枯草芽孢杆菌水分散粒剂防治辣椒疫病的效果及其对辣椒的促生作用

黄大野　姚经武　朱志刚等

摘要：通过盆栽试验，研究枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）水分散粒剂防治辣椒疫病的效果及其对辣椒的促生作用。结果表明，1012 CFU/g枯草芽孢杆菌水分散粒剂对辣椒疫病具有良好的防效并具有一定的促生作用。在浓度为4 000 μg/mL、2 000 μg/mL和1 000 μg/mL时，对辣椒疫病的防效分别为86.67%、53.33%和26.67%。在浓度为2 000 μg/mL时，辣椒的株高、根长和鲜重分别较对照提高53.16%、54.75%和61.48%。

关键词：枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）；水分散粒剂；辣椒疫病；促生作用

中图分类号：S436.611 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2015）19-4737-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.19.020

Abstract： Through pot experiment， controlling effect on pepper Phytophthora blight and plant growth-promoting effect were researched. The results showed that 1012 CFU/g Bacillus subtilis water dispersible granule had good controlling effect on pepper Phytophthora blight and plant growth-promoting effect. The prevention effect of 1012 CFU/g Bacillus subtilis water dispersible granule on pepper Phytophthora blight with the concentration of 4 000 μg/mL， 2 000 μg/mL and 1 000 μg/mL was 86.67%， 53.33%and 26.67%， respectively. The shoot length， root length， fresh weight increased 53.16%，54.75% and 61.48%， respectively.

Key words： Bacillus subtilis； water dispersible granulehas； pepper Phytophthora blight； growth-promoting effect

辣椒疫病是由卵菌纲辣椒疫霉菌（Phytophthora capsici）引起的一种辣椒毁灭性的土传病害，是引起辣椒减产的主要原因[1-3]。尽管可以通过轮作和适当的排水在一定程度上控制病害的发生，但目前生产上还是缺乏有效的防治方法。其卵孢子可以在干旱和低温等极端环境下生存很多年，许多化学杀菌剂已经用于防治辣椒疫病，但是大量的使用也产生了环境污染和抗药性等一系列问题[4，5]。因此，急需探索安全有效的方法用于防治辣椒疫病。

生物防治是一种重要的防治土传病害的替代方法[6]，一些生防细菌如Pseudomonas sp. 和Bacillus sp.已用于防治疫霉属（Phytophthora）真菌引起的病害[7-9]。1012 CFU/g枯草芽孢杆菌水分散粒剂是由湖北省生物农药工程研究中心自主研发的枯草芽孢杆菌新剂型，前期的研究表明，其对半知菌尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）引起的西瓜枯萎病和立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）引起的黄瓜立枯病具有良好的防治效果[10，11]。本试验旨在研究其对卵菌纲病害辣椒疫病的防治效果，为进一步在生产上的推广和使用奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

病原菌：立枯丝核菌，由湖北省生物农药工程研究中心分离保存。

供试药剂：1012 CFU/g枯草芽孢杆菌水分散粒剂，由湖北省生物农药工程研究中心研制；枯草芽孢杆菌可湿性粉剂Serenade，由美国AgraQuest公司提供；50%烯酰吗啉可湿性粉剂，由广东省东莞市瑞德丰生物科技有限公司生产。

供试作物：辣椒，品种为中椒106。

1.2 方法

1.2.1 枯草芽孢杆菌水分散粒剂防治辣椒疫病 辣椒种子用1%次氯酸钠浸泡30 s消毒，取出后用无菌水反复冲洗4次，随后将辣椒种子放于垫有纱布的培养皿中，28 ℃催芽48 h。将催芽后种子播于穴盘中，温室常规管理，培养至4～5叶期备用。

将辣椒疫霉菌从斜面活化转到燕麦培养基进行活化，随后转入燕麦平板28 ℃光暗交替培养10 d，随后刷取孢子，放入4 ℃冰箱30 min后转入25 ℃温箱保存，需要时在显微镜下利用血球计数板计数，将游动孢子数调节为5×105备用。

将培养4～5叶期的辣椒苗分别用4 000、2 000和1 000 μg/mL枯草芽孢杆菌水分散粒剂灌根，对照药剂用1 000 μg/mL 50%烯酰吗啉可湿性粉剂和 4 000 μg/mL Serenade灌根，以灌去离子水处理作为空白对照。每个处理3次重复，每个重复18株苗。24 h后用制备好的辣椒疫霉菌孢子悬浮液灌根，每株苗灌2 mL菌悬液。10 d后统计各处理病情指数并计算防效。病情分级[9]及防效计算方法如下：

0级，没有明显症状；1级，叶子稍微变黄，茎部有少许褐色病变；2级，植株30%～50%发病；3级，植株50%～70%发病；4级，植株70%～90%发病；5级，植株死亡。

病情指数=∑（各级植株数×级别）/（调查总株数×最高级别）×100%防治效果=（对照病情指数-处理病情指数）/对照病情指数×100%

1.2.2 枯草芽孢杆菌水分散粒剂对辣椒的促生作用 按照1.2.1处理种子，播种于穴盘中，随后进行灌根处理。药液浓度为2 000 μg/mL，空白对照灌去离子水，每隔7 d灌根1次，共灌根2次，20 d后统计辣椒的株高、根长和鲜重。

2 结果与分析

盆栽试验结果表明，枯草芽孢杆菌水分散粒剂灌根对辣椒疫病具有良好的防治效果（表1，图1），在4 000 μg/mL条件下灌根对辣椒疫病的防效达到86.67%，2 000 μg/mL时防效也达到50%以上，防效高于同类枯草芽孢杆菌Serenade，低于化学杀菌剂烯酰吗啉。

枯草芽孢杆菌水分散粒剂对辣椒也具有明显的促生作用（表2），2 000 μg/mL灌根处理，株高、根长和鲜重分别提高53.16%、54.75%和61.48%。与对照药剂枯草芽孢杆菌制剂Serenade的促生效果相当。

3 小结与讨论

由于辣椒疫病危害严重，生产上防治药剂较少，并且一些杀菌剂如甲霜灵等已经出现了严重的抗药性[12]，因此寻找新的替代药剂和防治方法尤为重要。前期研究表明，枯草芽孢杆菌水分散粒剂对半知菌引起的西瓜枯萎病和黄瓜立枯病具有良好的防治效果。本研究表明，1012 CFU/g 枯草芽孢杆菌水分散粒剂对卵菌纲的辣椒疫病同样具有良好的防治效果与促生作用。其高剂量4 000 μg/mL具有理想的防治效果，并且有明显的促生作用，好于国外的同类枯草芽孢杆菌产品Serenade。其田间防治效果与增产作用、化学杀菌剂交替使用和轮换使用以降低杀菌剂抗性压力和增效作用等方面还需要进一步的研究，为该产品的田间推广和应用奠定基础。

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