蒋 露,李慧昕,韩宗玺,孔宪刚,刘胜旺
(中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽呼吸道病创新团队,黑龙江 哈尔滨 150001)
鸡传染性喉气管炎病毒(Infectious larygotracheitis virus,ILTV)为疱疹病毒科、α-疱疹病毒亚科、传染性喉气管炎病毒属成员,也称禽疱疹病毒1型(Gallid herpesvirus1)[1],由该病毒引起的鸡传染性喉气管炎(ILT)是一种以急性上呼吸道症状为主的高度接触性传染病[2]。该病主要感染鸡,以呼吸困难、喘息、流鼻涕、结膜炎、咳出带血分泌物,剖检可见喉头和气管粘膜肿胀出血,气管内有干酪性分泌物堵塞为特征[3]。发病鸡出现体重及产蛋下降,并伴有不同程度的死亡,给养鸡业造成严重经济损失。
从上世纪50年代以来我国大部分地区有不断发生该病的报道,1992年以后在我国一些地区呈地方流行[4]。对于我国分离的一些病毒株如王岗株、烟台株、安徽株和河北株等,已有关于其致病性的相关报道[5]。由于ILTV LJS09分离株分离自现地死亡率较高ILTV感染鸡群,因此为了解该分离株的致病能力,本研究以人工感染SPF鸡的方式通过各项指标评价其致病性。通过对ILTV LJS09分离株致病性的研究,为其他ILTV流行株致病能力的研究提供了参考。
1.1 病毒株及实验动物 ILTV LJS09分离株由本实验室分离自江苏省某未经免疫的鸡场;4周龄40只SPF鸡由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物中心提供。
1.2 主要试剂 ExTaqDNA聚合酶、pM18-T载体和SYBR Green qPCR Kit购自TaKaRa公司;DNA GelExtractionKit购自OMEGA公司;PlasmidMiniprep Kit及DNA AxyPrep Body Fluid Viral DNA/RNA Miniprep Kit购自AxyGen公司;ILTV抗体检测试剂盒购自百测公司。
1.3 EID50的测定 将ILTV LJS09株进……