蜡蚧轮枝菌代谢粗提物对烟草上烟粉虱和烟蚜的杀虫活性

叶　淦， 方大琳， 王联德*

(1.赣州市果业局， 江西 赣州 341000；

2.福建农林大学植物保护学院， 福建 福州 350002)

蜡蚧轮枝菌代谢粗提物对烟草上烟粉虱和烟蚜的杀虫活性

叶淦1， 方大琳2， 王联德2*

(1.赣州市果业局， 江西 赣州 341000；

2.福建农林大学植物保护学院， 福建 福州 350002)

摘要:测定了3株蜡蚧轮枝菌Lecanicillium lecanii的代谢粗提物(toxinV3450、toxinVp28、toxinVl6063)对烟草两种害虫烟粉虱Bemisia tabaci和烟蚜Myzus persicae的杀虫活性。结果表明，3株菌株的代谢粗提物对烟粉虱3龄若虫和烟蚜无翅母蚜均具有较强杀虫活性， 3株菌株的代谢粗提物对烟粉虱3龄若虫的LC50分别为0.11%、0.23%和0.18% ；对烟蚜的LC50分别为0.14%、0.35%和0.29%。表明V3450菌株的代谢粗提物对烟粉虱3龄若虫和烟蚜的杀虫活性最强，Vp28菌株的代谢粗提物toxinVp28的杀虫活性次之，Vl6063菌株的代谢粗提物toxinVl6063杀虫活性最弱。

关键词:烟草害虫; 烟粉虱; 烟蚜; 蜡蚧轮枝菌； 代谢粗提物; 杀虫活性

真菌毒素在昆虫疾病和致死过程中起重要作用(王联德等，2007)。蜡蚧轮枝菌Lecanicilliumlecanii在侵染昆虫过程中，毒素同样起重要作用。1978年日本学者首次报道了对蜡蚧轮枝菌毒素的研究，证实了从蜡蚧轮枝菌和白僵菌中提取对家蚕有毒杀作用的活性物质，并对活性物质的化学结构和生物活性作了研究(Kanaokaetal.,1978)；1982年英国学者也对此菌具有杀虫活性的物质作了研究(Claydon and Grove，1982) ；1994年以色列Gindin等研究了该菌粗提物对烟粉虱Bemisiatabaci、棉蚜Aphisgossypi、菊蚜Acythosiphonpisum有毒杀作用(Gindinetal.,1994)；李国霞等(1995)、王克勤等(2000)分别研究了蜡蚧轮枝菌Vl10095R,Tri-Ba81菌株的代谢粗提物对温室白粉虱Trialeurodesvaporariorum和麦长管蚜Sitobionavenae、棉蚜Aphisgossypi等害虫的杀虫活性。我们在提取了蜡蚧轮枝菌代谢粗提物, 并分析了代谢粗提物对烟粉虱的忌避作用和拒食作用的基础上(王联德和黄建，2006;Wangetal.,2007)，进一步测试了蜡蚧轮枝菌代谢粗提物对烟草两种害虫烟粉虱和烟蚜Myzuspersicae的杀虫活性。

1 材料与方法

1.1供试蜡蚧轮枝菌代谢粗提物

生物测定所用蜡蚧轮枝菌代谢粗提物为蜡蚧轮枝菌V3450、Vp28、Vl6063菌株的代谢粗提物粗提物(浓缩至代谢粗提物干物质含量为10 gDW/100 mL，即浓度为10%(w/v))，提取方法按王联德和黄建(2006)和 Wangetal.(2007)。试验时按所需浓度用含0.03%吐温80的蒸馏水溶液稀释配成组分活性测定用V3450菌株代谢粗提物的2个活性组分(Toxin-X和Toxin-VII)(王联德和黄建，2006；Wangetal.，2007)，其供试浓度用含0.01%丙酮的0.03%吐温80的水溶液稀释成0.5%(5 mg/mL)、0.1%、0.05%、0.02%。

1.2供试昆虫

试验所用烟粉虱为福建农林大学植物保护学院玻璃温室多年饲养的烟粉虱；杀虫活性测定所用无翅母蚜为福建农林大学植物保护学院玻璃温室烟草上采集。饲养温度为28 ℃左右，相对湿度70%-90%。

1.3供试昆虫寄主植物

生物测定所用烟粉虱和烟蚜寄主植物均为烟草Nicotianatabacum。

1.4蜡蚧轮枝菌代谢粗提物的杀虫测定

所用V3450、Vp28、Vl6063菌株的代谢粗提物(toxinV3450、toxinVp28、toxinVl6063)用5 mL丙酮(浓度为0.01%(w/v))溶解，然后用含0.03%吐温80的蒸馏水溶液配成5个浓度的处理液(即1%、0.4%、0.2%、0.1%、0.05%)。测试环境为空调养虫室(25±3 ℃、70±5% RH、L：D=14：10)。

1.5对烟粉虱3龄若虫的杀虫活性测定

将载虫(3龄若虫)的烟叶片浸于上述浓度的代谢粗提物药液中，30 s后取出，待药水晾干后，将叶片的叶柄插入植物营养液浸泡过的花泥上，用高9 cm、φ 4 cm的玻璃罩罩住，罩口盖以保鲜膜(保鲜膜用昆虫针扎孔)，置于空调养虫室。每处理设5个浓度，每浓度设3次重复，每重复接入20头烟粉虱3龄若虫，每重复喷1 mL药液。48 h后在40倍解剖镜下观察烟粉虱3龄若虫存活情况，计算48 h后的校正死亡率和若虫存活情况，干瘪若虫或停留在3龄的若虫视为死亡。

1.6对烟蚜无翅成虫的杀虫活性测定

参照李国霞等(1995)方法并作改进，用手持喷雾器对带烟蚜无翅母蚜的烟叶(每叶烟蚜20头)喷雾。待水珠滴干，将叶片置于浸水的海绵上，叶片与海绵之间垫一吸水滤纸，置于9 cm培养皿，上罩一玻璃罩(高9 cm、φ 4 cm)，罩口盖扎孔的保鲜膜，置于空调养虫室。每处理设5个浓度，每浓度设3次重复，每个重复接入20头烟粉虱3龄若虫，每重复喷1 mL药液。48 h后在40倍解剖镜下观察无翅成存活情况，计算48 h后的校正死亡率和无翅成蚜存活情况。

2结果与分析

2.1蜡蚧轮枝菌毒素的杀虫活性

以烟粉虱3龄若虫、烟蚜无翅成虫为试虫，测定了蜡蚧轮枝菌3株菌株(V3450、Vp28和Vl6063)的代谢粗提物的杀虫活性，结果见表1。

表1　蜡蚧轮枝菌代谢粗提物对烟粉虱和烟蚜的杀虫活性

注： 表中为平均值±标准误，采用Duncan多重比较，同一列不同字母表示在0.05水平上差异显著。

菌株V3450代谢粗提物处理48 h后，烟粉虱3龄若虫的死亡率为24.30 %-92.40%，烟蚜无翅成虫的死亡率为22.37 %-90.53%；菌株Vp28代谢粗提物处理48 h后，烟粉虱3龄若虫的死亡率为11.66 %-82.55%，烟蚜无翅成虫的死亡率为13.51 %-79.31%；菌株Vl6063代谢粗提物处理48 h后，烟粉虱3龄若虫的死亡率为17.43 %-84.21%，烟蚜无翅成虫的死亡率为14.28 %-79.93%。

3株菌株的代谢粗提物均对烟粉虱和烟蚜具有较强杀虫活性，5个浓度作用下的死亡率均与对照差异显著。3株菌株的代谢粗提物对烟粉虱3龄若虫的LC50分别为0.11%、0.23%和0.18% ；对烟蚜的LC50分别为0.14%、0.35%和0.29%(表2)。表明V3450对烟粉虱3龄若虫和烟蚜的代谢粗提物最强，Vp28次之，Vl6063最弱。可进一步研究3株菌株的代谢粗提物对烟粉虱的生物活性。

表2　蜡蚧轮枝菌代谢粗提物对烟粉虱和烟蚜的LC50

注： 表中**为F检验差异极显著。

3讨论

蜡蚧轮枝菌代谢粗提物对烟草主要刺吸式害虫烟粉虱、烟蚜的杀虫活性测定表明，蜡蚧轮枝菌毒素对烟粉虱和烟蚜具有较高的杀虫活性，蜡蚧轮枝菌代谢粗提物对烟粉虱的敏感性最强，因此可作为烟草主要害虫烟粉虱、烟蚜的杀虫物质而进一步研究。蜡蚧轮枝菌代谢粗提物对烟粉虱等刺吸式害虫除了具触杀作用外，还具有忌避和拒食作用(王联德和黄建，2006；Wangetal.,2007)，低剂量的毒素虽不能杀死昆虫，但是能抑制昆虫取食，使昆虫饥饿致死，还能抑制成虫产卵(Wangetal.,2007)。有望开发成为用于防治害虫的杀虫剂。

参考文献

李国霞,高希武,刘青春,严毓骅.1995.蜡蚧轮枝菌的发酵培养及其代谢产物对害虫毒杀作用的初步研究.北京农业大学学报,21(4)：409-415.

王克勤,李新民,刘春来,许国庆.2000.蜡蚧轮枝菌毒素防治温室白粉虱的初步研究.植物保护,26(4)：44-45.

王联德,黄建,王宗华.2007.昆虫病原真菌的毒素种类及其结构与作用方式.见：李典谟等主编,昆虫学研究动态,北京：中国农业科技出版社,270-275.

王联德,黄建.2006.蜡蚧轮枝菌Lecanicilliumlecanii次生代谢产物对烟粉虱Bemisiatabaci的忌避作用模型,江西农业大学学报, 28(2)：195-199.

Claydon N,Grove JF.1982.Insecticidal secondary metabolic products from the entomopathogenous fungusVerticilliumlecanii.Journal of Invertebrate Pathology,40:413-418.

Gindin G,Barash I,Harari N,Raccah B.1994.Effect of endotoxic compounds isolated fromVerticilliumlecaniion the sweetpotato whitefly,Bemisiatabaci.Phytoparasitica,22(3):189-196.

Kanaoka M,Isogal A,Murakoshi S,Ichine M,Suzuki A,Tamura S.1978.Bassianolide,a new insecticidal cyclodepsipeptide fromBeauveriabassianaandVerticilliumlecanii.Agricultural Biological Chemistry,42(3):629-635.

Wang LD,Huang J,You MS,Guan X,Liu B.2007.Toxicity and feeding deterrence of crude toxin extracts ofLecanicillium(Verticillium)lecanii(Fungi:Hyphomycetes)against sweet potato whitefly(Bemisiatabaci;Hom.,Aleyrodidae).Pest Management Science,63(4): 381-387.

(责任编辑：陈晓雯)

叶淦，方大琳，王联德.2015.蜡蚧轮枝菌代谢粗提物对烟草上烟粉虱和烟蚜的杀虫活性.武夷科学，31：109-112.

Insecticidal activity of crude metabolite extracts fromLecanicilliumlecanii

againstBemisiatabaciandMyzuspersicaeon tobacco

Gan YE1， Da-Lin FANG2, Lian-De WANG2*

(1.FruitIndustryBureauofGanzhouCity,Ganzhou,Jiangxi341000,China;

2.CollegeofPlantProtection,FujianAgricultureandForestryUniversity,Fuzhou,Fujian350002,China)

Abstract:Crude metabolite toxins (toxinV3450，toxinVp28and toxinVl6063)extracted from Lecanicillium lecanii (Fungi: Hyphomycetes) strain V3450, Vl6063 and Vp28, respectively) were tested for contact toxicity activity against two tobacco pests Bemisia tabaci (Gennadius) (Hemiptera, Aleyrodidae) and Myzus persicae (Sulzer) (Hemiptera, Aphididae). The results showed that crude metabolites extracted from 3 strains of L.Lecanii exhibited high insecticidal toxicity against the third instar nymphs of B.tabaci and wingless adults of M.persicae, with values of LC50to the third instar nymphs of B.tabaci were 0.11%, 0.23% and 0.18%, respectively; values of LC50to wingless adults of M.persicae 0.14%, 0.35% and 0.29%, respectively. ToxinV3450exhibited the highest insecticidal toxicity against the third instar nymphs of B.tabaci and wingless adult of M.persicae, followed by toxinVp28. ToxinVl6063exhibited the lowest insecticidal toxicity against the third instar nymphs of B.tabaci and wingless adult of M.persicae.

Key words:tobacco pest; Bemisia tabaci; Myzus persicae; Lecanicillium lecanii; crude metabolite toxin; insecticidal activity

中图分类号:Q142； Q939.9

文献标识码:A

文章编号：1001-4276-(2015)01-0109-04

作者简介：叶淦(1964-)，男，本科。研究方向：农作物病虫害防治与技术推广。Email：yegan12@126.com。*通讯作者王联德(1967-),男，博士，教授。研究方向：害虫微生物防治与虫生真菌。Email：wangliande@126.com。

基金项目：中国烟草总公司福建省公司科技项目(闽烟科2013[2号])；公益性行业(农业)科研专项(200803005)。

收稿日期：2015-10-10; 发表日期：2015-10-31