重金属胁迫对刺参胚胎发育的影响

姜会超 刘爱英 宋秀凯 孙国华 刘丽娟



重金属胁迫对刺参胚胎发育的影响

姜会超 刘爱英 宋秀凯 孙国华 刘丽娟

(山东省海洋资源与环境研究院, 山东省海洋生态修复重点实验室, 烟台 264006)

重金属; 刺参; 胚胎; LOEC

刺参 () 又称仿刺参, 隶属棘皮动物门海参纲楯手目刺参科, 是一种营养和经济价值很高的海洋无脊椎动物[1, 2]。主要分布于北起俄罗斯的海参崴, 经日本海, 朝鲜半岛南到我国黄、渤海以及江苏连云港外的西北太平洋沿岸[3]。近年来, 随着人们对刺参高营养价值的认可, 刺参的人工养殖规模不断扩大, 已成为重要的海水养殖生物。但与此同时, 随着大量工业污水和生活废水排放入海, 环境污染尤其是重金属污染问题尤为突出, 对沿海地区刺参养殖带来了严重危害[4]。有报道称[5, 6], 渤海湾底质环境质量总指数已达到很强的生态危害, 环境污染指数为: Hg>Cd>Cu>As> Pb>Cr>Zn。冯志权等[7]报道几种经济动物体内重金属残留量, 发现生物体内Hg、Cd、Cu、As、Pb五种重金属中只有Hg和Cu符合中华人民共和国国家标准中有关食物限量卫生标准, 其他重金属严重超标[7]。重金属对海洋生物的毒害在造成重大经济损失的同时也为人类食品健康安全埋下了隐患。

近年来, 有关重金属对海洋经济生物毒性作用的研究以鱼虾类居多[8—11], 关于重金属对刺参毒性作用的研究, 主要集中在刺参的幼虫及稚参阶段[12, 13], 而有关重金属对刺参受精卵孵化及胚胎发育的研究较少见报道。由于受精卵及初孵耳状幼体对环境抵抗力较弱, 对水环境中重金属含量的变化可能更加敏感。本文从孵化率、畸形率以及胚胎滞育方面探讨了锌、汞、铜、铅、砷、镉、铬七种海水常见重金属对刺参胚胎的毒性作用, 并推算了重金属对刺参胚胎孵化抑制率的最低可观测效用浓度(LOEC), 旨在为刺参繁育和养殖中对水质的要求提供基础数据, 并为渔业水质标准制定及渔业资源保护提供参考。

1 材料与方法

1.1 实验材料及试剂

刺参受精卵通过烟台海益苗业有限公司培育的野生亲参于2012年3月8日晚22:00自然产卵获得, 产卵水温(20±0.5)℃, 盐度30.0—30.5, 挑选正常受精的卵用于毒性试验。所用药品C4H6O4Zn·2H2O、As2O3、CuSO4·5H2O、Pb(NO3)2、CdCl2·2.5H2O、K2Cr2O7、HgCl2均为分析纯。实验前用蒸馏水将各试验药物配制成一定质量浓度的母液(As2O3需先经NaOH溶解, 再经H2SO4中和), 再用同源的过滤海水[水温(20±0.5)℃, 盐度30.0—30.5]稀释成实验所需各种浓度。

1.2 毒性试验

采用静水生物试验方法[14]用1000 mL的烧杯分别对7种重金属进行独立暴露。每种重金属均设9个浓度组, 浓度梯度的设置主要参照国家渔业水质标准(GB11607-89)(表1), 各浓度组设置3个平行, 另设3个对照组, 对照组为自然海水, 重金属粒子背景值: Cd 0.000402 mg/L、Cr 0.00014 mg/L、Cu 0.00323 mg/L、Zn 0.0386 mg/L、Hg 0.000065 mg/L, Pb 0.000806 mg/L、As 0.00176 mg/L, 在实验浓度梯度配制时扣除自然海水背景值的影响。每组放刺参受精卵约200粒。实验进行48h, 所有组别均加入1%福尔马林固定, 显微镜下观察并记录各组刺参耳状幼体数量、畸形幼体数量及刺参各个不同发育阶段胚胎的数量。

表1 重金属试验用液浓度

刺参胚胎发育分期: 细胞期(单细胞至256细胞)、囊胚期、原肠期、初耳幼体及小耳幼体。

1.3 数据处理

孵化率=小耳幼体/(细胞期+囊胚期+原肠期+初耳幼体+小耳幼体)×100%;

畸形率=畸形个体/(细胞期+囊胚期+原肠期+初耳幼体+小耳幼体)×100%;

孵化抑制率=(1–孵化率)×100%。

孵化抑制率最低可观测效应浓度[15](LOEC): 将对照组孵化抑制率的95%置信上限带入剂量-效应拟合方程, 计算LOEC值。LOEC指引起胚胎孵化率显著变化的最低效应浓度, 本实验采取对照组孵化抑制率的95%置信上限为孵化率显著变化阈值, 即低于此阈值的孵化抑制率在统计学上无法同对照相区分。

胚胎孵化率、畸形率及不同发育阶段胚胎所占比例等数据利用Excel及SPSS 13. 0统计软件进行数据统计, 重金属与胚胎剂量-效应模型的曲线拟合以及LOEC的计算采用origin7.5软件。

2 结果

2.1 重金属对刺参胚胎孵化率和畸形率的影响

在不同重金属浓度48h胁迫后, 刺参耳状幼体孵化率与畸形率结果如图1所示。在0.03和0.06 mg/L两个Zn2+浓度组, 刺参胚胎孵化率较高, 与对照无明显差异(>0.05)。在0.12 mg/L浓度组, 刺参孵化率迅速下降到51.3%, 畸形幼虫为12.3%, 在0.24 mg/L及以上浓度组, 未见小耳幼体孵出, 刺参胚胎畸形幼虫比例不断上升, 在Zn2+最高浓度组, 畸形幼虫比例23.6%。Hg2+与Zn2+类似, 在0.0002及0.0004 mg/L低浓度组, 刺参胚胎均可正常孵化, 且无畸形幼虫出现。随着浓度进一步增加, 孵化率开始缓慢下降, 畸形幼虫比例上升。在0.0064 mg/L浓度组中, 刺参孵化率降为48.5%, 且19.3%刺参胚胎发生畸变。在0.0128 mg/L及以上浓度组, 未见小耳幼体孵出, 在Hg2+最高浓度组, 畸形幼虫比例32.1%。Cu2+对刺参胚胎影响较大, 在0.005 mg/L低浓度组, 刺身胚胎孵化率为82.0%, 与对照无明显差异(>0.05), 但伴有少量畸形幼虫。随着Cu2+浓度增高, 刺参孵化率迅速下降, 畸形率上升, 在 0.02 mg/L浓度组, 孵化率降为6.5%, 畸形率上升到23.5%, 在0.04 mg/L及以上浓度组, 未见小耳幼体孵出, 在Cu2+最高浓度组, 畸形幼虫比例42.3%。在As3+最低浓度组(0.03 mg/L)中, 胚胎孵化率(74.6%)略低于对照组(80.3%), 随着浓度的增加, 孵化率迅速下降, 畸形率不断上升。在1.92 mg/L浓度组, 刺参胚胎孵化率下降到29.3%, 畸形率为52.3%, 在3.84 mg/L及以上浓度组, 无小耳幼体孵出, 在As3+最高浓度组, 62.3%的刺参胚胎发生畸变。Pb2+对刺参胚胎孵化率影响较大, 对胚胎幼体致畸作用不明显。在0.02 mg/L浓度组中, 孵化率为79.3%, 随浓度进一步增加, 孵化率开始下降, 在1.28 mg/L浓度组, 孵化率降为13.5%, 在Pb2+9个浓度组中均未发现畸形幼虫。Cd2+对刺参孵化率影响较小, 随浓度增加, 孵化率下降趋势较为平缓, 在最高浓度组, 孵化率仍可达到54.4%, 且畸形率也维持在较低水平。在暴露浓度范围内, Cr6+对刺参孵化率无明显影响, 均保持在70%以上, 在2.56 mg/L最高浓度组, 16.7%胚胎幼体发生畸变。

刺参胚胎畸形主要以受精卵细胞期异变及不规则卵裂为主 (图2), 其中细胞期异变及不规则卵裂所占总畸形胚胎比例达到74.16% , 而其余畸形现象出现较少, 主要有形态异常, 胚胎萎缩, 消化道未开通等。

图1 重金属胁迫下刺参胚胎的孵化率及畸形率

Fig. 1 The embryos hatching rates and malformation rates ofunder heavy metals

2.2 在不同重金属胁迫下刺参胚胎发育状况

经48h孵化后, 在不同重金属浓度胁迫下刺参胚胎各发育阶段所占比例如图3所示。不同重金属对刺参胚胎发育的影响不同, 随着重金属浓度的升高, 刺参胚胎的发育出现明显地滞育现象。

Zn2+0.03 mg/L浓度组, 刺参胚胎全部孵化为小耳幼体, 与对照组无显著差异(>0.05), 随着浓度增加, 小耳幼体比例开始下降, 初耳状幼体比例上升。在0.24 mg/L浓度组, 无小耳幼体孵出, 71.7%刺参胚胎发育到初耳状幼体, 原肠期胚胎占28.3%。在0.48 mg/L浓度组, 刺参胚胎出现明显的滞育, 胚胎全部停留在原肠期, 无耳状幼体孵出。在0.96 mg/L及以上浓度组, 原肠期胚胎比例大幅下降, 90%以上的胚胎停留在囊胚期。

在Hg2+低浓度组中, 刺参胚胎大部分发育到小耳幼体, 随Hg2+浓度的增加, 小耳幼体下降趋势较为缓慢, 在0.0032 mg/L浓度组, 小耳幼体比例69.1%, 初耳状幼体30.9%。随着Hg2+浓度进一步升高, 刺参胚胎发育受到明显延缓, 在0.0064 mg/L浓度组, 原肠期胚胎占60.5%, 小耳幼体及初耳状幼体的比例分别下降到4.8%、34.7%。在0.0128 mg/L浓度组, 原肠期比例扩大到91.6%, 无小耳幼体孵出。在0.0512 mg/L最高浓度组, 刺参胚胎全部停留在细胞期。

Cu2+对刺参胚胎影响较大, 在0.005 mg/L最低浓度组, 82%刺参胚胎发育到小耳幼体, 与对照组无显著差异(>0.05)。随着浓度增加, 小耳幼体比例下降, 初耳状幼体及原肠期比例上升。在0.04 mg/L浓度组, 胚胎全部发育到原肠期, 无耳状幼体孵出, 在0.08 mg/L浓度组, 80%刺参胚胎停留在细胞期, 在Cu2+0.16 mg/L及以上浓度组, 刺参胚胎完全停留在细胞期, 仍在进行缓慢地卵裂。

在As3+最低浓度组, 小耳幼体比例68.8%, 较对照组略有下降。随着As3+浓度增加, 小耳幼体比例不断下降, 初耳状幼体及原肠期比例不断上升。在0.48 mg/L浓度组, 小耳幼体比例下降到45.5%, 初耳状幼体及原肠期分别上升到48.9%、5.7%。在0.96 mg/L浓度组, 出现少量囊胚期胚胎。在3.84 mg/L浓度组, 无小耳幼体孵出, 原肠期胚胎占59.7%。在7.68 mg/L最高浓度组, 刺参胚胎原肠期、囊胚期、细胞期比例分别为43.7%、23%、33.3%。

在Pb2+0.02 mg/L浓度组, 79.3%刺参胚胎发育到小耳幼体, 随着浓度增加, 小耳幼体比例不断下降, 初耳状幼体比例不断上升。在1.28 mg/L浓度组, 小耳幼体下降到7.7%, 83.9%刺参胚胎发育到初耳幼体阶段。在2.56 mg/L及以上浓度组, 无小耳幼体孵出。

Cd2+对刺参胚胎的发育影响较弱, 在实验暴露浓度范围内, 不同胚胎发育阶段比例随浓度变化较小。在1.28 mg/L最高浓度组, 小耳幼体及初耳状幼体所占比例分别为54.4%、38.1%。原肠期胚胎在不同浓度组之间比例较为稳定, 基本维持在7%左右。

在Cr6+暴露浓度范围内, 刺参胚胎均发育与对照组无明显差异(>0.05), 小耳幼体比例未随Cr6+浓度的增加而降低, 反而在0.16 mg/L浓度组有较小幅度上升。在Cr6+最低与最高浓度组中, 小耳幼体所占比例分别为77.7%、74.3%。

综上所述, 在本实验暴露浓度范围内, Zn2+、Hg2+、Cu2+三种重金属离子对刺参胚胎的发育影响最大, 随着离子浓度增加, 刺参胚胎发育受到明显延缓。其次是As3+和Pb2+离子, Cd2+和Cr6+离子对刺参胚胎发育延缓作用较弱。

2.3 重金属与刺参胚胎孵化率剂量-效应关系

刺参小耳幼体孵化抑制率与重金属浓度拟合关系如表2所示, Cr6+在实验浓度范围内对刺参胚胎毒性较弱, 随着离子浓度的增加, 其孵化率未见明显下降趋势(图1)。其他6种重金属对孵化抑制率影响较为显著, 剂量-效应关系与所选曲线模型高度拟合(2>0.9), 可以较好地解释重金属对刺参胚胎孵化抑制率的影响。

图2 刺参胚胎发育异常情况

A为正常卵裂期胚胎；B为正常小耳幼体；C为细胞期异变；D、E、F为不规则卵裂；G为形态异常；H为胚胎萎缩；I为消化道为开通

A. normal embryo in cleavagestage; B. normal auricularia; C. metamorphosis in cell stage; D, E, F. anarchial cleavage; G. paramorphia; H. embryoatrophy; I. defective alimentary canal

表2 重金属与刺参孵化抑制率剂量-效应模型参数

注:为重金属浓度,为孵化抑制率

Note:represents the heavymetalconcentrations,represents theinhibition rates of embryoshatching

对照组孵化抑制率95%置信区间上限为27.8%, 将其分别代入表2曲线拟合方程, 计算不同重金属对刺参胚胎孵化抑制率LOEC值(表3)。

图3 重金属胁迫下日本对虾胚胎不同发育阶段所占比例

通过曲线拟合方程计算的LOEC与概率单位法得出的LOEC较为接近。Hg2+和Cu2+对刺参胚胎的LOEC值最低, 分别为0.0031、0.0080 mg/L, 说明这两种重金属对刺参胚胎毒性最大。其次是Pb2+、As3+、Cd2+、Zn2+四种离子。Cr6+浓度与刺参孵化抑制率拟合度较低, 通过概率单位法计算的LOEC为0.72 mg/L, 远远高于其他6种重金属, 说明Cr6+对刺参胚胎毒性最低。

3 讨论

不同重金属对刺参胚胎毒性存在明显差异, 在实验暴露浓度范围内, Zn2+和Cu2+对刺参胚胎孵化率影响最大。其次是Hg2+、Pb2+、As3+, Cd2+和Cr6+对刺参胚胎孵化率影响最小。Selvakumar,.[16]曾报道过, Zn2+对溞状幼体的毒性比Cu2+和Cd2+还大, 但本实验中Zn2+对刺参胚胎孵化毒性大很大一部分原因是由Zn2+浓度梯度设计过高导致的(表1), 结合胚胎孵化抑制率LOEC(表3)可知, 7种重金属对刺参胚胎孵化抑制率LOEC由小到大为Hg2+

表3 不同重金属对应的最低可观测效用浓度及渔业水质标准

重金属的存在不仅会降低刺参胚胎孵化率, 还会增加胚胎幼体的畸形率并延缓胚胎的发育速度, 且随着离子浓度的增加, 致畸及滞育的现象越明显。吴鼎勋等[25]、邹佩贞等[26]在研究鱼类胚胎发育时也发现了同样的现象。有学者认为胚胎的生长发育, 主要受遗传因素和环境因子两方面影响[27]。本实验对照组正常孵化且无畸形胚胎出现, 可以排除遗传因素的影响, 因此在本实验中胚胎的畸形现象主要是由于环境因子即重金属离子的影响造成的。Huang,.[23, 24]报道过, Hg2+浓度≥20 μg/L或Zn2+浓度≥ 1 mg/L时均会引起胚胎和仔鱼孵化率降低, 延迟孵化, 死亡率、畸形率增加, 抑制生长和卵黄囊吸收率。在本实验中, 在Hg2+6.4 μg/L、Zn2+0.240 mg/L时, 刺参胚胎畸形率已高达19.3%、18.3%, 且胚胎发育速度也受到明显的延缓, 这可能是有物种的差异引起的, 刺参胚胎可能较仔鱼对Hg2+、Zn2+等重金属更加敏感。有研究表明: 重金属实验中胚胎的畸形可能是由于重金属抑制了胚胎ATP的合成和某些酶的活性, 导致胚胎发育所需的能量供应不足, 最终造成了胚胎发育中器官畸形[28]。由图3可知, 在Zn2+前4个浓度组胚胎发育受到延缓的程度较轻, 但当浓度增加到0.240 mg/L时胚胎发育受到明显的滞育, 全部停留在原肠期, 无耳状幼体孵出, 同样的情况出现在Cu2+浓度组及Hg2+浓度组, 在Hg2+低浓度组, 刺参胚胎发育延缓的程度并不明显, 但在Cu2+0.04 mg/L及Hg2+0.0064 mg/L浓度组, 胚胎发育出现明显的滞育, 分别有100%及60.5%的胚胎停留在原肠期, 可见Zn2+、Cu2+、Hg2+离子对胚胎发育的延缓可能存在一个阈值, 在一定范围内, 重金属对胚胎发育产生的滞育作用并不明显, 但一旦超过阈值, 滞育作用则会变得极其显著, 但同样的现象并未出现在Pb2+、As3+、Cd2+实验组, 由图3可知, 随着离子浓度的增加, 胚胎发育所受的滞育程度也在平缓的增加, 未见有明显的阈值。胚胎发育的延缓主要受两方面的影响: 一方面在胚胎发育阶段, 由于有毒物质的作用会致使胚胎的正常发育受阻而被迫中断, 最终延迟胚胎发育时间[29, 30]。另一方面, 在胚体出膜阶段, 由于重金属离子的存在可能会导致胚体运动能力下降或破坏胚胎孵化酶的作用机制[31, 32], 最终使得胚胎破膜时间和胚胎发育的时间延长。

本实验发现, 通过曲线拟合与概率单位两种方法计算的刺参胚胎孵化抑制率最低可观测效用浓度值(LOEC)虽然略有差异, 但基本在同一数量级上, 说明本文选取的曲线拟合方程可以合理的反应刺参胚胎孵化抑制率随重金属浓度梯度的变化趋势。Cd2+、Hg2+、Cr6+对刺参胚胎孵化抑制率LOEC均高于渔业水质标准, 即现行渔业水质标准对这3种重金属离子的限量要求在安全值内, 可以保证刺参胚胎的健康发育, 但Cu2+、As3+、Zn2+、Pb2+对胚胎孵化抑制率LOEC已明显低于渔业水质标准, 现行渔业水质标准能否保证刺参胚胎的健康发育令人担忧, 在实际渔业生产中应重点加强对此类离子的监控。

[1] Chang Y Q, Ding J, Song J,.Biological Research and Breeding of Sea Cucumbers, Sea Urchins [M]. Beijing:China Ocean Press. 2004, 1—20 [常亚青, 丁君, 宋坚, 等. 海参、海胆生物学研究与养殖. 北京: 海洋出版社. 2004, 1—20]

[2] Chi S, Zeng Y, Zhao Z J,. Variation of water quality in culture ponds for[J].(Science and Technology)2013, 27(3): 239—244 [迟爽, 曾勇, 赵振军, 等. 刺参养殖池塘的水质变化. 济南大学学报(自然科学版), 2013, 27(3):239—244]

[3] Ding J, Zhang X H, Ding M,. Researched on accumulation dynamics of Cu, Zn in sea cucumber () [J]., 2008, 27(4): 359—362 [丁君, 张学辉, 丁鸣, 等. 幼刺参不同部位对Zn2+、Cu2+的蓄积动力学研究. 海洋环境科学, 2008, 27(4): 359—362]

[4] Sun Z X, Chen S X, Chen J,. Acute toxicity of four heavy metals acting on[J]., 2007, 26(5): 80—85 [孙振兴, 陈书秀, 陈静, 等. 四种重金属对刺参幼参的急性致毒效应. 海洋通报, 2007, 26(5): 80—85]

[5] Qi F X, Zheng B H, Wan J,. Pollution of heavy metal in the sample of column of Bohai Bay in Tianjin [J]., 2004, 23(3): 85—89 [齐凤霞, 郑丙辉, 万峻, 等. 渤海湾(天津段)柱样沉积物重金属污染研究. 海洋技术, 2004, 23(3): 85—89]

[6] Yin J D, Me J D, Xue E S,. Research on deposit heavy metals and arsenic pollution of Dagu pollution discharging river and its ecological risk [J]., 2002, 22(l): 70—74 [殷晋铎, 么俊东, 薛恩树, 等. 大沽排污河沉积物重金属和砷污染及生态风险性研究. 环境工程, 2002, 22(l): 70—74]

[7] Feng Z Q, Feng J X, Ma M H. Contents of 5 kinds of heavy metals in commercial animals from the Northern Eco-station [J]., 2004, 23(3): 49—50 [冯志权, 冯金祥, 马明辉. 北方海洋生态站几种经济动物体内5种重金属残留量. 海洋环境科学, 2004, 23(3): 49—50]

[8] Cheng B, Liu Y, Yang H S. Copper accumulation in tissues and its effects on the rate of molt in gand mortality in[J]., 2008, 27(5): 2091—2095 [程波, 刘鹰, 杨红生. Cu2+在凡纳滨对虾组织中的积累及其对蜕皮率、死亡率的影响. 农业环境科学学报, 2008, 27(5): 2091—2095]

[9] Wang Z Z, Liu Z Y, Lü G T,. Acute toxic effects of Hg2+, Zn2+and Cr6+on[J]., 2005, 12(6): 745—750 [王志铮, 刘祖毅, 吕敢堂, 等. Hg2+, Zn2+, Cr6+对黄姑鱼幼鱼的急性致毒效应. 中国水产科学, 2005, 12(6): 745—750]

[10] Tang J X, Cheng Z S, Zhang J,. Effects of lead and copper ions on cadmium accumulation in loach[J].2011, 42(2): 262—265 [唐建勋, 程樟顺, 张婕, 等. 重金属Pb和Cu对Cd在泥鳅()组织器官蓄积的影响. 海洋与湖沼, 2011, 42(2): 262—265]

[11] Wang Z Z, Lü G T, Xu J,. Study on the acute toxicity and joint toxicity of Cr6+, Zn2+, Hg2+acting on[J].2005, 26(2): 6—12 [王志铮, 吕敢堂, 许俊, 等. Cr6+, Zn2+, Hg2+对凡纳滨对虾幼虾急性毒性和联合毒性研究. 海洋水产研究, 2005, 26(2): 6—12]

[12] Sun Z X, Yang L H, Zhang X M,. Combinative toxicity of copper and zinc on sea cucumber,Juvenile [J]., 2009, 28(4): 112—115 [孙振兴, 杨立红, 张晓梅, 等. 铜和锌对刺参幼参的联合毒性作用. 海洋通报, 2009, 28(4): 112—115]

[13] Sun Z X, Zhang M Z, Xu B Q,. Effect of heavy metal on the SOD activity of the viscera ofjuvenile[J]., 2009, (2): 27—31 [孙振兴, 张梅珍, 徐炳庆, 等. 重金属毒性对刺参幼参SOD活性的影晌. 海洋科学, 2009, (2): 27—31]

[14] Zhou Y X, Zhang Z S.Aquatic Toxicity Test Methods [M]. Beijing: Agriculture Press. 1989, 75—156 [周永欣, 章宗涉. 水生生物毒性试验方法. 北京: 农业出版社. 1989, 75—156]

[15] Kerr D R, Meador J P. Modelling dose response using generalizes linear models [J]., 1996, 15: 395—401

[16] Selvakumar S, Haridasan T M. Toxic effects of heavy metals copper, zinc, cadmium and mercury on the zoeal development of Sesarminid crab()[J]., 2000, 21(2): 101—104

[17] Vieira L R, Gravato C, Soares A M V M,. Acute effects of copper and mercury on the estuarine fish: Linking biomarkers to behavior [J]., 2009, 76(10): 1416—1427

[18] Alvarez M D, Murphy C A, Rose K A,. Maternal body burdens of methylmercury impair survival skills of offspring in Atlantic croaker () [J]., 2006, 80(4): 329—337

[19] Jezierska B, Lugowska K, Witeska M. The effects of heavy metals on embryonic development of fish (a review) [J]., 2009, 35(4): 625—640

[20] Johnson A, Carew E, Sloman K A. The effects of copper on the morphological and functional development of zebrafish embryos [J]., 2007, 84(4): 431—438

[21] Li J J, Yang X B, Hang R,. Acute toxicity test of five heavy metal ions to[J].2006, 25(2): 51—53 [李建军, 杨笑波, 黄韧, 等. 五种重金属离子对黑褐新糠虾的急性毒性试验. 海洋环境科学, 2006, 25(2): 51—53]

[22] Grosell M, McDonald M D, Wood C M,. Effects of prolonged copper exposure in the marine gulf toadfish (): I. Hydromineral balance and plasma nitrogenous waste products[J]., 2004, 68(3): 249—262

[23] Huang W, Cao L, Ye Z J,. Antioxidative responses and bioaccumulation in Japanese flounder larvae and juveniles under chronic mercury exposure[J].:, 2010, 152(1): 99—106

[24] Huang W, Cao L, Shan X J,. Toxic effects of zinc on the development, growth and survival of red sea breamembryos and larvae[J]., 2010, 58(1): 140—150

[25] Wu D X, Hong W S. Study on toxicity of four heavy metals to embryo and larval of[J]., 1999, 18(2): 186—191 [吴鼎勋, 洪万树. 四种重金属对鱿状黄姑鱼胚胎和仔鱼的毒性. 台湾海峡, 1999, 18(2): 186—191]

[26] Zhou P Z, Zhang S L, Yi J Y. Toxic effects of several heavy metals on the embryos development of[J]., 2008, 43(4):7—12 [邹佩贞, 张淑玲, 易捷仪. 几种重金属离子对光倒刺鲃胚胎发育的毒性. 动物学杂志, 2008, 43(4): 7—12]

[27] Han X L, Yang Z H, Li X R,. Toxicity of four heavy metal Ions on early life development of[J].,2011, 6(3): 234—240 [韩晓磊, 杨忠华, 李小蕊, 等. 四种重金属离子对河川沙塘鳢早期发育的毒性影响. 生态毒理学报, 2011, 6(3): 234—240]

[28] Ates B, Orun I, Talas Z S,. Effects of sodium selenite on some biochemical and hematological parameters of rainbow trout (Walbaum, 1792) exposed to Pb2+and Cu2+[J]., 2008, 34(1): 53—59

[29] Monteiro D A, Rantin F T, Kalinin A L. Inorganic mercury exposure: toxicological effects, oxidative stress biomarkers and bioaccumulation in the tropical freshwater fish matrinx,(Spix and Agassiz, 1829) [J]., 2010, 19(1): 105—123

[30] Verlecar X N, Jena K B, Chainy G B N. Modulation of antioxidant defences in digestive gland of(L.), on mercury exposures [J]., 2008, 71(10): 1977—1985

[31] Yang Q, Wang J H.Progress of study on embryo toxicity [J]., 2001, 22(2): 29—31 [杨奇, 王建华. 胚胎毒性研究进展. 动物医学进展, 2001, 22(2): 29—31]

[32] Huang W. Toxic effects of mercury, lead and zinc on early life stages of flounder () [D]. Thesis for Doctor of Science. Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences, Qingdao. 2010 [黄伟. 汞、铅、锌对褐牙鲆()早期发育过程毒理作用的研究. 博士学位论文, 中国科学院海洋研究所, 青岛, 2010]

THE TOXIC EFFECTS OF HEAVY METALS ON THE EMBRYONIC DEVE-LOPMENT OF

JIANG Hui-Chao, LIU Ai-Ying, SONG Xiu-Kai, SUN Guo-Hua and LIU Li-Juan

(Shandong Marine Fisheries Research Institute, Yantai 264006,China)

Heavy metal;; Embryos; LOEC

2013-02-21;

2013-11-28

山东省科技发展计划项目(2009GG10009044);烟台市科技发展计划项目(2011457); 水生动物营养与饲料“泰山学者”岗位资助

姜会超(1984—), 男, 山东烟台人; 硕士; 主要从事海洋生态毒理研究。E-mail: jianghuichao2008@163.com

刘爱英, E-mail: aiyingl@163.com

X171.5

A

1000-3207(2014)02-0393-08

10.7541/2014.56