香花槐生物学特性及其芽分化影响因素研究

王颖，高宝刚

（黑龙江省林业监测规划院，黑龙江 哈尔滨 150080）

香花槐（Robiniapseudoacaciacv.idaho），又名富贵树，原产地为西班牙，属于蝶形花科，落叶乔木，整株高10～12m，树干为褐色至灰褐色。叶互生，羽状复叶，叶片美观对称，深绿色有光泽，青翠碧绿。总状花序，花被红色，有浓郁的芳香气味，可以同时盛开小红花200～500朵，异常壮观美丽。香花槐枝繁叶茂，树冠开阔，树干笔直，树景壮观，树的形状自然开张，树的状态苍劲挺拔，极其具有观赏价值。又是营造速生丰产林的优良树种。

香花槐喜光、抗低温，耐盐碱，耐干旱瘠薄，还能吸附噪声，抗病能力较强，为此病虫害较少，根系发达，萌芽、根蘖性较强，保持水土能力极强。枝繁叶大，叶柄凸出不易脱落，根系比较发达，主侧根健壮，萌蘖比较快，可有效地防风和保持水土[1]。

1 试验材料与方法

1.1 试验材料

繁殖材料选取3年生香花槐，并且健壮无病虫害的植株，分别截取树干上、中、下部位的当年生枝条，并分别不同时期采集。

1.2 试验方法

香花槐接种方法：先将超净台消毒后，将试验材料置于超净台上，用消毒试剂对试材进行消毒，并用无菌水冲洗数次，之后将试材表面水分吸干后接种到不同启动培养基中，每瓶装30～40mL培养基，每瓶接种一个外植体，培养15～20d后调查并统计外植体在不同培养基上的生长状况。

1.3 培养条件

培养温度24±2℃，光周期为14h／8h（光照／黑暗），日光灯光源，光强度为1 500～2 000lx。夜间温度不低于15℃[2，3]。

2 结果与分析

2.1 外植体采集时期的选择

香花槐每年11月中下旬开始落叶，进入休眠状态，休眠持续到第2年的3月末，在这一时间里采集同株相近位置不同休眠时期的枝条作为试验材料。将采集的试材在室内水培养进行催芽，使其逐渐解除休眠。待枝条上的芽萌动露出芽顶后，取已经萌动的芽作为外植体，比较不同休眠时期的冬芽作外植体时的萌动情况，并且调查其生长情况。试验从2010年12月18日起至2011年3月25日止，采集不同时期的休眠枝条，取芽作外植体接种于启动培养基上，其结果详见表1。

表1 不同休眠时期冬芽萌动情况

表1结果表明，2011年3月25日采集即将萌动的冬芽作外植体，其启动培养所需平均天数为12 d，芽萌动率为87.4%，效果较好；而2010年12月18日、2011年2月5日所取休眠枝上解除休眠的冬芽作为外植体，所需启动培养天数分别为32和24 d，芽萌动率为60.3%和68.5%，明显低于3月末采集的冬芽。因此，选用冬芽作外植体时，应选取春季即将萌动时的冬芽，它们的启动培养所需时间比较短，并且萌芽率比较高。

2.2 基本培养基筛选

基本培养基的选择是组织培养的重要环节，是试验成功与否的关键步骤。本试验采用单因子完全随机分组设计，选用MS、WPM、1／2MS、M四种基本培养基，附加6－BA0.5mgL－1，作培养基对比试验，以求筛选出芽增殖生长的最佳培养基。其他条件为2%蔗糖，6g·L－1琼脂粉，pH为6.2。

表2 基本培养基筛选

接种20d后调查结果。由表2可以看出，以MS为基本培养基，植株生长势良好，生长健壮，腋芽生长状况良好，但是丛生芽分化少，并且有部分苗木死亡现象；而以WPM为基本培养基，植株生长势较弱，腋芽生长不良，但是丛生芽生长好，分化多。M培养基为基本培养基，植株生长健壮，丛生芽生长良好，芽分化多。因此，从本试验的结果得出M是最佳基本培养基。

2.3 细胞分裂素浓度与种类配比试验

在上述试验中已经确定M为香花槐最佳基本培养基，因此在激素配比实验中，以M培养基为基本培养基，同时添加不同浓度、不同种类的细胞分裂素。细胞分裂素种类分别为ZT、KT、6－BA，浓度分别为0.1、0.5、1.0、2.0、3.0和4.0mgL－1。

表3 激素种类、浓度筛选

由表3得知，细胞分裂素以6－BA为最佳。当6－BA的浓度为0.5m·L－1时，植株增殖系数最大，达到2.42，其增殖分化苗生长健壮，丛生芽增殖生长快。但当6－BA的浓度为2.0mgL－1时少数植株的叶片出现枯黄现象，并且增殖缓慢，且随着6－BA浓度的升高，植株枯黄的现象更加严重，甚至出现死亡现象，增殖系数小于1.0。因此，适合香花槐增殖分化的细胞分裂素为6－BA，浓度为0.5mg·L－1[4，5]。

2.4 细胞分裂素与生长素配比试验

以M培养基附加6－BA0.5mgL－1为基本培养基，分别加入0.05、0.1、0.2mgL－1的IBA或NAA，结果见表4。

表4 激素组合对芽增殖的影响

由表4显示的增殖系数和增殖率可以看出，IBA对香花槐的增殖效果比NAA效果好。当IBA浓度为0.05mgL－1时，增殖率达73.5%，增殖系数为2.32，增殖效果最好。虽然当IBA浓度为0.20 mgL－1时的增殖系数、增殖率和IBA浓度为0.05 mgL－1时差异不大，但其增殖分化的苗生长较弱，出现叶片枯黄现象。因此，香花槐增殖培养的最佳组合为6－BA0.5mgL－1＋IBA0.05mgL－1＋2%蔗糖[6]。

3 结论

3.1 选用冬芽作外植体时，应选取春季即将萌动时的冬芽，它们的启动培养所需要的时间较短，并且萌芽率较高。

3.2 当灭菌时间达到8min时，外植体所带微生物绝大多数已被杀死。并且灭菌时间达到8min时，褐化率达到最小，成活率在灭菌8min时达到最高值52.4%。

3.3 M培养基为基本培养基，植株生长健壮，丛生芽生长良好，芽分化多。因此，从本试验的结果得出M是最佳基本培养基。适合香花槐增殖分化的细胞分裂素为6－BA，浓度为0.5mgL－1。香花槐增殖培养的最佳组合为6－BA0.5mgL－1＋IBA0.05mgL－1＋2%蔗糖。

[1]林庆昌.植物细胞组织培养汇[M].北京：中国农业大学出版社，2005

[2]曹孜义.实用组织培养技术教程[M].兰州：甘肃科学技术出版社，2001

[3]程家胜.植物组织培养与工厂化育苗技术[M].北京：金盾出版社，2003

[4]师素恩（译）.唐菖蒲体细胞胚发生和植株再生 [J].北方园艺，1997（3）：59－60

[5]周丽侬，邝哲师、陈俊秋，等.白鹤芋体细胞胚无性系的建立[J].广东园林，1994（4）：18－20

[6]刘选明，周朴华，屈姝存，等.百合鳞片叶离体诱导形成不定芽和体细胞胚[J].园艺学报，1997，24（4）：353－358