蜜蜂巢脾提取物的降血脂研究

赵红霞，黄文忠，邹宇晓，沈维治，林光月，梁 勤，罗岳雄*

1 广东省昆虫研究所，广州 510260;2 广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所，广州 510640;3福建农林大学，福州 350002

巢脾是指由蜜蜂蜡腺分泌蜡质后建造的双面巢房结构，是蜜蜂栖息繁衍育子、贮存花蜜花粉的场所，含有大量的生物活性成分。我国是世界第一的养蜂大国［1］，提供了丰富的优质蜂产品，但是巢脾作为蜂群的副产物，研究开发的程度较低且养蜂生产淘汰下来的巢脾数量相当惊人［2］。近年来研究表明蜜蜂巢脾对鼻炎、乙型肝炎、急性乳腺炎等炎症以及抑菌杀菌、攻毒杀虫、祛风镇痛、抗肿瘤、抗氧化(清除自由基)功能等生物学以及药理学价值［2-8］。尤其是，巢脾提取物具有抑菌效果，吴国栋等通过巢脾抑菌试验表明，巢脾提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏杆菌、伤寒杆菌产生明显抑制作用［9］。朱俊彦等报道0.5 g/mL 和0.25 g/mL(终浓度)意蜂巢脾水提液对短小杆菌、金黄色葡萄球菌、八叠杆菌、大肠杆菌和蜡状杆菌都有很好的抑制作用［10］。龚蜜等研究表明，巢脾提取物对金黄色葡萄球菌均有抑制作用，并且抑制效果呈浓度依赖效应［11］。巢脾对多种细菌具有抑制作用，且对革兰氏阳性细菌的抑制效果优于对革兰氏阴性细菌的抑制效果。自由基对人体危害极大，必须补充有效的抗氧化物来抑制自由基，所以天然优质的抗氧化物选择非常重要，老蜂巢具有清除自由基的作用［12］。褚亚芳等得出巢脾水提物对于对二甲苯致小鼠耳肿胀和角叉菜胶致小鼠足肿胀等急性炎症有显著的抑制作用［13］;匡邦郁等应用巢脾提取物治疗急性传染性肝炎、慢性肝炎、迁延性肝炎、早期肝硬化214 例，同时对各种鼻炎294 例，包括慢性鼻炎、慢性副鼻窦炎、过敏性鼻炎、肥大性鼻炎、单纯性鼻炎［14］。程茂盛等通过巢脾提取物对试验菌株金黄葡萄球菌、铜绿假单胞菌、表皮葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、肺炎链球菌抑制有良好的抑制效果［15，16］。目前，民间有记载关于巢脾提取物用于降血脂的功效，但其药效成分和作用机理尚不明确，因此本文探讨了蜜蜂巢脾提取物对高脂血症小鼠的降血脂作用，为巢脾在医药保健领域的应用提供科学依据，为巢脾的产业化开发提供有效的技术保障。

1 材料与仪器

1.1 蜜蜂巢脾提取物

冰冻破碎并过筛后，2 kg 蜜蜂巢脾和1 kg 水混匀，煮至完全溶解，过滤，除去蜂蜡后，再将滤渣和滤液混合，慢火(80～86 ℃)煮2～3 h，过滤去渣，剩余滤液慢火(80～86 ℃)煮至浓缩为500 g。小鼠高、中、低剂量分别设为10 g/kg·bw·d，5 g/kg·bw·d，2.5 g/kg·bw·d。

1.2 实验动物

雄性KM 小鼠(20±2 g)，购自广州中医药大学动物实验中心，许可证号SCXK(粤)2008-0020。

1.3 试剂

高脂饲料(上海起发实验试剂有限公司)，高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C 选择性沉淀法)试剂盒(北京北化康泰临床试剂有限公司);甘油三酯(TG 酶法)试剂盒，总胆固醇(CHO 酶法)试剂盒，均由浙江东瓯诊断产品有限公司提供，其余试剂均为国产分析纯。

1.4 仪器

AL204 电子天平(上海梅特勒托利多仪器有限公司);HWS26 电热恒温水浴锅(上海一恒有限公司);MM-2 型快速旋涡振荡器(江苏省姜堰市沈高康健生化器具厂);SB25-12DTD 超声波清洗机(宁波新芝生物科技股份有限公司);D-37520 离心机(Thermo Electron LED GmbH);酶标仪;计时器

2 实验方法

2.1 实验小鼠

KM 雄性小鼠喂饲基础饲料，适应性喂养7 d后，按体重随机分为6 组，每组10 只小鼠:①空白对照组:饲喂基础饲料和灌喂生理盐水;②高血脂对照组:饲喂高脂饲料和灌喂生理盐水;③阳性对照组:饲喂高脂饲料和灌喂阳性药物(辛伐他汀);④高剂量组:饲喂高脂饲料和巢脾提取物(10 g/kg·bw·d);⑤中剂量组:饲喂高脂饲料和巢脾提取物(5 g/kg·bw·d);⑥低剂量组:饲喂高脂饲料和巢脾提取物(2.5 g/kg·bw·d)。每饲喂7 d 后禁食12 h，进行眼眶取血，测定小鼠的总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇等三项血脂指标(按试剂盒使用说明测定)。

2.2 数据处理与统计

本实验数据用SPSS17.0 statistics 统计软件中邓肯氏新复极差检验分析，结果以平均数±标准差(±s)表示。

3 实验结果

3.1 实验小鼠体重变化

从实验第1 周开始至第5 周实验结束，各组小鼠的体重呈增长趋势。其中，相对于空白对照组而言，高血脂对照组、阳性对照组和低剂量组小鼠的体重增长较快，但是实验过程中各组间的体重没有显著性差异(P＞0.05)(表1)。

3.2 血脂指标检测

3.2.1 对小鼠血清总胆固醇(TCH)的影响

实验第一周，各组小鼠血清中总胆固醇水平均无显著性差异(P＞0.05)。到实验中期(第3 周)，给药组(包括高血脂对照组，阳性对照组，高、中、低剂量组)的总胆固醇水平明显高于空白对照组，存在显著性差异(P＜0.05)。到实验后期(第5 周)，所有剂量组的总胆固醇显著低于高血脂对照组的总胆固醇水平。其中，高剂量组降总胆固醇水平最明显，中剂量组次之，低剂量组最小。高剂量组和阳性对照组之间无显著性差异(P＞0.05)(见表2)。

表1 各组小鼠的体重变化Table 1 Body weights of mice among different groups

表2 巢脾提取物对小鼠血清总胆固醇的影响Table 2 The effects of honeybee comb on serum TC in mice

3.2.2 对小鼠甘油三酯的影响

实验第一周，各组小鼠血清中甘油三酯水平均无显著性差异(P＞0.05)。实验中期(第3 周)，给药组(包括高血脂对照组，阳性对照组及高、中、低剂量组)的甘油三酯水平显著高于空白对照组(P＜0.05)，而阳性对照组和高、中、低剂量组的甘油三酯水平均显著低于高血脂对照组(P＜0.05)。到了实验后期(第5 周)，所有剂量组的甘油三酯水平均显著低于高脂对照组(P＜0.05)。其中，高剂量组降甘油三酯水平最为明显，中剂量组次之，低剂量组最小。高剂量组与阳性对照无显著性差异(P＞0.05)(见表3)。

表3 巢脾提取物对小鼠血清甘油三酯的影响Table 3 The effects of honeybee comb on serum TG in mice

3.2.3 对小鼠高密度脂蛋白的影响

实验第一周，各组小鼠血清中高密度脂蛋白水平均无显著性差异(P＞0.05)。到实验中期(第3周)，给药组(包括高脂对照组，阳性对照组及高、中、低各剂量组)的高密度脂蛋白水平显著低于空白对照组(P＜0.05)，给药组组间无显著差异(P＞0.05)。到了实验后期(第5 周)，给药组高密度脂蛋白显著高于高脂对照组(P＜0.05)，且阳性对照组和高剂量组显著高于中、低剂量组(P＜0.05)(见表4)。

表4 巢脾提取物对小鼠高密度脂蛋白的影响Table 4 The effects of honeybee comb on HDL-C in mice

4 讨论

高脂血症是指由于脂肪代谢或运转异常使血浆一种或多种脂质高于正常，表现为高胆固醇血症、高甘油三酯血症或两者兼有，因此，本研究对实验动物胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白水平进行了测定。本实验结果显示，巢脾提取物能较好地降低高脂血症小鼠血清中胆固醇和甘油三酯水平，提高高密度脂蛋白的含量，且具剂量依赖性，说明巢脾提取物能较显著地降低高脂血症模型小鼠的血脂水平。

目前，临床上常用的降血脂药物主要有降甘油三酯为主的贝特类药物和降胆固醇为主的他汀类药物，然而，这些药物长期服用不可避免地产生较多的不良反应［17］。民间有记载高血脂患者通过食用巢脾物，降低血脂的功效;未见相关的动物试验及其深入的机理研究［2］。通过本研究，不仅证实了相关的记载或报道，而且探讨了巢脾提取物对高血脂小鼠的降血脂功效。

本研究表明，巢脾提取物具有良好的降血脂作用，有望开发成为安全有效的降脂药物，其确切作用机制有待进一步研究。

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