高效液相色谱光化学在线衍生技术在11种磺胺药物残留检测中的应用

陈万勤等

摘要：建立了磺胺药物残留的高效液相色谱光化学在线衍生荧光检测方法，并应用于猪肉的检测。样品经过乙腈提取，色谱柱分离后，通过在线光化学衍生后，用荧光检测器进行直接检测。优化后的色谱条件：Eclipse Plus C18柱（250 mm × 4.6 mm， 5.0 μm），流动相为均含0.2%甲酸的乙腈、甲醇和水梯度洗脱，检测激发波长为248 nm，发射波长为350 和412 nm。各种磺胺在各自浓度范围内线性相关系数R2>0.999，回收率在85.7%～101.1%之间，RSD为1.9%～6.6%（n=6），各磺胺的检出限（S/N=3）为0.2～3.0 μg/kg，定量限（S/N=10）为0.5～10.0 μg/kg。

关键词：光化学在线衍生；高效液相色谱荧光检测法；磺胺

1引言

磺胺（Sulfonamides， SAs）是一类广谱抗菌药物，广泛应用于水产养殖业和畜牧业，是预防和治疗细菌感染性疾病的化学药物。磺胺类药物还用于马、牛的传染性脑膜炎，羊下痢、猪下痢和弓形体病，并且对于禽类球虫病具有较好疗效[1]。由于养殖业中磺胺类药物的使用导致了动物源性食物中残留，从而危害人体健康[2，3]。我国和欧盟均规定了磺胺在动物组织中的最高残留限量[4，5]。动物组织中磺胺的检测方法主要有液相色谱串联质谱法[6～8]，液相色谱紫外检测法[9～11]，液相色谱荧光检测法[12，13]。磺胺类药物自身不具有荧光活性，采用荧光检测法时通常需要进行柱前或柱后化学试剂衍生才能进行检测。研究发现，磺酰胺基是光化学活性基团，在紫外光照射下会发生光化学反应，产物具有荧光性质，通过荧光光度法可以对其进行检测[14～17]。最近研制出一种光化学在线衍生器，应用于高效液相色谱后，可以进行在线光化学衍生使分子产生荧光活性，利用荧光检测器可以有效地检测[18，19]。相……