白纹伊蚊唾液腺serpin1基因的可变剪接分析与原核表达

程金芝，孙 宇，陈 璐，刘 鉴，吴家红

白纹伊蚊是一种重要的医学昆虫，吸血不仅造成宿主严重的过敏反应，而且还可以传播多种疾病。在中国，它是登革热与登革出血热的重要媒介。其唾液组分蛋白具有抗凝血、抗炎和免疫调控的功能［1］。已有的研究结果提示每一种蚊虫唾液组分中约含有100个蛋白分子参与了上述功能。根据对约10种蚊虫唾液腺转录组学分析，提示Serpin家族成员广泛分布于蚊虫唾液组分，然而至今仅有少数蛋白成员的作用得到证实。

丝氨酸蛋白酶抑制剂（Serine Protease Inhibitor，Serpin）是一类蛋白质超家族，它们不仅广泛存在于动物、植物以及病毒体内［2－3］，还存在于细菌和古细菌体内［4－5］。研究发现Serpin家族成员参与调控蛋白酶介导的一系列生命进程，包括凝血、纤维蛋白溶解、补体激活、炎性介质反应及组织重建过程。Serpin是一种单蛋白质，由3个β折叠，8～9个α螺旋和一个环状结构区RCL（reactive center loop）构成。蛋白质分子量一般为40～50kDa，由350～500个氨基酸组成。大多数serpin具有抑制丝氨酸蛋白酶的功能，但也有一些能抑制其他种类的蛋白酶，例如，鳞状细胞癌抗原-1能够抑制半胱氨酸蛋白 酶［6］，拟 南 芥 serpin-1能够抑制 名 为 metacaspase-9的半胱氨酸蛋白酶［7］。另外还有一些serpin缺乏蛋白酶抑制功能，而是执行一些其他功能，例如，激素转运、充当分子监控类蛋白或储存蛋白［8－9］。Serpin在功能上的不同与其结构有着密切联系。

2007年Arca等［10］率先采用分子生物学方法构建了白纹伊蚊唾液腺cDNA文库，从中识别出3条具有信号肽的丝氨酸蛋白酶抑制剂基因家……