外源试剂对滇重楼种子萌发的影响*

唐 玲，王艳芳，李荣英，杨春勇，李 戈

（中国医学科学院药用植物研究所云南分所/西双版纳州傣药南药重点实验室，云南 景洪666100）

滇重楼[Paris polyphylla. Smith var. yunnanensis（Franch.）Hand.-Mazz] 为延龄草科重楼属多年生草本植物，主要分布于云南、贵州和四川，其根茎入药，有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊之功效[1]。滇重楼在我国有着悠久的药用历史，为云南白药、宫血宁、夺命丹等中成药的主要原料，已被收入2010 年版《中国药典》[2]。

传统滇重楼药用取材主要依赖于野生资源，随着新药的开发，滇重楼的需求量越来越大，人工种植已成为解决滇重楼资源匮乏的必然选择。天然条件下，滇重楼种子需要两冬一夏才能出苗，15 个月的出苗率也只有46.2%[3]。如何打破休眠缩短育苗时间，成为滇重楼人工种植的重点方面。种子的萌发过程由多种内源植物激素参与调节，因此应用外源激素或光照、后熟或低温等处理，能打破休眠，促进萌发[4]。袁春理等人对滇重楼的适宜萌发温度进行了研究，发现18～20℃是其萌发的最适温度[5-6]。本试验旨在探讨最适温度条件下，外源激素和试剂对药用植物滇重楼种子萌发特性的影响，为其大规模人工栽培和资源保护提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

滇重楼种子于2011 年采集于云南白药武定重楼基地，去皮处理。

1.2 不同化学药剂处理

滇重楼种子分别用赤霉素（GA3）、萘乙酸（NAA）、吲哚乙酸（IAA）、6-苄氨基嘌呤（6-BA）、硝酸钾（KNO3）与硼酸（H3BO3）对滇重楼种子进行浸种处理。其中赤霉素所用的浓度为50、100、200、500mg/L；萘乙酸所用浓度为20、50、100、200mg/L；吲哚乙酸、6-苄氨基嘌呤与硝酸钾所用浓度为：10、20、50、100mg/L；硼酸所用浓度分别为：50、100、200、500mg/L；种子的浸种时间均为24 h，每处理4次重复，每重复100 粒种子。以不用激素处理为空白对照。

1.3 层积处理

将化学药剂处理的种子与湿沙1 ∶3 混拌，然后进行恒温层积处理（温度20℃）在恒温箱中进行。

1.4 测定指标与方法

以滇重楼种子的胚根突破种皮视为萌发，分别于处理60、90d 后进行观察记录，萌发率=（萌发种子数/供试种子总数）×100%.

1.5 数据处理

试验数据采用Microsoft Excel 2003 处理，采用SPSS 17.0 统计分析软件对数据进行方差分析，采用Duncan 测验进行显著性分析，置信区间95%.

2 结果

2.1 赤霉素对滇重楼种子萌发的影响

由表1 可知，经不同浓度赤霉素处理后，滇重楼种子的发芽率发生显著变化。60d 时，在高浓度（200、500mg/L）赤霉素下，滇重楼种子的发芽率显著高于对照及其他浓度，其发芽率相比对照和其他浓度提高了20%左右。90d 时，赤霉素 处理的种子发芽率之间并无显著差异，与对照也无显著差异。说明在一定时间内，高浓度的赤霉素可以更快的促进种子发芽，显著提高滇重楼种子发芽率。

表1 不同浓度赤霉素处理滇重楼种子的发芽率

2.2 萘乙酸对滇重楼种子萌发的影响

由表2 可知，不同浓度萘乙酸处理后，滇重楼种子的发芽率与对照相比显著降低。随着萘乙酸浓度的逐渐升高，滇重楼种子的发芽率也逐渐降低，相比对照，60d 的发芽率了25%～40%，90d 时，其发芽率降低了23% ～76%.上述情况说明，萘乙酸能够显著抑制滇重楼种子的发芽。

表2 不同浓度萘乙酸处理滇重楼种子的发芽率

2.3 吲哚乙酸对滇重楼种子萌发的影响

由表3 可知，不同浓度吲哚乙酸处理后，滇重楼种子的发芽率呈现不同变化。60d 时，滇重楼种子发芽率在20mg/L 浓度下相比对照显著提高了13%，而在100mg/L 与10mg/L 的浓度下，种子的发芽率与对照相比分别显著降低了11%与13%. 90d时，除20mg/L 浓度，与对照相比，其余浓度下滇重楼种子的发芽率显著降低，在8%～14%之间。上述情况说明，在20mg/L 浓度下的吲哚乙酸在一定时间内能够促进滇重楼种子发芽，提高种子发芽率。

表3 不同浓度吲哚乙酸处理滇重楼种子的发芽率

2.4 6-苄氨基嘌呤对滇重楼种子萌发的影响

由表4 可知，经不同浓度6-苄氨基嘌呤处理后，滇重楼种子的发芽率随着浓度的增加逐渐降低。60d 时，滇重楼种子在低浓度（10mg/L）下，其发芽率与对照相比显著增加了12%；在高浓度下（50、100mg/L），滇重楼种子发芽率与对照相比分别显著降低了14%与25.66%. 90d 时，低浓度下（10mg/L），种子发芽率与对照相比显著增加了5.67%；而在高浓度下（100mg/L），滇重楼种子发芽率与对照相比分别显著降低了20.67%. 上述情况说明，低浓度的6-苄氨基嘌呤能够显著促进滇重楼种子发芽，提高其发芽率，高浓度下反而抑制其发芽。

表4 不同浓度6-苄氨基嘌呤处理滇重楼种子的发芽率

2.5 硼酸对滇重楼种子萌发的影响

由表2 可知，经不同浓度硼酸处理后，滇重楼种子的发芽率随着硼酸浓度的增加有所降低。60d时，低浓度（50mg/L）的硼酸下，滇重楼的发芽率与对照相比并无显著差异；随着硼酸浓度的逐渐升高，其种子发芽率逐渐降低，与对照相比，发芽率显著降低，在17.66%～34.66%之间。90d 时，滇重楼种子发芽率情况与60d 情况相似，在500mg/L 浓度时，其种子发芽率与对照相比显著降低了35.33%.上述情况说明，硼酸在低浓度情况下对滇重楼种子发芽并无显著影响，在短时间内，高浓度的硼酸显著抑制了其种子发芽。

表5 不同浓度硼酸处理滇重楼种子的发芽率

2.6 硝酸钾对滇重楼种子萌发的影响

由表6 可知，经不同浓度硝酸钾处理后，滇重楼种子的发芽率有所升高。60d 时，随着硝酸钾浓度的逐渐降低，滇重楼种子的发芽率也逐渐升高。在低浓度（10、20mg/L）下，滇重楼种子的发芽率与对照相比显著升高了18.34%与13.67%. 90d 时，滇重楼种子的发芽率与对照相比并无显著差异。上述情况说明，硝酸钾在低浓度条件下能够更快的促进种子发芽，显著提高滇重楼种子发芽率。

表6 不同浓度硝酸钾处理滇重楼种子的发芽率

3 结论与讨论

种子休眠是植物本身适应环境和延续生存的一种方式，是物种适应自然的一种生态策略。一般认为，种子的休眠特性是它在长期演化过程中形成的对不良环境的适应[7]。滇重楼种子休眠期漫长，其中种子存有萌发抑制物、种胚发育不完全以及生理学后熟是其休眠的主要原因[8]。使用某些植物外源激素或试剂浸种可以打破种子休眠，破坏妨碍种子萌发的活性物质，从而有利于种子的吸水萌发[9]，赤霉素是影响种子萌发的主要植物激素之一，可以提高种子水解酶的活性，使贮藏物质大量分解，并输送到新生器官供生长使用，因此，使用赤霉素浸种可以促进种子萌发[10]。萘乙酸 可促进细胞伸长与分裂，诱导形成不定根，促进插枝条生根[11]。吲哚乙酸是高等植物中最普遍存在的植物生长素，能影响细胞分裂、伸长和分化，也影响营养器官和生殖器官的生长、成熟和衰老[12]。6-苄氨基嘌呤作为一种细胞分裂素，可促进细胞分裂，诱导芽的分化，也可促进种子发芽[13]。硼在植物体内参与物质运输与生理代谢活动，影响作物的开花结实和发芽[14]。硝酸钾中的K+作为多种酶的激活剂，可以促进代谢多种酶的活性，诱导植物体内生长促进性激素的生物合成及其活力调控，从而提高种子活力，促进种子的萌发的作用[15]。

不同试剂对打破滇重楼种子休眠的作用有一定的差异。本次研究结果可以看出，赤霉素、吲哚乙酸、6-苄氨基嘌呤、硝酸钾一定情况下能够促进滇重楼种子的萌发，与对照（CK）相比，它们在缩短发芽天数，提高发芽率方面均有较明显的效果，相反，萘乙酸显著抑制了滇重楼种子的发芽。各试剂对滇重楼种子萌芽的影响与其使用浓度关系密切，高浓度下的赤霉素与低浓度下的吲哚乙酸、6-苄氨基嘌呤、硝酸钾都能够促进滇重楼种子的萌发，相反，高浓度下6-苄氨基嘌呤反而显著制其发芽。因而，只有摸索出合理的试剂浓度，才能更好地提高种子发芽率。

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