SMART技术构建的辣椒疫霉菌与辣椒互作AD-cDNA文库

周志国 明月梅

（廊坊师范学院生命科学学院，河北廊坊 065000）

SMART技术构建的辣椒疫霉菌与辣椒互作AD-cDNA文库

周志国 明月梅

（廊坊师范学院生命科学学院，河北廊坊 065000）

为了分离和克隆辣椒中疫霉菌诱导基因，以接种辣椒疫霉菌的叶片为材料，利用SMART技术构建辣椒疫霉菌与辣椒互作的双杂交cDNA文库。结果表明：该文库容量为3.6×106cfu，重组率88%左右，插入片段集中在300～2 000 bp之间，平均长度约为800 bp，表明获得的文库质量较高，该文库将为分子育种提供重要的基因资源。

辣椒疫霉菌；SMART技术；双杂交cDNA文库

辣椒是我国重要的蔬菜和加工原料作物，产值居蔬菜之首（谢思惠 等，2011）。在辣椒生产过程中，病害种类多，发生频繁，其中疫病（Phytophthora blight）是重要的真菌性土传病害，发病快，蔓延迅速，病程期短，防治困难（杜晓华 等，2005），常造成辣椒大面积减产甚至绝收，在我国吉林、辽宁、青海、河北、北京、云南、甘肃、陕西、上海、浙江、湖南、江苏、江西等地均有发生（周启明 等，1984；关天舒 等，1995；邹学校 等，2004）。研究人员已对辣椒疫霉菌（Phytophthora capsici）的生理与致病机理、辣椒的疫病病理、栽培方式、化学防治、生物防治等方面进行了相关研究（田林 等，1989；朱英波和李超，2002；李智军 等，2007；刘学敏，2007；江厚春 等，2011），但抗病育种作为防治辣椒疫病的重要方法，其抗病资源相对缺乏（程芳，2007；史云国，2007；徐刘平和郭坚华，2007）。

cDNA文库是现代研究功能基因组学的最有效手段之一，可直接从cDNA文库中筛选所需目的基因，并用于基因的表达分析（Colin et al.，1999；蔡宁波 等，2007；朱利军 等，2009）。利用SMART技术（Switching Mechanism At 5′end of RNA Transcript）构建全长cDNA文库，可从中发现候选基因，从而在生产上实现转基因技术的广泛应用（张冲 等，2013）。……