甘草甘遂不同配伍比例对大鼠肾功能的影响

孙逸雨，张 腾，杨 霄，佟继铭，张树峰△

（1.河北联合大学中医学院，河北唐山 063000；2.承德医学院）

甘草甘遂不同配伍比例对大鼠肾功能的影响

孙逸雨1，张 腾2，杨 霄2，佟继铭2，张树峰2△

（1.河北联合大学中医学院，河北唐山 063000；2.承德医学院）

目的：观察长期灌胃甘草甘遂不同配伍比例水煎剂对大鼠肾功能的影响。方法：50只SD大鼠随机分为正常对照组，甘遂组，甘遂配伍甘草1：0.25组、1：0.5组和1：1组，每组10只大鼠，各组大鼠均连续灌胃给药28天。检测大鼠血肌酐（Cr）和尿素氮（BUN）的含量，HE染色观察肾脏形态结构的变化。结果：各用药组大鼠血Cr和BUN的含量明显高于正常对照组大鼠，以甘遂组最为显著（P＜0.01，P＜0.05）；甘遂甘草配伍组，随甘草比例的增加，大鼠血Cr和BUN的含量逐渐降低（P＜0.01，P＜0.05）。各用药组大鼠肾脏形态结构均发生不同程度的病理变化，以甘遂组最为严重；甘遂甘草配伍组，随甘草比例的增加，肾脏的病理变化逐渐减轻。结论：长期使用甘遂对大鼠肾脏具有明显的毒性作用，甘草与甘遂配伍具有减轻甘遂对肾脏毒性作用的功效，且与甘草的比例有关。

甘遂；甘草；肾脏；肌酐；尿素氮

1 材料与方法

1.1 实验药品和仪器 甘草、炙甘遂（河北安国振宇药业，批号130101、130201），均经承德医学院中药研究所佟继铭教授鉴定，分别为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis的干燥根茎和醋制后大戟科植物甘遂Euphorbia kansui T.N.Liou ex S.B.Ho的干燥块根。ExcelsiorTMES组织自动脱水机，美国Thermo Scientific公司；RM2125型轮转石蜡切片机，德国Leica公司；TK218恒温摊片烤片机，湖北泰维医疗科技有限责任公司；日立7180全自动生化分析仪，日本株式会社日立高新技术。

1.2 甘草配伍甘遂水煎剂的制备 按配伍的比例取甘遂、甘草药材（甘遂：甘草分别为1：0、1：0.25、1：0.5、1：1），8倍量水浸泡60min后煎煮2次，每次30min，合并水煎液，旋转蒸发浓缩至所需浓度。①1：0配伍组：甘遂0.4g/ml；②1：0.25配伍组：甘遂0.4g/ml+甘草0.1g/ ml；③1：0.5配伍组：甘遂0.4g/ml+甘草0.2g/ml；④1：1配伍组：甘遂0.4g/ml+甘草0.4g/ml。

1.3 实验动物及分组 SD大鼠50只，雌雄各半，体重180-200g，购自北京华阜康生物科技股份有限公司，合格证号SCXK（京）2009-0004。大鼠随机分为甘遂组、甘遂配伍甘草1：0.25组、甘遂配伍甘草1：0.5组、甘遂配伍甘草1：1组、正常对照组，每组10只，连续灌胃给药28d。

1.4 取材及指标检测

1.4.1 血液指标：各组大鼠末次给药后第2d，4%水合氯醛腹腔注射麻醉，经腹主动脉取血约4ml，4000r/min离心12min后取血清，采用日立7180全自动生化分析仪检测血肌酐（Cr）和尿素氮（BUN）的含量。

1.4.2 观察肾脏形态结构：大鼠取血后处死，取双侧肾脏，10%多聚甲醛固定24h后常规石蜡包埋，切片（片厚4μm），行常规HE染色。

1.5 统计分析 应用SPSS 17.0统计软件进行统计分析，行方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组大鼠血Cr和BUN的含量 与正常对照组比较，各用药组大鼠血Cr和BUN的含量均明显升高（P＜0.01，P＜0.05）。与甘遂组比较，甘遂甘草配伍组大鼠血Cr和BUN的含量均明显降低（P＜0.01，P＜0.05）；并且，随甘草比例的增加，大鼠血Cr和BUN的含量逐渐降低（P ＜0.01，P＜0.05）。见附表：

附表 各组大鼠血Cr和BUN的含量（±s，n=10）

附表 各组大鼠血Cr和BUN的含量（±s，n=10）

与正常对照组比较：aP＜0.05，bP＜0.01；与甘遂组相比：cP ＜0.05，dP＜0.01；与甘遂甘草1：0.25组相比：eP＜0.05，fP＜0.01；与甘遂甘草1：0.5组相比：gP＜0.05

组别 Cr（μmol/L） BUN（mmol/L）正常对照组 36.19±4.96 7.36±1.01甘遂组 66.79±7.30a18.51±1.94a甘遂甘草1：0.25组 58.85±8.51bc16.48±1.93bc甘草甘遂1：0.5组 50.75±8.19bde12.62±2.37bdf甘遂甘草1：1组 43.05±6.79bdfg10.52±1.77bdfg

2.2 各组大鼠肾脏形态结构的变化

2.2.1 正常对照组：大鼠肾脏形态结构正常，皮质、髓质分界清楚，肾小球未见萎缩、纤维化和肥大，肾小管管腔内未见细胞管型及蛋白管型。

2.2.2 各给药组：大鼠肾脏形态结构发生不同程度的病理变化，以甘遂组最为严重，甘遂甘草配伍组，随甘草比例的增加，肾脏的病理变化逐渐减轻。①甘遂组：肾小球毛细血管扩张淤血，近曲小管上皮细胞轻中度水肿，部分肾小管炎性细胞浸润、坏死，血管壁增厚硬化，部分肾小管内有蛋白管型。②甘遂甘草1：0.25组：肾小球毛细血管扩张淤血，近曲小管上皮细胞轻中度水肿，少数肾小管炎性细胞浸润、坏死，部分肾小管内有蛋白管型形成。③甘遂甘草1：0.5组：部分肾小球毛细血管扩张淤血，近曲小管上皮细胞轻中度水肿，偶见肾小管炎性细胞浸润、坏死，局灶性肾小管坏死，少数肾小管内有蛋白管型形成。④甘遂甘草1：1组：部分肾小球毛细血管轻度扩张淤血，近曲小管上皮细胞轻度水肿，偶见肾小管坏死，偶见肾小管内有蛋白管型形成。

3 讨论

血Cr和BUN是临床常用评价肾功能的重要指标。Cr是肌肉在人体内代谢的产物，包括外源性和内源性两类，在外源性肌酐摄入量稳定的情况下，血Cr含量主要由肾小球的滤过能力决定，如果血Cr的含量超出正常值，多表明肾小球滤过功能已经受损。BUN是人体内蛋白质代谢的主要终末产物，主要通过肾小球的滤过随尿排出体外，当肾小球滤过功能受损时，会导致血BUN含量的升高。同时检测血Cr和BUN含量更具有临床意义，如二者同时升高，表明肾脏功能已严重受损［7］。本研究结果显示，各用药组大鼠血Cr和BUN的含量均明显高于正常对照组，提示单纯使用甘遂和甘遂甘草配伍对肾功能均有不同程度的损伤，其中以甘遂组最为显著；甘遂甘草各配伍组，随甘草比例的增加血Cr和BUN的含量逐渐降低。肾脏形态结构观察的结果亦证实了这一点，单用甘遂组大鼠肾脏的病理变化最为严重，甘遂甘草配伍组随甘草比例的增加，肾脏的病理变化逐渐减轻。因此表明，长期使用甘遂对大鼠肾脏具有明显的毒性作用，甘草与甘遂配伍具有减轻甘遂对肾脏毒性作用的功效，且与甘草的比例有关。

本研究结果虽有驳于中药“十八反”反药配伍使用增毒的理论，为了揭示其中的作用机制，还应从反药配伍的物质基础出发，结合其它影响因素（如特定的实验条件、机体药物代谢过程等）进行深入研究。

［1］唐于平，吴起成，丁安伟，等.对中药“十八反”“、十九畏”的现代认识［J］.中国实验方剂学杂志，2009，15（6）：79-81.

［2］周宗剑，蒋明.从临床角度探讨甘遂甘草同用的安全性问题［J］.云南中医中药杂志，2008，29（1）：24-25.

［3］黄文权，程相岭，肖鸿，等.甘草甘遂伍用对大鼠心肝肾功能及形态的影响［J］.第三军医大学学报，2012，23（12）：1439-1441.

［4］邓毅，宁艳梅.甘草甘遂配伍对小鼠血清中GPT、GOT、LDH影响的实验研究［J］.中医研究，2007，20（3）：15-16.

［5］李燕，孙杰，孙立立，等.中药甘遂的研究进展［J］.食品与药物，2010，12（9）：363-365.

［6］宗倩倩.大枣配伍大戟类药材甘遂的毒性研究［D］.南京：南京中医药大学，2009.

［7］朱旭明，郁昊达，张健，等.血肌酐、尿素氮及白细胞计数在原发性高血压中的意义［J］.国际检验医学杂志，2011，32（15）：1749-1750.

EFFECTS OF EUPHORBIA KANSUI LICORICE IN DIFFERENT COMPATIBILITY PROPORTION ON RATS’ RENAL FUNCTION

SUN Yi-yu， ZHANG Teng， YANG Xiao， et al

(College of Chinese Traditional Medicine, Hebei United University, Hebei Tangshan 063000, China)

Objective：To observe the effects of long-term gastric perfusion with water decoction of euphorbia kansui licorice in different compatibility proportion on rats' renal function.Methods：50 SD rats were randomly divided into 5 groups with 10 rats in each group： normal control group， euphorbia kansui group， euphorbia kansui licorice 1：0.25， 1：0.5 and 1：1 groups. The rats were all lavaged with corresponding drugs for 28 days. The creatinine （Cr） and urea nitrogen （BUN） content in blood of rats were respectively detected. HE stain was used to observe the pathological changes of kidney.Results： The Cr and BUN content in blood of rats in each drug group were all obviously higher than that of rats in normal control group， especially the euphorbia kansui group （P＜0.01， P＜0.05）. For compatibility groups， the Cr and BUN content in blood gradually decreased with increasing of the proportion of licorice （P＜0.01， P＜0.05）. The morphology of kidney of rats in each drug group appeared pathological changes in different degree， especially the euphorbia kansui group. For compatibility groups， the pathological changes of kidney gradually reduced with increasing of the proportion of licorice. Conclusions： It has obvious toxic effects on kidney after long-term using of euphorbia kansui. Compatibility of licorice and euphorbia kansui can reduce the toxic effects of euphorbia kansui on kidney； moreover， this efficiency is associated with the proportion of licorice.

Euphorbia kansui； Licorice； Kidney； Creatinine； Urea nitrogen

R965

A

1004-6879（2015）01-0008-03

根，性寒、味苦、有毒，归肾、肺、大肠经，具有峻下逐水之功，多用于治疗各类水饮内停疾患［5］。现代研究表明，甘遂具有明显的抗肿瘤、抗病毒等作用，毒性作用包括肝肾损害、皮肤和胃肠道刺激等［6］。本研究以甘遂对肾脏的毒性作用为出发点，探讨甘草和甘遂不同配伍比例对肾脏的影响，以期为临床合理用药提供实验依据。

2014-08-09）

甘遂反甘草属中药“十八反”重要内容之一，但自古至今不乏两药同用之方［1-2］。两药配伍后是否增毒为历代学者研究的焦点［3-4］。甘遂属大戟科植物甘遂的干燥快