四氧嘧啶腹腔注射致小鼠血糖降低的试验报导

孟 美

(山东中医药大学理工学院，济南 250355)

四氧嘧啶（al loxan，ALX）可以对胰岛B细胞产生特异性破坏，终止胰岛素的分泌，进而引起动物持续性的血糖升高。根据其作用机理而制取的糖尿病动物模型与人类I型糖尿病相类似，因此，该种动物模型被广泛用于糖尿病相关治疗和药物研发中。本人在探究四氧嘧啶不同剂量致小鼠糖尿病的相关试验过程中发现，小剂量的四氧嘧啶引起了小鼠低血糖甚至死亡，在以往文献中并无相关报道，故重复此试验，并将试验结果作一报道。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1实验动物健康雄性4周龄昆明种小鼠26只，体重均为18-20g，购自山东鲁抗医药股份有限公司实验动物中心，许可证号：SCXK(鲁)20130001。

1.1.2试剂与器械四氧嘧啶，阿拉丁试剂(中国)有限公司产品，批号K13130001。强生稳豪型血糖仪、血糖试纸，强生（中国）医疗器械有限公司生产。

1.2试验方法

1.2.1动物分组将健康小鼠正常饲养7d，之后禁食6h，针刺尾静脉取血，按照血糖仪及试纸说明，测定试验前血糖。选择血糖值在3.9～6.1mmol/l的健康小鼠作为实验用动物,并根据血糖值随机分为对照组、小剂量组、大剂量组，对照组6只，小、大剂量组各10只。

1.2.2模型建立各组小鼠均禁食10h，之后配制9mg/ml四氧嘧啶溶液，小剂量组每只腹腔注射0.2ml溶液，大剂量组每只腹腔注射0.4ml溶液，对照组每只腹腔注射0.4ml生理盐水。溶液配制到注射结束在5min内完成，注射过程中将四氧嘧啶溶液置于冰浴锅中。

1.2.3血糖测定与分析分别于腹腔注射后12h、48h后，尾静脉取血测定每只小鼠血糖，并记录。每次测量前均禁食6h。试验数据采用SPSS 19.0对数据进行统计学处理，采用X±S表示,组间用t 检验方法进行处理。

2 试验结果

2.1血糖值变化

实验前根据血糖值随机分组，注射前三组血糖值差异无统计学意义。

注射后12h的血糖测定数据显示，大、小剂量组血糖均低于对照组，差异有统计学意义；大剂量组血糖值低于小剂量组，其中大剂量组2只血糖值低于2.8mmol/l，分别为1.8mmol/l、2.4mmol/l，均于注射后12h内死亡。

注射后48h的血糖测定数据显示，大剂量组血糖升高，且明显高于空白组。其中3只高于11.1mmol/l，为15.2 mmol/l、16.5mmol/l、12.0mmol/l，符合糖尿病模型造模成功的条件。小剂量组血糖仍低于对照组，且与12h差异无统计学意义。

表一 各组血糖值变化（X±S）

3 讨论

3.1四氧嘧啶致血糖变化规律

根据以上初步研究可知，足够剂量的四氧嘧啶在致血糖升高前会导致血糖降低。四氧嘧啶的急性中毒死亡均发生在血糖降低期间。该结论证实了，腹腔注射四氧嘧啶致糖尿病的造模中，以一定剂量的葡萄糖溶液灌胃可有效降低造模死亡率。该试验还发现低剂量的四氧嘧啶溶液能够导致小鼠持续性低血糖。

3.2四氧嘧啶的毒性机理

低剂量四氧嘧啶引起的血糖持续性降低。根据这一现象，对于四氧嘧啶的毒性机理有以下两种猜测：1.四氧嘧啶不仅能对胰岛B细胞产生损伤，作用初期也能激化胰岛B细胞，使其功能亢进，抑制血糖；2.四氧嘧啶并非特异性破坏胰岛B细胞，也能对胰岛A细胞或血液中的糖原产生破坏。关于以上猜测的相关研究尚属空白，需待进一步研究，来更深入的认识四氧嘧啶的毒性机理及制作糖尿病动物模型注意事项。

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