阿加曲班的合成方法研究

施猛+刘恩桂+夏春森+等

[摘要] 通过硝基-L-精氨酸与3-甲基喹啉-8-磺酰氯缩合，再与（2R，4R）-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯缩合，经过酯水解，氢化，精制共五步反应，高收率地合成了抗血栓药物阿加曲班，该合成方法操作简单，工艺稳定，产品纯度较好，适合工业化生产。

[关键词] 阿加曲班；抗血栓；合成

[中图分类号] R914.2 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2014）12-41-03

血栓性疾病是由于血栓引起的血管腔狭窄与闭塞，使主要脏器发生缺血和梗塞而引发机能障碍的各种疾病[1-5]。阿加曲班（Argatroban）是一种凝血酶抑制剂，由日本三菱化学研究所在1970年研制合成的抗血栓药[6-7]。1990年在日本上市，被批准应用于临床治疗周围动脉闭塞性疾病，1996年开始将其用于治疗急性脑血栓形成，以及心肌梗死溶栓的辅助治疗，并用于在抗凝血酶缺乏患者进行血透时的抗凝处理。FDA在2000年批准阿加曲班应用于治疗和预防血栓形成及肝素诱导的免疫性疾病——血小板减少症（HIT），2002年12月，三菱制药公司的阿加曲班正式在中国上市，规格为10mg/20mL，商品名为诺保思泰[8-11]。其化学名为（2R，4R）-1-[（2S）-5-（氨基亚氨甲基）氨基-1-氧代-2-[（3-甲基-1，2，3，4-四氢喹啉-8-磺酰基）胺基]戊烷]-4-甲基哌啶-2-甲酸一水合物，具有图1所示的化学结构。

1 材料与方法

1.1 主要仪器与试剂

所用试剂均为分析纯；化合物结构鉴定所用仪器为BRUKER AV-Ⅲ-500型高分辨超导核磁共振谱仪；Mettler TGA/DSC1热分析仪；傅立叶变换红外光谱仪NICOLET-5700型；WRS-113数字熔点测定仪。

1.2 实验方法

1.2.1 N-（3-甲基喹啉-8-磺酰氯）-N-硝基-L-精氨酸（中间体一）的制备 室温下，将N-硝基-L-精氨酸21.9g（0.1mol），25%氢氧化钠水溶液200mL，缚酸剂碳酸钠15.9g加入1000mL三颈烧瓶中，搅拌使其溶解，并降温至-5～0℃。将29g（0.12mol）3-甲基喹啉-8-磺酰氯溶解于200mL四氢呋喃中，缓慢滴加入三颈烧瓶中，控制反应瓶中温度为：-5～0℃。15～30min滴加完毕，升温到25～30℃，继续搅拌反应两小时，用1mol/L稀盐酸调节体系PH值为2.7，减压浓缩。残余物中加入270mL甲醇，再次减压浓缩。残余物过滤，滤饼100mL纯化水洗涤3次，干燥得固体中间体一36.9g，收率87.2%。

1.2.2 （2R，4R）-4-甲基-1-[（S）-2-（3-甲基喹啉-8-磺酰胺基）-5-（3-硝基呱基）-正戊酰基]哌啶-2-甲酸乙酯（中间体二）的制备 500mL三口烧瓶中，将33.8g（0.08mol）中间体一加入到300mL四氢呋喃中，并降温到（-10±5）℃。将19.0g三氯氧化磷溶于90mL四氢呋喃中，缓慢滴加入三颈烧瓶中，控制滴加温度为（-10±5）℃，滴加完毕，将（2R，4R）-4?甲基-2-哌啶甲酸乙酯（17.1g，0.1mol）溶于90mL四氢呋喃中，缓慢滴加入三颈烧瓶，控制滴加温度为（-10±5）℃，30min滴加完毕后，将24.0g三乙胺滴加入三颈烧瓶中，滴加完毕后，保持体系温度为0～5℃，继续搅拌反应2h后，反应体系用300mL饱和食盐水洗涤2次，收集、合并有机层，加无水硫酸钠干燥8h，过滤，滤饼用四氢呋喃洗涤两次，滤液30～40℃减压浓缩，得38.0g中间体二。收率：82.2%。

1.2.3 （2R，4R）-4-甲基-1-[（S）-2-（3-甲基喹啉-8-磺酰胺基）-5-（3-硝基呱基）-正戊酰基]哌啶-2-甲酸（中间体三）的制备 将35.0g（0.06mol）中间体二，300mL无水乙醇加入三颈烧瓶中，控温25～30℃，搅拌至完全溶解，用氢氧化钠溶液调节pH值至9～10（10～11）。室温搅拌反应，用TLC监测（展开剂为甲醇：二氯甲烷=1∶10）至原料点基本消失，停止反应。反应液40～45℃减压浓缩，加入50mL水，用1mol/L氧氧化钠调节pH值至9，用乙酸乙酯萃取两次，弃去有机相，用水相用1mol/L的盐酸调节PH值至5，用100mL四氢呋喃萃取两次，再用饱和氯化钠50mL洗涤2次，合并有机相，减压浓缩，得产品中间体三25.1g，收率75.4%。

1.2.4 （2R，4R）-4-甲基-1-[（S）-2-（3-甲基-1，2，3，4-四氢喹啉-8-磺酰胺基）-5-呱基正戊酰基]哌啶-2-甲酸（中间体四）的制备 将23g（0.045mol）中间体三用300mL无水乙醇溶解，加入冰醋酸，5%钯碳，加入500mL的高压反应釜内，反应釜用氢气置换，搅拌下缓慢加热至70～80℃，保温反应12h，反应液用硅藻土过滤，滤液减压浓缩，向残余物中加入100mL三氯甲烷，用碳酸氢钠水溶液调节反应体系pH值为5～7，静置分层，收集有机相，有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，用无水硫酸钠干燥12h，过滤，滤液在40～45℃下减压浓缩，得白色固体（中间体四）10.6g。收率：49.8%。

1.2.5 阿加曲班一水合物的制备 在三颈烧瓶中加入9.0g中间体四，350mL纯化水，加热回流1h，搅拌，缓慢冷却至0℃，搅拌析晶12h，过滤，得阿加曲班一水合物6.6g，收率：71%（73.3%）。m.p.本品无明确熔点，在180～220℃间缓慢分解；TG：150℃失重比例3.42%，280℃失重比例82.16%；IR，νmax（KBr）/cm：3414.0，3180.0，2870～2952，1630～1675，1600.4，1381.3，734.2；1H-NMR（300MHz，DMSO）δ：0.463～0.514（t，1H），0.669～0.693（m，1H），0.785～0.797（d，3H），0.968～0.981（d，3H），1.250～1.265（m，1H），1.393～1.492（m，4H），1.681～1.691（d，1H），1.875（b，s，1H），2.029～2.052（d，1H），2.285～2.387（m，1H），2.525～2.577（t，1H），2.676～2.787（d+d，1H），2.827～2.895（m，3H），3.312（水峰，2H），3.346（m，1H），3.884（s，1H），4.037（m，2H），5.989～6.003（d，1H），6.438～6.479（m，1H），7.029～7.043（d，1H）7.324～7.350（t，1H），7.426～7.583（m，5H），8.849（s，1H）。13C-NMR（75MHz，DMSO）δ：18.69，21.83，24.03，25.03，27.17，29.17，32.13，35.45，35.87，39.0，40.0，47.66，51.62，57.37，113.50，118.78，122.06，127.23，133.32，142.18，157.27，168.86，173.97。endprint

2 结果

2.1 N-（3-甲基喹啉-8-磺酰氯）-N-硝基-L-精氨酸的制备

本步反应是氨基与磺酰氯缩合形成磺酰胺，在本步反应过程中用到3-甲基喹啉-8-磺酰氯容易在空气中吸潮变质，且如采用直接加入固体的加料方式经重现实验发现放热较剧烈，故本文报道的加料方式为用四氢呋喃稀释溶解后慢速流入到体系。

2.2 （2R，4R）-4-甲基-1-[（S）-2-（3-甲基喹啉-8-磺酰胺基）-5-（3-硝基呱基）-正戊酰基]哌啶-2-甲酸乙酯的制备

本步反应是用三氯氧磷作为氯化剂与中间体二反应生成更具活性的酰氯，再与（2R，4R）-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯缩合生成中间体三，三乙胺做缚酸剂。其中三氯氧磷需过量投入，因为中间体2与三氯氧磷需完全反应生成活性酯（酰氯）才能有效进行缩合。

2.3 （2R，4R）-4-甲基-1-[（S）-2-（3-甲基喹啉-8-磺酰胺基）-5-（3-硝基呱基）-正戊酰基]哌啶-2-甲酸的制备

本步反应是酯的水解，影响较大的因素为反应温度和碱的浓度，温度过高或者碱的浓度偏高均会生成较多副产物。

2.4 （2R，4R）-4-甲基-1-[（S）-2-（3-甲基-1，2，3，4-四氢喹啉-8-磺酰胺基）-5-呱基正戊酰基]哌啶-2-甲酸的制备

本步反应为在冰醋酸，钯碳做催化剂，高温高压下的加氢还原反应，首先将与胍基相连的硝基还原掉，然后在高温高压下将吡啶环还原成哌啶环，条件过于温和或者反应时间不够均会出现反应在不完全的情况，另外因为底物中含有硫元素可能会使催化剂中毒，故钯碳的质量以及用量也可能会影响还原情况。

2.5 阿加曲班一水合物的制备

因为本步反应是做重结晶，用极性较大的溶剂水除去阿加曲班粗品中的少许极性大的杂质，同时阿加曲班在水中属于极微溶，故水的用量，加水的方式，析晶方式，降温方式，析晶温度等均需要考察。

3 讨论

阿加曲班一水合物的化学结构均经核磁氢、碳谱，红外及元素分析，热重分析等进行了确认。该阿加曲班一水合物合成路线共涉及五步反应、各步反应收率较高，操作简单，工艺稳定，纯度较好，适合工业化生产。

[参考文献]

[1] 李家明，马逢时，龙子江，等.（吡啶-3-基）甲氧基）芳酸衍生物的合成及抗血小板聚集活性[J].化学研究与应用，2009，10（4）：231-233.

[2] 李家明，赵永海，马逢时，等.川芎嗪芳酸衍生物的合成及抗血小板聚集活性[J].有机化学，2008，28（9）：287-288.

[3] 孟丽莉，殷春梅，徐辉，等.阿加曲班联合舒血宁治疗急性脑梗死的有效性和安全性研究[J].牡丹江医学院学报，2010，31（4）：230-232.

[4] 冯庚.危重症社区现场急救系列讲座——急性心肌梗死的溶栓药物（3）[J].中国全科医学，2007，10（13）：132-135.

[5] 杨秦南，张峰，钱菊英，等.血栓抽吸术在急性心肌梗死直接介入治疗中的应用[J].中国临床医学，2007，14（2）：253-255.

[6] 袁莉娟，刘爱民，刘蕾.新型凝血酶抑制剂阿加曲班[J].中国新药杂志，2005，14（2）：230-234.

[7] 汪燕.新型抗凝药物研究进展[J].中国新药杂志，2011，20（6）：178-180.

[8] 王嘉桔，赵文光，王丽霞.诺保思泰（阿加曲班）在心血管系统疾病中的应用[J].血栓与止血学，2007，13（4）：389-392.

[9] 傅毅.阿加曲班在美国上市[J].国外医药（合成药生化药制剂分册），2001，21（1）：198-199.

[10] 王运红，欧阳晨曦，周玫，等.阿加曲班的临床应用及临床监测方法[J].中华临床医师杂志，2010，4（4）：182-183.

[11] 谢智乾，王哲烽，时惠麟.阿加曲班—水合物合成路线图解[J].中国医药工业杂志，2011，42（11）：178-180.

[12] 周学福，魏文涛，孙继铨.阿加曲班及其制备方法[S].CN10134848.2009.

[13] Kikumoto，Ryoji Machida-shi.Method for preparing n2-arylsulfonyl-1-argininamides： EP，0823430A1[P].1987-08-04.

[14] Tamao，Yoshikuni.Alpha-（N-arylsulfonyl-L-argininamides，processes for their preparation and pharmaceutical composltions containing these substances.EP，0008746A1[P].1979-08-22.

（收稿日期：2014-03-27）endprint

2 结果

2.1 N-（3-甲基喹啉-8-磺酰氯）-N-硝基-L-精氨酸的制备

本步反应是氨基与磺酰氯缩合形成磺酰胺，在本步反应过程中用到3-甲基喹啉-8-磺酰氯容易在空气中吸潮变质，且如采用直接加入固体的加料方式经重现实验发现放热较剧烈，故本文报道的加料方式为用四氢呋喃稀释溶解后慢速流入到体系。

2.2 （2R，4R）-4-甲基-1-[（S）-2-（3-甲基喹啉-8-磺酰胺基）-5-（3-硝基呱基）-正戊酰基]哌啶-2-甲酸乙酯的制备

本步反应是用三氯氧磷作为氯化剂与中间体二反应生成更具活性的酰氯，再与（2R，4R）-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯缩合生成中间体三，三乙胺做缚酸剂。其中三氯氧磷需过量投入，因为中间体2与三氯氧磷需完全反应生成活性酯（酰氯）才能有效进行缩合。

2.3 （2R，4R）-4-甲基-1-[（S）-2-（3-甲基喹啉-8-磺酰胺基）-5-（3-硝基呱基）-正戊酰基]哌啶-2-甲酸的制备

本步反应是酯的水解，影响较大的因素为反应温度和碱的浓度，温度过高或者碱的浓度偏高均会生成较多副产物。

2.4 （2R，4R）-4-甲基-1-[（S）-2-（3-甲基-1，2，3，4-四氢喹啉-8-磺酰胺基）-5-呱基正戊酰基]哌啶-2-甲酸的制备

本步反应为在冰醋酸，钯碳做催化剂，高温高压下的加氢还原反应，首先将与胍基相连的硝基还原掉，然后在高温高压下将吡啶环还原成哌啶环，条件过于温和或者反应时间不够均会出现反应在不完全的情况，另外因为底物中含有硫元素可能会使催化剂中毒，故钯碳的质量以及用量也可能会影响还原情况。

2.5 阿加曲班一水合物的制备

因为本步反应是做重结晶，用极性较大的溶剂水除去阿加曲班粗品中的少许极性大的杂质，同时阿加曲班在水中属于极微溶，故水的用量，加水的方式，析晶方式，降温方式，析晶温度等均需要考察。

3 讨论

阿加曲班一水合物的化学结构均经核磁氢、碳谱，红外及元素分析，热重分析等进行了确认。该阿加曲班一水合物合成路线共涉及五步反应、各步反应收率较高，操作简单，工艺稳定，纯度较好，适合工业化生产。

[参考文献]

[1] 李家明，马逢时，龙子江，等.（吡啶-3-基）甲氧基）芳酸衍生物的合成及抗血小板聚集活性[J].化学研究与应用，2009，10（4）：231-233.

[2] 李家明，赵永海，马逢时，等.川芎嗪芳酸衍生物的合成及抗血小板聚集活性[J].有机化学，2008，28（9）：287-288.

[3] 孟丽莉，殷春梅，徐辉，等.阿加曲班联合舒血宁治疗急性脑梗死的有效性和安全性研究[J].牡丹江医学院学报，2010，31（4）：230-232.

[4] 冯庚.危重症社区现场急救系列讲座——急性心肌梗死的溶栓药物（3）[J].中国全科医学，2007，10（13）：132-135.

[5] 杨秦南，张峰，钱菊英，等.血栓抽吸术在急性心肌梗死直接介入治疗中的应用[J].中国临床医学，2007，14（2）：253-255.

[6] 袁莉娟，刘爱民，刘蕾.新型凝血酶抑制剂阿加曲班[J].中国新药杂志，2005，14（2）：230-234.

[7] 汪燕.新型抗凝药物研究进展[J].中国新药杂志，2011，20（6）：178-180.

[8] 王嘉桔，赵文光，王丽霞.诺保思泰（阿加曲班）在心血管系统疾病中的应用[J].血栓与止血学，2007，13（4）：389-392.

[9] 傅毅.阿加曲班在美国上市[J].国外医药（合成药生化药制剂分册），2001，21（1）：198-199.

[10] 王运红，欧阳晨曦，周玫，等.阿加曲班的临床应用及临床监测方法[J].中华临床医师杂志，2010，4（4）：182-183.

[11] 谢智乾，王哲烽，时惠麟.阿加曲班—水合物合成路线图解[J].中国医药工业杂志，2011，42（11）：178-180.

[12] 周学福，魏文涛，孙继铨.阿加曲班及其制备方法[S].CN10134848.2009.

[13] Kikumoto，Ryoji Machida-shi.Method for preparing n2-arylsulfonyl-1-argininamides： EP，0823430A1[P].1987-08-04.

[14] Tamao，Yoshikuni.Alpha-（N-arylsulfonyl-L-argininamides，processes for their preparation and pharmaceutical composltions containing these substances.EP，0008746A1[P].1979-08-22.

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2 结果

2.1 N-（3-甲基喹啉-8-磺酰氯）-N-硝基-L-精氨酸的制备

本步反应是氨基与磺酰氯缩合形成磺酰胺，在本步反应过程中用到3-甲基喹啉-8-磺酰氯容易在空气中吸潮变质，且如采用直接加入固体的加料方式经重现实验发现放热较剧烈，故本文报道的加料方式为用四氢呋喃稀释溶解后慢速流入到体系。

2.2 （2R，4R）-4-甲基-1-[（S）-2-（3-甲基喹啉-8-磺酰胺基）-5-（3-硝基呱基）-正戊酰基]哌啶-2-甲酸乙酯的制备

本步反应是用三氯氧磷作为氯化剂与中间体二反应生成更具活性的酰氯，再与（2R，4R）-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯缩合生成中间体三，三乙胺做缚酸剂。其中三氯氧磷需过量投入，因为中间体2与三氯氧磷需完全反应生成活性酯（酰氯）才能有效进行缩合。

2.3 （2R，4R）-4-甲基-1-[（S）-2-（3-甲基喹啉-8-磺酰胺基）-5-（3-硝基呱基）-正戊酰基]哌啶-2-甲酸的制备

本步反应是酯的水解，影响较大的因素为反应温度和碱的浓度，温度过高或者碱的浓度偏高均会生成较多副产物。

2.4 （2R，4R）-4-甲基-1-[（S）-2-（3-甲基-1，2，3，4-四氢喹啉-8-磺酰胺基）-5-呱基正戊酰基]哌啶-2-甲酸的制备

本步反应为在冰醋酸，钯碳做催化剂，高温高压下的加氢还原反应，首先将与胍基相连的硝基还原掉，然后在高温高压下将吡啶环还原成哌啶环，条件过于温和或者反应时间不够均会出现反应在不完全的情况，另外因为底物中含有硫元素可能会使催化剂中毒，故钯碳的质量以及用量也可能会影响还原情况。

2.5 阿加曲班一水合物的制备

因为本步反应是做重结晶，用极性较大的溶剂水除去阿加曲班粗品中的少许极性大的杂质，同时阿加曲班在水中属于极微溶，故水的用量，加水的方式，析晶方式，降温方式，析晶温度等均需要考察。

3 讨论

阿加曲班一水合物的化学结构均经核磁氢、碳谱，红外及元素分析，热重分析等进行了确认。该阿加曲班一水合物合成路线共涉及五步反应、各步反应收率较高，操作简单，工艺稳定，纯度较好，适合工业化生产。

[参考文献]

[1] 李家明，马逢时，龙子江，等.（吡啶-3-基）甲氧基）芳酸衍生物的合成及抗血小板聚集活性[J].化学研究与应用，2009，10（4）：231-233.

[2] 李家明，赵永海，马逢时，等.川芎嗪芳酸衍生物的合成及抗血小板聚集活性[J].有机化学，2008，28（9）：287-288.

[3] 孟丽莉，殷春梅，徐辉，等.阿加曲班联合舒血宁治疗急性脑梗死的有效性和安全性研究[J].牡丹江医学院学报，2010，31（4）：230-232.

[4] 冯庚.危重症社区现场急救系列讲座——急性心肌梗死的溶栓药物（3）[J].中国全科医学，2007，10（13）：132-135.

[5] 杨秦南，张峰，钱菊英，等.血栓抽吸术在急性心肌梗死直接介入治疗中的应用[J].中国临床医学，2007，14（2）：253-255.

[6] 袁莉娟，刘爱民，刘蕾.新型凝血酶抑制剂阿加曲班[J].中国新药杂志，2005，14（2）：230-234.

[7] 汪燕.新型抗凝药物研究进展[J].中国新药杂志，2011，20（6）：178-180.

[8] 王嘉桔，赵文光，王丽霞.诺保思泰（阿加曲班）在心血管系统疾病中的应用[J].血栓与止血学，2007，13（4）：389-392.

[9] 傅毅.阿加曲班在美国上市[J].国外医药（合成药生化药制剂分册），2001，21（1）：198-199.

[10] 王运红，欧阳晨曦，周玫，等.阿加曲班的临床应用及临床监测方法[J].中华临床医师杂志，2010，4（4）：182-183.

[11] 谢智乾，王哲烽，时惠麟.阿加曲班—水合物合成路线图解[J].中国医药工业杂志，2011，42（11）：178-180.

[12] 周学福，魏文涛，孙继铨.阿加曲班及其制备方法[S].CN10134848.2009.

[13] Kikumoto，Ryoji Machida-shi.Method for preparing n2-arylsulfonyl-1-argininamides： EP，0823430A1[P].1987-08-04.

[14] Tamao，Yoshikuni.Alpha-（N-arylsulfonyl-L-argininamides，processes for their preparation and pharmaceutical composltions containing these substances.EP，0008746A1[P].1979-08-22.

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