东莞市横沥镇猪流行性乙型脑炎血清学调查

黄江志，叶惠仪，黄育浩，张险朋

（1.广东省东莞市横沥镇农业技术服务中心，广东 东莞 523460；2.东莞市动物疫病预防控制中心，广东 东莞 523086）

东莞市横沥镇猪流行性乙型脑炎血清学调查

黄江志1，叶惠仪1，黄育浩2，张险朋2

（1.广东省东莞市横沥镇农业技术服务中心，广东 东莞 523460；2.东莞市动物疫病预防控制中心，广东 东莞 523086）

为了解东莞市横沥镇猪流行性乙型脑炎流行情况，在2013～2015年，采用酶联免疫吸附方法，对采集的432份猪血清进行了流行性猪乙型脑炎抗体检测。结果为非免疫场100份血清，抗体阳性15份，抗体阳性率为15.00%；免疫场332份，抗体阳性250份，抗体阳性率为75.30%。结果表明，东莞市横沥镇猪场存在流行性乙型脑炎的感染，对于流行性乙型脑炎的防控需采取综合防控措施。

流行性乙型脑炎；猪；血清学调查；ELISA

流行性乙型脑炎，简称乙脑，是由感染嗜神经性的乙型脑炎病毒引起的，由节肢动物传播的中枢神经系统急性传染病，广泛流行于亚洲和太平洋地区，有严格的季节性，蚊虫孳生的7～9月是发病的高峰期，热带地区可常年发病。病毒在蚊-猪-蚊等动物间循环，大多数动物形成隐性感染，可致孕猪出现流产、公猪发生睾丸炎。本病还可引起人类的感染，主要侵袭15岁以下的学龄儿童，临床上以高热、意识障碍、惊厥、呼吸衰竭及脑膜刺激征为特征。人毒蚊叮咬后，多出现隐性感染,乙脑病死率达30%左右，且可致50%的患者留下不同程度的神经系统和精神方面的后遗症。根据全国法定传染病疫情情况报告，2014年我国流行性乙脑的发病数为859例，死亡29例。流行性乙型脑炎在公共卫生中具有重要意义，为了了解东莞市横沥镇猪乙型脑炎的流行情况，在养殖场采集了432份猪血清，进行ELISA检测，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 被检血清

2013～2015年，由东莞市横沥镇畜牧兽医站采横沥镇14个猪养殖场，共412份猪血清；其中非免疫场5个，100份血清；免疫场9个采集血清332份；采集猪的日龄在100日龄至180日龄。采集送检血清-20℃备用。

1.2 试剂和仪器

猪乙型脑炎抗体ELISA试剂盒：购自武汉科前生物技术有限公司。SUNRISE酶标仪购自TECAN公司。

1.3 间接ELISA方法

取JEV抗原包被板，分别将按1：40和1：4体积稀释好的待检血清和对照血清加入到抗原包被板孔中，置37℃温育30 min。弃去板孔中液体，用洗涤液洗涤5次，每孔再加入按1：20000的体积稀释好的酶标通用二抗，置37℃温育30min。洗涤5次后每孔加底物液A、底物液B各1滴（约50μL），室温避光显色10min，每孔加入终止液1滴（约50μL），10 min内用620～650 nm波长测定各孔D值。若样品S/P（检测样本的D值/阳性对照D值平均值）值≥0.21，判为JEV抗体阳性；若样品S/P值＜0.21，判为JEV抗体阴性。

2 结果

2.1 非免疫场乙型脑炎抗体检测结果

共检测非免疫养殖场5个，100份血清，抗体阳性15份，抗体阳性率为15.00%，其中2个养殖场检出流行性乙型脑炎抗体阳性，阳性场比例为40.00%，详细结果见表1。

表1 东莞市横沥镇非免疫场乙型脑炎抗体检测结果

2.2 免疫场乙型脑炎抗体检测结果

共检测免疫养殖场9个，332份血清，抗体阳性250份，抗体阳性率为75.30%，免疫场的流行性乙型脑炎抗体阳性率在40%至100%，详细结果见表2。

表2 东莞市横沥镇免疫场乙型脑炎抗体检测结果

3 讨论

3.1 猪流行性乙型脑炎，在猪群分布和和传播比较广泛，蚊虫是流行性乙型脑炎病毒的传播媒介，所以流行性乙型脑炎的流行与季节有明显的关系，夏秋季节是流行性乙型脑炎的流行高峰期。根据血清学调查的结果，东莞市横沥镇非免疫场抗体阳性率为15.00%，阳性场的比例为40%。2008年靳兴军等对北京地区猪流行乙型脑炎抗体调查结果为非免猪群的抗体阳性率为7.56%，免疫猪群的抗体阳性率为34.9%。2008年杨培昌等对云南楚雄州猪流行乙型脑炎抗体调查结果为48.21%。2009年至2011年黄育浩等对东莞市内猪养殖场采集猪血清3918份,进行流行性乙型脑炎抗体检测,抗体阳性率为56.58%。东莞市横沥镇猪流行性乙型脑炎抗体阳性率虽与其他地区的阳性率有所差异，但结果都表明，猪群中存在猪流行性性乙型脑炎病毒的感染。

3.2 目前，在流行性乙型脑炎抗体的血清学调查中，常采用的试验方法有血凝与血凝抑制试验方法、ELISA方法、乳胶凝集试验方法、中和试验方法等，但常规的血凝抑制试验、和中和试验中存在费时费力的情况，对试验的环境和人员的要求也比较高，乳胶凝集试验则存在特异性和敏感性不高的情况。ELISA试验方法具有较高的特异性和敏感性，检测速度快，操作简便适合基层的兽医实验室进行大规模的血清学监测。此次血清学调查采用武汉科前的ELISA试剂盒，对9个免疫场的流行乙型脑炎抗体检测结果为抗体阳性率75.30%，结果表明东莞市横沥镇猪流行性乙型脑炎疫苗免疫效果总体来说较好，但也存在免疫失败的个别案例。

3.3 由于我国流行性乙型脑炎发病数居高不下，对儿童造成的生命威胁和健康危害是十分严重的。对流行性乙型脑炎的预防措施有防蚊和灭蚊，控制宿主动物（猪）和易感人群的预防接种，防蚊和灭蚊是控制本病的流行的重要环节，也是最有效最经济的预防措施，特别是针对库蚊的措施。对于主要的传染源家畜，尤其是未经过流行季节的仔猪，采用疫苗免疫，以减少猪群的病毒血症，从而控制人群中的流行性乙型脑炎的流行。另外，加强对动物流行性乙型脑炎的监测，及时掌握动物中流行性乙型脑炎的流行情况，为防控流行性乙型脑炎提供数据。

[1]俞东征.人畜共患病传染病学[M].北京：科学出版社，2009.

[2]靳兴军，等.北京市猪乙型脑炎血清流行病学调查[J].中国兽医杂志，2008，44（8）:51-52.

[3]杨培昌，等.云南省楚雄州猪乙型脑炎流行情况血清学调查[J].动物医学进展，2008，29（5）:109-112.

[4]黄育浩，等.广东省东莞市猪乙型脑炎流行病学调查[J].动物医学进展，2012，33（7）:126-128.

10．3969/J.ISSN．1671-6027．2015．08.022