集落刺激因子对化疗者血液白细胞介素－4和肿瘤坏死因子－α的影响＊

李庆端，林俊山，高凌云，叶少毅

（福建省漳州市中医院，福建漳州363000）

白细胞是机体防御系统的主要组成部分。当病情恶化，炎症介质因子刺激继续增强，机体的应激反应无法达到防御作用时，就会通过加强细胞－体液免疫调控，促进骨髓内细胞成熟，调节骨髓屏障，加速成熟细胞释放，达到提升血液中白细胞的作用。而运用集落刺激因子（CSF）刺激骨髓提升外周血液中白细胞数的机制与上述不同，人为注射CSF 主要是刺激多能造血干细胞和不同发育分化阶段的造血干细胞进行增殖、分化并引导骨髓细胞从G0期进入S增殖期［1］，促进细胞的成熟，改变血髓屏障的微循环，加速细胞由骨髓释放入外周血从而达到提升血液中白细胞的作用。本研究旨在探讨CSF对化疗者血白细胞介素－4（IL－4）和肿瘤坏死因子－α（TNF－α）的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2013年6月至2014年7月于本院住院化疗的肿瘤患者30例作为化疗组，排除发热、细菌感染和近期手术患者，男女不限，年龄43～68岁，使用CSF前白细胞小于或等于4.0×109／L，使用CSF后白细胞大于或等于15×109／L；同期住院明确诊断细菌感染的患者30例作为细菌感染组，外周血液白细胞升高大于或等于15×109／L，细菌培养阳性，临床明确诊断为感染性肺炎患者，男女不限，年龄38～70岁；健康体检者30 例作为健康对照组，外周血液白细胞4.0～10.0×109／L，近期内无发热，无感染体征并排除孕妇、血液系统疾病和服用影响粒细胞数量功能药物的人群，男女不限，年龄25～51岁。

1.2 仪器与试剂 希森美康－1800i血细胞全自动分析仪与配套试剂为日本希森美康公司产品；IL－4和TNF－α酶联检测试剂盒为美国Cloud－Clone Corpg 公司产品；酶标仪RAYTORT6500和全自动洗板机TW960 为美国Rayto 雷杜公司产品。

1.3 方法 用ELISA 方法，分别检测化疗组使用CSF前后、细菌感染组以及健康对照组静脉血浆中IL－4和TNF－α的水平，操作严格按照试剂盒说明书进行。

2 结 果

各组血清IL－4和TNF－α水平的检测结果见表1。从表中可见使用CSF后可使化疗者血中IL－4水平轻度升高，但与使用CSF前比较差异无统计学意义（t＝0.364，P＞0.05），与健康对照组比较差异无统计学意义（t＝0.269，P＞0.05），但与细菌感染组比较明显降低（t＝4.281，P＜0.05）。使用CSF后可使化疗者血中TNF－α水平明显高，与使用CSF前、健康对照组和细菌感染组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。

表1 各组血液中IL－4和TNF－α检测结果（ng／mL，

表1 各组血液中IL－4和TNF－α检测结果（ng／mL，

＊：P＜0.05，分别与细菌感染组、使用CSF 前、健康体检组比较；△：P＜0.05，与细菌感染组比较。

患者类型 n TNF－αIL－4化疗组使用CSF前 30 1.705±1.608 1.148±1.102使用CSF后 30 3.894±1.724＊ 1.257±1.213△细菌感染组 30 1.987±1.421 2.897±1.705健康体检组30 1.739±1.574 1.174±1.172

3 讨 论

正常情况下，外周血液循环中的白细胞升高是一种机体的应激反应。是由于体内存在炎症介质因子（如组织挫伤、感染、中毒等因素产生）刺激下，通过体液免疫系统的调控作用，使得血管张力发生变化，舒张血管内皮细胞，调节微血管的通透性，抑制血小板和白细胞在血管壁上的黏附能力，使得边缘池的白细胞迅速向循环池移动。同时启动活化细胞免疫系统，活化致敏免疫细胞，分泌多种细胞因子发挥细胞免疫调控作用，增强白细胞的变形、趋化、游走、吞噬和消化能力，调节白细胞凋亡时间，延长成熟白细胞存活时间等以提升外周血中白细胞数。肿瘤化疗者使用重组人CSF 提升血液中白细胞数的同时，体内因白细胞的波动导致一系列细胞因子量的变化，尤其是与白细胞调节相关的细胞因子。本研究表明，使用CSF 后化疗者体内的TNF－α的水平明显升高，而IL－4升高的幅度不明显。这与急性创伤导致IL－4明显升高不同［2］，亦与糖皮激素导致IL－4明显升高而TNF－α水平下降不同［3］。细菌感染组IL－4的水平明显升高而TNF－α升高的幅度不明显，这与使用CSF后诱发体内产生的细胞因子种类和量不同。外周血中可见白细胞出现核质发育不一致的现象［4］。TNF－α是由活化的单核－巨噬细胞产生一种糖蛋白包括可溶性sTNF－α 和膜相关性mTNF－α，属于Ⅱ型膜蛋白，以三聚体的形式发挥作用的。TNF－α通过与靶细胞膜上的肿瘤坏死因子受体TNFR 结合实现细胞毒性、抗病毒、免疫调节等生物学功能。同时，TNF－α作为细胞死亡因子之一参与细胞凋亡调节，又作为一种炎症介质，能增加血神经屏障的通透性［5］，刺激中性粒细胞，使其黏附在血管内皮细胞上，产生超氧化物释放溶酶体酶，增加补体受体的表达。本次结果表明CSF 可以激活单核－巨噬细胞产生TNF－α，TNF－α是调节血循环中白细胞的主要因素之一，也是外周粒细胞在光学油镜下可见到异常增粗颗粒原因之一。这与停用CSF后外周循环中白细胞总数急剧下降相符。IL－4是由活化T 淋巴细胞分泌的，促进B淋巴细胞增殖和分泌抗体；诱导单核细胞分泌CSF，增强粒细胞介导的吞噬、杀伤活性和ADCC作用同时抑制单核细胞分泌TNF、IL－1、IL－6。本次研究结果中IL－4升高的幅度不明显，提示CSF对T 淋巴细胞的激活不明显，与细菌感染机制不同，这与机体处于非应激状态有关，为的是稳定内环境，达到负反馈作用，进一步调节骨髓细胞的分裂和释放速度。

［1］石小玲.集落刺激因子对造血的调控作用及其检测的临床意义［J］.实用医技杂志，2007，14（15）：2091－2092.

［2］白黎智，邢嵘，路小光，等.创伤患者血浆肿瘤坏死因子－α、白细胞介素－4动态变化及其意义［J］.中国实用医药，2007，2（15）：22－24.

［3］刘江红，李小松，叶静.糖皮质激素对多发性硬化患者血清肿瘤坏死因子－α和白介素－4水平的影响［J］.临床神经病学杂志，2010，23（2）：105－106.

［4］兰海霞，博晓真，新燕，等.粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子的研究进展［J］.临床儿科杂志，2005，23（12）：895－896.

［5］Ramkalawan H，Wang YZ，Hurbungs A，et al.Pioglitazone，PPARγagonist，attenuates experimental autoimmune neuritis［J］.Inflammation，2012，35（4）：1338－1347.