慢性应激对大鼠胸腺指数和血清CORT、胸腺肽浓度的影响

崔春红 等

[摘要] 目的 研究慢性应激对大鼠胸腺指数和血清糖皮质激素（CORT）和胸腺肽浓度的影响。方法 大鼠随机分为对照组和应激组。应激组大鼠给予复合应激，即禁水12 h、禁食12 h、束缚6 h、昼夜颠倒、强迫游泳15 min、潮湿垫料24 h和45°浸水5 min7种应激刺激，每天随机一次，7 d为一个周期，每种刺激应用一次，共14 d。应激结束后取材，计算胸腺指数，酶联免疫吸附测定法检测血清CORT和胸腺肽的含量。 结果 应激组大鼠胸腺指数为（1.08±0.13）mg/g，与对照组[（1.45±0.11）mg/g]比较显著性减低，有统计学意义（P<0.05）；应激组大鼠血清CORT浓度为（87.91±2.45） pg/mL，与对照组[（77.28±1.56）pg/mL]比较明显增高，有统计学意义；应激组大鼠血清胸腺肽的含量为（0.93±0.03）×103 pg/mL，与对照组[（1.40±0.06）×103 pg/mL]比较显著性降低，有统计学意义（P<0.05）。结论 慢性应激会降低大鼠胸腺指数，抑制胸腺肽的分泌功能。

[关键词] 慢性应激；胸腺；ACTH；胸腺肽

[中图分类号] R4 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2015）09（a）-0096-02

Effects of Chronic Stress on Thymus Index and Concentration of Serum CORT and Thymosin in Rats

CUIChun-hong1， SUN Zhao-xia2， LI Wei1， JIANG He1

1. Department of Histology and Embryology， Shandong Wanjie Medical School， Zibo， Shandong Province， 255213 China； 2. Department of Anatomy， Shandong Wanjie Medical School， Zibo， Shandong Province， 255213 China

[Abstract] Objective To To study the influence of acute stress on thymus index and concentration of serum CORT and thymosin in rats. Methods Rats were randomly divided into control group and stress group. Stress group rats were given compound stress， including absolute diet 12 h， water deprivation 12 h， being bounded 6 h， day and night inversion， forced swimming 15 min， damp bedding 24 h， 45° water immersion， which were randomly given once a day with 7 days for a cycle， and each stimulus was applied once for a total of 14 days. Then rats were killed and serum CORT and thymosin were extracted. We calculated the thymus index and determined the concentration of serum CORT and thymopeptide using enzyme-linked immunosorbent assay. Results The thymus index was （1.08±0.13）mg/g in the stress group ， lower than （1.45±0.11）mg/g in the control group， and the difference was statistically significant， P<0.05. The CORT levels was （87.91±2.45） pg/ml in the stress group， higher than （77.28±1.56）pg/ml in the control group， and the difference was statistically significant， P<0.05； the concentration of serum thymosin was （0.93±0.03）×103 pg/ml in the stress group， lower than（1.40±0.06）×103pg/ml in the control group， and the difference was statistically significant， P<0.05. Conclusion Chronic stress can lower the thymus index and inhibit the secretion of the thymosin in rats.

[Key words] Chronic Stress； Thymus； ACTH； Thymosin

应激是个体面临或察觉到环境变化对机体有威胁或挑战时所做出的适应和应对过程。长时间或过强的应激可引起神经、内分泌失调，免疫功能障碍[1]，而机体对应激的反应主要表现在交感-肾上腺髓质轴（sympathetic-adrenal medullary，SAM）高度兴奋和下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴（hypothalamic-pituitary-adrenal axis，HPA）反应，引起神经内分泌紊乱[2]。胸腺是机体重要的中枢免疫器官，是T淋巴细胞发育、成熟的场所，对机体外周淋巴器官的发育和免疫应答的发生起着重要的调节作用[3]。应激反应可导致胸腺的退化萎缩[4]，并伴有免疫功能受损。目前，对应激反应中血清胸腺肽浓度的研究较少。本实验试图通过慢性应激探讨应激对大鼠胸腺指数和血清CORT以及胸腺肽浓度的影响，为进一步探讨应激影响机体免疫功能的机制与途径奠定基础。测定胸腺指数意在了解应激对大鼠胸腺体积、重量的影响；检测应激后血清胸腺肽浓度，旨在了解应激对胸腺肽的影响，为进一步探讨胸腺肽在应激影响胸腺结构过程中的作用及其机制提供理论依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

研究于2014年6月—2014年8月间以12只Wistar雄性大鼠（山东大学动物实验中心提供）为研究对象，大鼠体重180±10g，6只一笼合养（笼子尺寸为约为500mm×400mm×300mm）。在实验室中在环境适应5 d，昼/夜周期为12h/12h（光照时间为08：00～20：00），室内温度为（23±2）℃，湿度为50%左右。适应期内所有动物自由摄食和饮水。 适应期后对大鼠进行分组，采用随机数表法选取6只作为正常对照组，不作任何实验处理；另6只作为应激组。

1.2 方法

应激组大鼠给予复合应激，即禁水12 h、禁食12 h、束缚6 h、昼夜颠倒、强迫游泳15 min、潮湿垫料24 h和45°浸水5 min7种应激刺激，每天随机一次，7 d为一个周期，每种刺激应用一次，共1 d。应激结束2%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，后剖开腹腔，自腹主动脉抽取血液5 mL，室温静置30 min后3500r·min-1离心取上层血清，-20℃保存；剖开胸腔取出胸腺，清除表面附着的脂肪等其他组织，用滤纸吸干净其表面的血液，后用电子天平称量其重量。

1.3 观察指标

1.3.1 胸腺指数 胸腺指数=胸腺重量/体重，胸腺重以mg为单位，体重以g为单位。

1.3.2 血清CORT和胸腺肽的浓度 酶联免疫吸附测定法检测血清CORT和胸腺肽的含量。

1.4 统计方法

采用SPSS 19.0统计软件对数据进行统计学处理，计量资料数据以均数±标准差（x±s）表示，采用t检验，P<0.05，差异有统计学意义。

2 结果

2.1 大鼠胸腺指数

应激后大鼠胸腺指数与对照组比较有统计学意义（P<0.05），见表1。

表1 慢性应激对大鼠胸腺指数的影响（x±s，mg/g）

注：与对照组比较*P<0.05。

2.2 血清CORT和血清胸腺肽的浓度

应激后大鼠血清CORT的浓度明显增高，与对照组比较有统计学意义（P<0.05）；胸腺肽的浓度比较对照组显著性减低，有统计学意义（P<0.05），见表2。

表2 慢性应激对大鼠血清CORT和胸腺肽的浓度的影响（x±s，pg/mL）

注：与对照组比较*P<0.05。

3 讨论

胸腺是机体主要的免疫器官，为T淋巴细胞的成熟和选择提供微环境，在免疫功能的执行与维持中发挥重要的作用。人类的胸腺在出生时已发育完全，以后随着年龄的增长而逐渐变大，致青春期达到高峰，青春期过后胸腺逐渐退化萎缩，受性激素的影响[5-6]，故而实验中选择青春期雄性大鼠。

各种应激均可导致胸腺退化，这种退化是在机体应激时，通过下丘脑-垂体-肾上腺轴的作用而发生的[7]。这与本实验的研究结果相似，大鼠经复合应激2周后血清CORT的浓度[（87.91±2.45） pg/mL]明显升高，与对照组[（77.28±1.56）pg/mL]比较有统计学意义。

胸腺退化萎缩意味着在细胞免疫功能中起主导作用的T淋巴细胞的数目减少，从而导致细胞免疫功能下降甚至抑制。胸腺指数是反映机体胸腺免疫功能的重要指标之一，其数值高低的变化可以反映机体免疫功能的状态[8-9]。本实验中，我们观察到大鼠应激2周后，胸腺指数[（1.08±0.13）mg/g]出现显著性减低，与对照组[（1.45±0.11）mg/g]比较有统计学意义，这说明应激确实引起了胸腺的退化萎缩，与相关研究的结果是相似的[10]。

研究表明，胸腺激素在胸腺细胞的发育和成熟过程中发挥重要的作用[11-12]，胸腺肽可以增加T细胞的产生、刺激T细胞分化与成熟、减少T细胞凋亡以及产生T细胞介导抗体等[13]。本实验中，应激大鼠血清胸腺肽浓度[（0.93±0.03）×103 pg/mL]较对照组[（1.40±0.06）×103pg/mL]明显下降，与研究结果相吻合。应激致使胸腺萎缩退化的过程中，胸腺肽可能也起到重要的作用。但血清胸腺肽浓度降低的机制以及其与胸腺组织结构的破坏间是否有关系尚不明确，需进一步研究。

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（收稿日期：2015-06-03）