参考区间行业标准在汉族和维吾尔族人群中的适用性验证＊

邓朝晖，梁梦洁，宋颖博，宋 雪，易卫东，鹿新红，张 新△

（1.新疆生产建设兵团医院／石河子大学医学院第二附属医院检验科，新疆乌鲁木齐830002；2.石河子大学医学院第一附属医院检验科，新疆石河子832000）

检验项目参考区间是疾病诊断和健康评估的主要依据［1］。2012年12月，原卫生部发布了参考区间行业标准WS／T404.1－2012及WS／T404.2－2012［2－3］，首 次 以 行 业 标 准 的 形 式 公 布了中国成年人群6个临床常规生化检验项目的新参考区间，包括丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、谷氨酰转移酶（GGT）、总蛋白（TP）和清蛋白（ALB），并于2013年8月1日开始实施。自实施至今，新参考区间已在本实验室实行18个月。本地处于多民族聚居区，汉族和维吾尔族（简称维族）是本地区最主要的两个民族。新参考区间能否同时适用于汉族和维族人群，对新参考区间在乌鲁木齐地区的推广应用有重要意义。本研究回顾性分析了在新疆生产建设兵团医院体检中心进行健康体检的汉族和维族成年人数据，验证了WS／T404.1－2012及WS／T404.2－2012行业标准中ALT、AST、ALP、GGT、TP和ALB新参考区间的适用性。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾分析2013年8月至2015年1月在新疆生产建设兵团医院体检中心进行团体健康体检的汉族和维族成年人数据，年龄20～79岁，体检团体来自乌鲁木齐市驻地的机关和企事业单位共28个。按照吕礼应等［4］报道的方法，筛选验证参考区间的参考个体，即按建议的医学决定水平2，剔除有明显异常的体检人群（GGT 按其建议的参考上限两倍取值）［5］。各项目的剔除标准：TP≤60g／L、ALB≤35g／L、ALT≥60U／L、AST（男）≥60U／L、AST（女）≥60U／L、ALP（男）≥150U／L、ALP（女20～＜50岁）≥150U／L、ALP（女50～79岁）≥150 U／L、GGT（男）≥80 U／L 和GGT（女）≥80 U／L。按照剔除标准，筛选出验证参考区间的参考个体例数分别如下。血清TP检测共13 220例，汉族男性7 896例，中位年龄46岁；汉族女性4 969例，中位年龄46岁；维族男性210例，中位年龄43岁；维族女性145例，中位年龄43岁。血清ALB检测共13 221例，汉族男性7 887例，中位年龄46岁；汉族女性4 969例，中位年龄46岁；维族男性217例，中位年龄42岁；维族女性148例，中位年龄43岁。血清ALT 共16 494例，汉族男性8 996例，中位年龄44岁；汉族女性6 903例，中位年龄43岁；维族男性313例，中位年龄40岁；维族女性283例，中位年龄40岁。血清AST 检测共15 247例，汉族男性8 592例，中位年龄45岁；汉族女性6 141 例，中位年龄46 岁；维族男性291例，中位年龄43岁；维族女性223例，中位年龄44岁。血清ALP检测共13 198例，汉族男性7 873例，中位年龄46岁；汉族女性20～＜50岁共2 817例，中位年龄38岁；汉族女性50～79岁2 007例，中位年龄57岁；维族男性225例，中位年龄42岁；维族女性20～＜50岁132例，中位年龄35岁；维族女性50～79岁144例，中位年龄57 岁；血清GGT 共14 398例，汉族男性7 903例，中位年龄45岁；汉族女性6 021例，中位年龄46岁；维族男性267例，中位年龄44岁；维族女性207例，中位年龄43岁。

1.2 仪器与试剂 罗氏Cobas 8000全自动生化分析仪及配套的试剂、校准品。质控品为Liquid Assay Multiqual的level 2和level 3（美国Bio－Rad公司）。

1.3 方法

1.3.1 标本采集与检测 受检者坐位，清晨空腹，采用浙江拱东公司的分离胶真空采血管自肘静脉采集血液5mL，3 500r／min离心10min分离血清。实验室在排除不合格标本（采集

量不足、溶血、脂血等）后，上机检测。所有血清标本在采集后3h内检测完毕。

1.3.2 质量控制 罗氏Cobas 8000全自动生化分析仪每年进行1次校准及1次性能验证，每日进行1个批次的2个水平的室内质量控制。2013年8月至2015年1月，参加卫计委临床检验中心常规生化项目室间质评4次和正确度验证1次，均取得合格成绩。

1.3.3 检测方法与验证判断标准 TP 采用双缩脲法，ALB采用溴甲酚绿法，ALT 采用速率法（不含5＇－磷酸吡哆醛），AST采用速率法（不含5＇－磷酸吡哆醛），ALP 采用速率法（AMP），GGT 采用速率法进行检测。验证的判断标准采用行业标准中5.2.3的规定［2］：如参考个体多于20个，超出参考区间的参考个体不超过10%则通过验证。

1.4 统计学处理 应用Microsoft Excel2007及SPSS17.0软件进行数据记录和处理。采用Kolmogorov－Smimov方法对数据进行正态性检验。本研究的参考区间按照行业标准中A.5.3的要求［2］，采用中间95%区间做参考区间，并按照参考区间行业标准的分组，用非参数方法计算参考个体各验证项目检测结果的百分位数P2.5～P97.5。

2 结 果

2.1 汉族和维族体检参考个体各项目检测结果的参考区间正态性检验显示，汉和维族体检参考个体各项目检测结果均呈偏态分布。体检参考个体各项目检测结果95%区间见表1，各项目统计的参考区间上、下限与卫生行业标准、文献报道基本一致。

表1 本研究汉族和维族体检参考个体参考区间与行业标准及文献报道的比较

2.2 各项目超出参考区间行业标准的体检参考个体例数分布情况 汉族和维族均有一定数量的体检参考个体的结果在参考区间行业标准之外。在AST 项目中，汉族男性、维族男性以及维族女性分别有10.18%、13.73%和11.61%的体检参考个体检测结果在参考区间行业标准之外，但低于行业标准下限值的比例较高，分别为6.98%、10.31%和6.70%。其余项目超出参考区间行业标准的体检参考个体均在10%以内。各项目超出行业标准参考区间情况，见表2（见《国际检验医学杂志》网站主页“论文附件”）。

3 讨 论

因实验室条件及地区人群等差异，各实验室应建立自己的参考区间［6］。但建立参考区间的参考个体选择条件要求高［7］，同时建立参考区间需要投入较多的成本，因此绝大多数实验室采用权威文献或厂家提供的参考区间作为自己实验室的参考区间。长期以来，我国临床应用的检验项目参考区间多基于几十年前欧美人群的研究结果或来自我国局部地区小样本人群的研究结果［8］。新发布的参考区间行业标准由中华医学会检验分会牵头并组织多中心大样本研究、论证后确定，具有广泛的人群代表性［8］，并且新参考区间已经写入新版《全国临床检验操作规程》［9］。然而，中国地域辽阔、人口众多，参考区间行业标准是基于全国六大地区人群所得的参考区间，尚未覆盖少数民族、高海拔地区、具有特殊生活习惯的健康人群等［8］。因此，尚红等［10］建议引用参考区间行业标准的实验室应参照行业标准中相关规定进行参考区间验证。吕礼应等［4］对新发布的临床常规生化项目参考区间行业标准进行了大样本数据的验证，并得到了该标准在验证实验室所在地区具有临床适用性的结论。新疆为多民族聚居区域，维族为新疆人口最多的少数民族。因此，参考区间行业标准在维族人群的适用性验证对于新参考区间能否在新疆地区得到推广非常重要。

本研究采用吕礼应等［4］报道的方法，基于健康体检对象筛选出用于验证参考区间行业标准的参考个体。尽管每个参考个体不一定完全符合参考区间的建立标准［7］，但所选参考个体是按建议的医学决定水平2剔除了有明显异常的人群［5］，基本为表面健康个体，具有一定的代表性。结果显示，按照各项目参考区间行业标准的分组，汉族和维族各项目检测结果中间95%区间的上、下限基本一致，在不同民族之间未显示较大的差异。汉族和维族血清TP、ALB、ALT、AST 和ALP 检测结果中间95%区间与参考区间行业标准也基本一致，但汉族男性、维族男性和维族女性血清GGT 的上限则差异相对较大（见表1），与吕礼应等［4］报道一致。推测可能为体检对象的来源及参考个体的饮食习惯造成GGT 参考上限出现较大差异。本研究的体检对象均来自生活水平较高的机关和企事业单位，可能高脂肪、高蛋白的过多摄入以及习惯性饮酒造成肝脏负荷过重，导致汉族和维族体检对象血清GGT 上限的升高。

尽管汉族和维族各项目检测结果中间95%区间的上、下限与行业标准基本一致，但并不能说明行业标准一定适用于汉族和维族人群。因此，按照行业标准验证的要求，又进一步统计了所有参考个体各验证项目检测结果超出行业标准的百分率。除AST 项目外，其余项目的汉族和维族参考个体检测结果超出参考区间行业标准的比例均在10%以内，符合参考区间验证的判断标准。在AST 项目中，汉族男性、维族男性以及维族女性参考个体检测结果在参考区间行业标准之外的比例略微超出10%，但超出的例数以低于行业标准下限值为主。血清AST 高于参考区间上限对疾病诊断、治疗监测以及预后判断更具有意义，而血清AST 低于参考区间下限的临床意义不大。因此，笔者认为AST 参考区间行业标准基本适用于本研究的汉族男性、维族男性以及维族女性。

总之，新发布的临床常规生化参考区间（WS／T404.1－2012及WS／T404.2－2012）适用于本实验室检测的汉和维吾尔族人群。

［1］陈桂山，杨有业，温冬梅，等.临床生化检验项目生物参考区间适用性验证探讨［J］.中华检验医学杂志，2008，31（2）：170－174.

［2］中华人民共和国卫生部.WS／T404.1－2012 临床常用生化检验项目参考区间第1部分：血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶、γ－谷氨酰基转肽酶［S］.北京：中国标准出版社，2012.

［3］中华人民共和国卫生部.WS／T404.2－2012 中华人民共和国卫生行业标准：临床常用生化检验项目参考区间第2部分：血清总蛋白、白蛋白［S］.北京：中国标准出版社，2012.

［4］吕礼应，杨九华，刘万利，等.常规化学参考区间行业标准（WS／T 404.1－2012、WS／T 404.1－2012）的临床适用性验证［J］.中华检验医学杂志，2014，37（12）：951－953.

［5］叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程［M］.3版.南京：东南大学出版社，2006.

［6］Clinical and Laboratory Standard Institute.C28－A3Defining，establishing，and verifying reference intervals in the clinical chemistry：approved guideline［S］.Wayne，PA，USA：CLSI，2010.

［7］中华人民共和国卫生部.WS／T402－2012 中华人民共和国卫生行业标准：临床实验室检验项目参考区间的制定［S］.北京：中国标准出版社，2012.

［8］尚红，陈文祥，潘柏申，等.建立基于中国人群的临床常用检验项目参考区间［J］.中国卫生标准管理，2013，4（1）：17－21.

［9］尚红，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程［M］.4版.北京：人民卫生出版社，2015.

［10］尚红，陈文祥，潘柏申，等.中国成人常用肝功能和电解质及血细胞分析项目参考区间［J］.中华检验医学杂志，2013，36（5）：393－394.