血液中氨基酸含量的高效液相色谱及其质谱联用测定方法研究进展

王清华，熊筱娟，张 凤，高守红

(1. 宜春学院 化学与生物工程学院，江西 宜春 336000;2. 第二军医大学 长征医院药学部，上海 200003)

氨基酸是机体代谢的重要物质之一，具有广泛的生物学功能，是构成生物机体蛋白质分子的基本组成单位和维持内稳态重要的物质基础。人体内参与氨基酸代谢的相关蛋白和酶发生缺陷或者各种病理状态都会导致氨基酸代谢异常和血液氨基酸水平的改变。例如，对称二甲基精氨酸(SDMA)和非对称甲基精氨酸(ADMA)的变化能够较好地反映在肾脏疾病中肾功能受损伤的严重程度。［1－5］因此，监测生物样本中(血液、尿液等)的氨基酸含量具有重要的意义，［6－10］在临床上观测氨基酸的动态变化行为可以为相关疾病的诊断提供辅助依据。

目前，有关氨基酸分析方法研究的报道比较多，常用的有氨基酸分析仪测定法(amino acid analyzer，AAA)、高效液相色谱法(High－performance liquid chromatography，HPLC)，气相色谱法(gas chromatography，GC)，毛细管电泳法(Capillary electrophoresis，CE)等。近30 年来，随着质谱分析技术的出现与普及，作为一新兴的技术已经运用到了生命科学、生物化学、医学、食品等领域。因此，作为高特异性和高灵敏度检测工具的质谱，同样在分析生物样本中小分子氨基酸含量发挥着重要的作用。［11－13］本文主要对HPLC，液相色谱－质谱联用(HPLC－MS/MS 和UPLC－MS/MS)等技术在氨基酸定量分析中的应用进行了综述和评价。

1 液相色谱法

由于氨基酸的极性比较大，在普通的C18 反相色谱柱上保留行为极差，因此，在复杂的生物样本或非生物基质中，广泛地定量氨基酸是一个极大的挑战。……