葫蔓藤的急性毒性实验研究

肖开提·艾白都拉 买合素提·卡德尔 伊利亚尔·斯马伊

(新疆维吾尔自治区维吾尔医药研究所 乌鲁木齐市830049；实验单位：新疆维吾尔医方剂学实验室 乌鲁木齐市830049)

葫蔓藤Gelsemiumelegans（Gardn.etChamp.）Benth，又称为断肠草，是马钱科胡蔓藤属一年生的藤本植物，外形和金银花接近，缠绕常绿藤本，枝光滑，叶对生，细密而零碎，卵形至卵状披针形，全缘，花淡黄色，蒴果卵形。主要分布于我国河北、东北、西藏、新疆等地区。该植物的主要化学成分为钩吻碱丙、钩吻碱子、钩吻碱卯、钩吻碱寅、钩吻碱丑、钩吻碱戊等几种生物碱。该植物全株都有剧毒，在我国历代本草中均列为毒品，其中根和嫩叶毒性最强，并可迅速致死，其主要的毒性物质是葫蔓藤碱。该植物在医学上也有一些药效，以根、叶及全草入药，可以散瘀止痛，攻毒拔毒，杀虫止痒等，用来治疗皮肤湿疹、疔疮、风湿痹痛、跌打损伤、麻风等难症。

1 材料

1.1 药物与试剂

葫蔓藤纯品（≥98%），购自中山康之源生物科技有限公司，临时用生理盐水或这是蒸馏水稀释成所需浓度溶液，实验前用蒸馏水混悬做灌胃用。

1.2 受试动物

SPF级昆明小鼠，年龄5～7周龄，体重18～23g，雌雄各半，小鼠都健康。小鼠分性别饲养于空调室内，通风良好，室温控制在22℃左右，湿度控制在70%，左右，给小鼠喂标准颗粒饲料，使小鼠自由饮水和摄食。

1.3 仪器与试剂

梅特勒-托利多仪器有限公司生产的AL104电子天平；上海上天精密仪器有限公司生产的YP20001电子天平；北京市永光明医疗仪器厂生产的DZKM-S-6电热恒温水浴锅。

2 方法

参照经典的小鼠急性毒性实验方法LD50进行测定预试，最大耐受量MTD、最大给药量MLD和半数致死量LD50。对小鼠灌胃给葫蔓藤药物，进行急性毒性正式研究，均连续观察两周，记录小鼠的中毒反应、死亡率和死亡情况。

2.1 葫蔓藤小鼠急性毒性预试验

在试验前取禁食12h后小鼠10只，按体重随机分为2组，分别为葫蔓藤组和水对照组，每组各5只。按25mL·kg-1给葫蔓藤组小鼠灌胃给药1次，同时对照组用等体积的水进行灌胃。在与实验过程中，根据小鼠死亡的情况作适当的调整，分别找出引起小鼠死亡0%（Dn）和100%（Dm）死亡的剂量，并找出相应的剂量组间距r值，然后测定LD50值，并根据预试验结果进行正式试验。

3 结果

对小鼠急性毒性症状进行观察，空白对照组小鼠正常生长发育。葫蔓藤灌胃给药的最大给药量为356mg·kg-1·d-1。随着用药计量的增加，小鼠的死亡数和死亡率逐渐增加，具体情况见表1。在14天观察期内，葫蔓藤LD50是0.18g/kg.死亡小鼠急性毒性的症状主要有全身肌肉无力、眩晕、眼睑下垂、吞咽困难、垂头和肢无力、昏迷、腹痛、腹泻，渐至呼吸困难和麻痹，最终呼吸麻痹而死亡。存活小鼠体重增长比较慢，其余的未见有明显异常。

表1 改良寇氏法计算葫蔓藤根LD50

4 讨论

本研究对葫蔓藤急性毒性进行了观察。该植物虽然全株都有剧毒，但在在医学上也有一些药效，以根、叶及全草入药，可以来治疗皮肤湿疹、风湿痹痛、跌打损伤、麻风等难症。葫蔓藤的小鼠急性毒性大，毒性反应非常强烈，灌胃给药为113mg·kg-1·d-1时，小鼠开始死亡，最大给药量为356mg·kg-1·d-1。随着用药计量的增加，小鼠的死亡数和死亡率逐渐增加，其在体内蓄积毒性的“量-时-毒”关系，毒性作用部位和作用机制，还有待于进一步进行研究。

[1]吕晓慧,孙宗喜,苏瑞强,等.柴胡及其活性成分药理研究进展[J].中国中医药信息杂志,2012,19(12):105-107.