广东佛山地区儿童地中海贫血基因型分析

林业辉 潘志伟 周杏 宋春林

（1.佛山市妇幼保健院儿科；2.佛山市妇幼保健院中心实验室，广东 佛山 528000）

地中海贫血（地贫）是由于一种或多种珠蛋白肽链合成受阻或完全抑制，导致血红蛋白成分组成异常，而引起的慢性溶血性贫血，属于一种常染色体不完全显性遗传病。佛山地处珠三角腹地，亦是地贫高发地区，为探讨本地区地贫基因型的分布特征，本文对来我院就诊和体检的部分儿童进行地贫基因检测分析，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2009年1月至2011年7月在我院儿科住院部、门诊和儿童保健科就诊和体检的儿童平均红细胞体积（MCV）＜82fl者。

1.2 仪器和试剂（1）Sysmex XT－2000i全自动血细胞分析仪：日本希森美康公司生产，XT－2000i所用测定试剂由该公司提供。（2）CR 扩增仪：美国BioRad 公司生产的icycler扩增仪（或美国ABI公司生产的2720 扩增仪），DNA 抽提试剂盒、α地贫基因诊断试剂盒和β地贫基因诊断试剂盒由深圳亚能生物技术有限公司提供，电泳所需0.8% 琼脂糖凝胶等为自配。

1.3 方法（1）MCV 测定：使用Sysmex XT－2000i全自动血细胞分析仪对全部受检儿童进行血细胞分析。（2）基因诊断：对经血细胞分析MCV＜82fl者用无菌EDTA 抗凝管抽取静脉血2mL；采用DNA快速提取试剂盒提取DNA，再用α地贫基因诊断试剂盒，以缺口PCR（gap－PCR）为原理的单管多重PCR（M－PCR）进行α地贫基因检测；同时用β地贫基因诊断试剂盒，以反向点杂交芯片法进行β地贫基因检测。具体步骤按说明书进行操作。

1.4 统计学处理 采用SPSS 17.0 统计软件。计数资料用率表示，不同组间率或构成比的比较用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。……