CO2气腹环境对人宫颈癌Hela细胞生长及卡铂敏感性的影响

艾 君 韩 萍李 楠

(河北联合大学附属医院妇产科 河北唐山 063000)

随着微创手术技术的发展，腹腔镜在妇科良性肿瘤手术中的应用日益增多。但腹腔镜用于恶性肿瘤手术的安全性，特别是术后发生肿瘤腹腔扩散和穿刺点转移的问题引起很大的争议［1］，主要焦点是CO2气腹是否促进肿瘤生长与种植转移以及腹腔镜术后化疗药物敏感性问题。Hela细胞是宫颈癌中典型的癌细胞，增殖异常迅速，常被用作实验室研究的对象。本实验选取人宫颈癌Hela细胞为研究对象，采用CCK8法检测细胞增殖抑制率，流式细胞仪PI染色分析细胞周期;Annexin V-FITC检测细胞早期凋亡率，探讨体外模拟腹腔镜CO2气腹环境对人宫颈癌Hela细胞生长，及经过CO2环境作用后人宫颈癌Hela细胞对化疗药物卡铂敏感性的影响，以评价CO2气腹腹腔镜手术在宫颈恶性肿瘤手术中应用的安全性，并为腹腔镜术后早期使用化疗药物的可靠性、必要性和有效性提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料 主要试剂和仪器DMED培养基(Gibco公司)，胰蛋白酶(Sigma公司)，胎牛血清(Hyclone公司)，卡铂(大连美仑生物技术公司)，青霉素为华北制药集团公司产品;链霉素为山东鲁抗医药股份有限公司产品;乙醇(上海国药集团)，Annexin V/PI检测试剂盒(BD公司)，CCK-8试剂盒(碧云天公司)，CO2培养箱(Thermo公司)，CO2气腹机(日本OLYMPUS公司)流式细胞仪(FACSCalibur BD公司)，细胞过滤器(Millipore公司)，酶标仪MK3(Thermo公司)。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养。人宫颈癌Hela细胞株购自上海中科院，细胞在含10%胎牛血清的DMEM培养液中置于37℃，5%CO2培养箱中常规传代培养。实验所用细胞均系传2～3代后的对数生长期细胞。……