subunits； geneticendprint

摘 要：大豆β-伴大豆球蛋白是大豆种子蛋白的主要成分之一，由α′，α和β亚基组成。通过SDS-PAGE方法，筛选289份具有多样种子外观性状的大豆种质，发掘出17份具有β亚基缺失性状的遗传资源。所发掘的遗传资源可用于改善大豆蛋白质营养品质的育种研究。

关键词：大豆；β-伴大豆球蛋白；β亚基；遗传

中图分类号：Q504 文献标识码：A 文章编号：2095-6835（2014）04-0159-01

大豆是一年生草本植物，起源于中国，是世界上广泛栽培的农作物之一。β-伴大豆球蛋白由76 kDa的α′、72 kDa的α和52-54 kDa的β亚基组成。其中，β亚基含量最少，几乎不含含硫氨基酸。人体对β亚基的摄入可降低对大豆蛋白中其他氨基酸的吸收率，因此，该亚基对大豆蛋白的营养品质有着重要影响。从多样的大豆种质资源中发掘β亚基缺失的遗传资源，有望为提高大豆种子蛋白质的营养价值提供珍贵素材。

1 材料与方法

1.1 实验材料

选择289份籽粒外观性状不同的大豆种质作为供试材料。

1.2 实验方法

参照Tian的方法，称取0.03 g大豆粉末，加入0.15 mL正己烷，在室温下振荡1 h脱脂，将离心所得脱脂粉末清洗后加入物质的量浓度为0.03 mol/L的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液（Tris-HCl）振荡，取其上清液。在上清液中加入物质的量浓度为1 mol/L的SBS，调pH为 6.4静置过夜，再取出上清液。在该上清液中加入2.5 mol/L的NaCl，调pH为5.5，振荡后离心，而后继续提取出上清液。在此上清液中加等量超纯水静置，再离心调pH为4.8，冰浴静置得球蛋白。在其中加入由质量体积比为4%（w/v）的十二烷基硫酸钠（SDS）、物质的量浓度为4 mol/L的尿素（Urea）、体积比为5%的2-Me、物质的量浓度为1.5 mmol/L的EDTA、物质的量浓度为2 mmol/L的PMSF、物质的量浓度0.125 mol/L、pH为6.8的三羟甲基氨基甲烷（Tris）构成的全蛋白提取液，用于聚丙烯酰氨凝胶电泳（SDS-PAGE）。

〔编辑：陈文强〕

Abstract： Soybean beta with soybean globulin is one of the major components of soybean seed protein and by alpha， alpha and beta subunit composition. By sds-page method， screening of 289 soybean germplasm， the seed appearance diversity unearthed 17 beta subunits loss characteristics of genetic resources. Discovered by genetic resources can be used to improve the soybean protein nutritional quality breeding research.

Key words： soybean， beta - with soybean globulin； beta subunits； geneticendprint

摘 要：大豆β-伴大豆球蛋白是大豆种子蛋白的主要成分之一，由α′，α和β亚基组成。通过SDS-PAGE方法，筛选289份具有多样种子外观性状的大豆种质，发掘出17份具有β亚基缺失性状的遗传资源。所发掘的遗传资源可用于改善大豆蛋白质营养品质的育种研究。

关键词：大豆；β-伴大豆球蛋白；β亚基；遗传

中图分类号：Q504 文献标识码：A 文章编号：2095-6835（2014）04-0159-01

大豆是一年生草本植物，起源于中国，是世界上广泛栽培的农作物之一。β-伴大豆球蛋白由76 kDa的α′、72 kDa的α和52-54 kDa的β亚基组成。其中，β亚基含量最少，几乎不含含硫氨基酸。人体对β亚基的摄入可降低对大豆蛋白中其他氨基酸的吸收率，因此，该亚基对大豆蛋白的营养品质有着重要影响。从多样的大豆种质资源中发掘β亚基缺失的遗传资源，有望为提高大豆种子蛋白质的营养价值提供珍贵素材。

1 材料与方法

1.1 实验材料

选择289份籽粒外观性状不同的大豆种质作为供试材料。

1.2 实验方法

参照Tian的方法，称取0.03 g大豆粉末，加入0.15 mL正己烷，在室温下振荡1 h脱脂，将离心所得脱脂粉末清洗后加入物质的量浓度为0.03 mol/L的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液（Tris-HCl）振荡，取其上清液。在上清液中加入物质的量浓度为1 mol/L的SBS，调pH为 6.4静置过夜，再取出上清液。在该上清液中加入2.5 mol/L的NaCl，调pH为5.5，振荡后离心，而后继续提取出上清液。在此上清液中加等量超纯水静置，再离心调pH为4.8，冰浴静置得球蛋白。在其中加入由质量体积比为4%（w/v）的十二烷基硫酸钠（SDS）、物质的量浓度为4 mol/L的尿素（Urea）、体积比为5%的2-Me、物质的量浓度为1.5 mmol/L的EDTA、物质的量浓度为2 mmol/L的PMSF、物质的量浓度0.125 mol/L、pH为6.8的三羟甲基氨基甲烷（Tris）构成的全蛋白提取液，用于聚丙烯酰氨凝胶电泳（SDS-PAGE）。

〔编辑：陈文强〕

Abstract： Soybean beta with soybean globulin is one of the major components of soybean seed protein and by alpha， alpha and beta subunit composition. By sds-page method， screening of 289 soybean germplasm， the seed appearance diversity unearthed 17 beta subunits loss characteristics of genetic resources. Discovered by genetic resources can be used to improve the soybean protein nutritional quality breeding research.

Key words： soybean， beta - with soybean globulin； beta subunits； geneticendprint