宫红梅
【摘要】本文综述了高效毛细管电泳的分离原理及模式,蛋白质的分离特性及抑制吸附的方法,电渗流的影响因素和控制方法。
【关键词】高效毛细管电泳;蛋白质;电渗流
1.背景
毛细管电泳法由于其特有的快速,高效,简单,成本低等特点也越来越多的应用于蛋白质的研究中,如多肽的分析,蛋白质的细微结构差异分析,以及鉴定蛋白质的纯度,蛋白质反应动力学过程,测定蛋白质的分子量等[1]。
2.毛细管电泳在蛋白分离中的应用
2.1 高效毛细管电泳用于蛋白质分离的模式
(1)毛细管区带电泳:HPCE中最简单的、应用最广泛的一种方式,毛细管内只充入缓冲溶液,分离过程中电渗流由毛细管内壁表面电荷所引起的管内液体的整体流动起着主导作用。一组化合物中,阳离子迁移最快,中性物质居中,而阴离子速度最慢。被分析物中各化合物带电荷数差别越大,相对分子质量的差别越大,分离度越大,但所有的中性物质彼此不能分离。
(2)胶束电动毛细管色谱(MECC或MEKC):结合了电泳技术与色谱技术,也是HPCE中应用最广的方式之一。MECC是唯一的既能分离中性组分又能分离带电组分的电泳技术。其原理是在缓冲溶液中加入表面活性剂,如果表面活性剂的浓度达到临界浓度,则表面活性剂单体就结合在一起形成胶束。在缓冲液中添加的表面活性剂具有吸附、增溶、形成胶束等功能,因此增加了该模式分离化合物的范围[2]。
(3)毛细管凝胶电泳(GCE):毛细管内填充凝胶或其他筛分介质,荷质比相同但大小不同的分子,在电场力的推动下经凝胶聚合物构成的网状介质中电泳受到的阻力不同达到分离。……