鹿哈胶囊中总氮量测定方法研究

杨映霞，仇一晶，孙玉滨，王丹辉，董小红，孟多佳

(1．吉林天药药物研发有限公司，长春 130012； 2．吉林天药本草堂制药有限公司，长春 130012；3．吉林省中医药科学院第一临床医院，长春 130012； 4．长春生物制品研究所有限责任公司，长春 130062)

鹿哈胶囊来源于名老中医多年的临床经验方，是由鹿骨等几味中药组成的胶囊剂。该方具有补肾益精、强筋壮骨的功效[1]。临床上用于治疗绝经后骨质疏松症。处方中鹿骨等药材均含有大量的蛋白质。为了控制产品质量，选择制剂中的总氮量为控制指标，并进行了方法学考察，为鹿哈胶囊质量标准的制定提供了保证。

1 实验材料、仪器与试剂

1.1 材料

鹿哈胶囊中试样品(批号：20130516、20130518、20130520，为吉林天药本草堂制药有限公司中试车间生产)。

1.2 仪器

凯氏定氮蒸馏装置(天长市长城玻璃仪器制造厂)；酸式滴定管(50mL，广西南宁融仪实验设备有限公司)。

1.3 试剂

鹿骨提取干燥物参照物(吉林天药研发有限公司实验室自制)；无水碳酸钠(基准物质，天津市光复科技发展有限公司)；硫酸、硫酸铜、硫酸钾、硼酸、甲基红、溴甲酚绿、氢氧化钠均为分析纯。

2 方法

总氮量测定：取10粒鹿哈胶囊内容物，混匀，研细，取粉末约1.0g，按照《中国药典》2010年一部附录IXL氮测定法第一法测定[2]。

3 结果

3.1 专属性考察

按处方比例和制备工艺制备鹿哈胶囊(去除鹿骨和其他药材的辅料)的阴性对照样品；取批号为20130516中试样品。按照上述总氮量测定方法测定总氮量，结果，阴性对照样品无干扰。

3.2 线性关系考察

精密称取鹿骨提取干燥物参照物测定总氮量，以参照物取样量为横坐标、总氮量为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程y=0.0651x+1.772，R2=0.9994(图1)。

图1 线性关系考察

结果表明，总氮量在24.98mg～29.89mg范围内，标准曲线线性关系良好，符合测定的要求。

3.3 取样量考察

取不同剂量的样品，按上述总氮量测定方法测定不同剂量样品中总氮量。当取样量约为1.0g时在标准曲线范围内，且消耗滴定液的量也较合适。

3.4 重复性考察

对批号为20130516的同一批样品，按上述总氮量测定方法独立进行6次测定，计算其相对标准偏差，结果平均值为2.682%，RSD为1.29%，表明方法重复性良好(表1)。

表1重复性考察

Table 1 The repeatability investigate

3.5 中间精密度考察

对批号为20130516的同一批样品，按上述总氮量测定方法测定，不同人员、不同时间进行6次测定，计算其相对标准偏差。结果平均值为2.679%，RSD为1.35%，表明方法中间精密度良好(表2)。

表2中间精密度考察

Table 2 Intermediate precision investigate

3.6 稳定性考察

取批号为20130516的样品，按上述总氮量测定方法测定，于0min、10min、20min、30min、40min连续测定5次，计算其相对标准差。结果平均值为2.671%，RSD为1.22%，在规定的限度内。表明在40min内供试品稳定性良好(表3)。

表3稳定性考察

Table 3 The stability investigate

3.7 准确度考察

精密称取样品6份(批号为20130516，其中总氮量按重复性6次测定平均值计算为26.82mg/g)，每份称样量约为0.5g，置凯式烧瓶中，精密加入鹿骨提取干燥物参照物(N含量0.0697mg/mg)192mg，按上述总氮量测定方法操作测定，计算回收率。结果平均回收率98.29%，RSD 1.06%。结果表明准确度良好(表4)。

表4准确度考察

Table 4 Accuracy investigate

3.8 样品含量测定

测定3批样品，每批取10粒鹿哈胶囊内容物，混匀，研细，取粉末约1.0g，精密称定，按照上述总氮量测定方法测定。每个样品单独测定2次，结果见表5。

通过以上方法学考察，说明鹿哈胶囊总氮量测定方法稳定可行，故列入鹿哈胶囊质量标准正文。

4 讨论

本试验采用经典的氮测定法对鹿哈胶囊进行总氮量测定，方法简便准确、稳定可行，为制定鹿哈胶囊的质量标准提供了可靠依据，对控制鹿哈胶囊的药品质量和广泛开发吉林省鹿产品具有一定意义。

表53批样品总氮量测定

Table5Thethreebatchoftotalnitrogeninsamplesizedetermination

批号Batchnumber称样量(g)Thesamplevolume总氮量(%)Thetotalamountofnitrogen平均总氮量(mg/粒)Theaveragetotalamountofnitrogen(mg/pellet)201305161.00021.00182.69112.06201305181.00091.00012.64611.81201305201.00110.99902.87112.88

[1]卫生部药典委员会．中华人民共和国卫生部药品标准：中药材第一册[M]．北京：卫生部药典委员会，1992．

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典版:一部[K].北京:中国医药科技出版社,2010.