荧光定量PCR检测痰结核分枝杆菌DNA的应用价值

张桂花 广东省惠州市第六人民医院检验科 516211

结核病是由结核分枝杆菌引起的一种以呼吸系统为主的传染病，主要由含菌的飞沫通过呼吸道传播［1］，是目前严重威胁人类健康的重大传染性疾病之一。临床常通过检测患者痰液中的结核分枝杆菌，对结核病进行及时诊断和治疗［2］。选择我院自2011年7月－2013年8月在我院住院治疗的78例结核病患者，采取荧光定量PCR、抗酸菌涂片染色和改良罗氏培养三种方法对患者的同一份痰标本进行检测，对比分析荧光定量PCR在结核分枝杆菌检测中的临床应用价值，现将具体情况汇报如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2011年7月－2013年8月在我院住院治疗的肺结核患者78例，其中男53例，女25例，年龄17～79岁，平均年龄（49.3±3.6）岁。所有患者均有低热、盗汗及呼吸道感染等症状出现。

1.2 痰标本收集 一般在清晨，患者用生理盐水多次漱口后，将第一口咳痰弃去，取深部咳痰3口分装于3个无菌标本盒内送检。提醒患者为保证检验结果，勿将唾液吐入标本盒。

1.3 检测方法 抗酸菌涂片染色：不需特殊仪器，试剂标准自行配置，按照《全国临床检验操作规程》（第3版）（795－796）标准操作执行。改良罗氏培养：检测方法按照试剂配套说明书进行操作，操作均在生物安全柜内进行。BacT／AL E R T3D培养管置仪器培养。荧光定量PCR：仪器LightCycler 3.5全自动荧光定量基因扩增仪由罗氏公司提供，具体操作按照试剂配套说明书进行。扩增完计算机自动分析，建立标准曲线。

1.4 统计学处理 本文所有数据均采用SPSS16.0软件进行分析，计数资料采用χ2检验，计量资料采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。……