草鱼原肌球蛋白基因的克隆及其组织表达

孙念, 陈开建, 褚武英, 肖调义, 李迪



草鱼原肌球蛋白基因的克隆及其组织表达

孙念1, 陈开建1, 褚武英2, 肖调义1, 李迪1

(1. 湖南农业大学动物科学学院, 湖南长沙, 410003; 2. 长沙学院生物工程与环境科学系, 湖南长沙, 410003)

为揭示原肌球蛋白基因在草鱼肌肉中的作用, 利用RT-PCR和RACE技术克隆获得了草鱼原肌球蛋白基因cDNA, 并对该基因在普通草鱼和脆肉鲩不同组织中的表达情况进行研究分析。结果表明原肌球蛋白基因cDNA全长序列为1 705 bp, 包含387 bp的5′UTR序列, 1 307 bp的3′UTR序列和855 bp开放阅读框(ORF)。其ORF编码284个氨基酸。系统进化分析表明普通草鱼与斑马鱼、墨西哥脂鲤的原肌球蛋白基因核苷酸同源性分别是93％和87％, 氨基酸同源性分别是96％和93％。在聚类上普通草鱼原肌球蛋白基因与其他鲤科鱼类同源性较高, 表明亲缘关系最近, 与传统分类相一致。Real time-PCR结果表明原肌球蛋白基因在所检测的普通草鱼和脆肉鲩7个组织中均有表达, 原肌球蛋白基因在普通草鱼腹肌中表达最高, 其次为前肠。原肌球蛋白基因在脆肉鲩腹肌中的表达低于普通草鱼, 而脆肉鲩中肌肉、肝脏、肾脏、前肠、后肠中原肌球蛋白基因表达量大于普通草鱼相对应组织, 但差异不显著。

普通草鱼; 原肌球蛋白; 基因表达; 脆肉鲩

作为一类结合蛋白,原肌球蛋白(tropomyosin,TPM)在细肌丝中能与肌动蛋白丝结合并与肌钙蛋白一起参与调节肌球蛋白与肌动蛋白丝对钙离子的相互作用。Perry[1]、杨静娴[2]等发现TPM以大量异构体形式行使着真核细胞内与肌动蛋白细肌丝相关的多种功能, 这是由于TPM作为一类异构体形式广泛存在于真核细胞中。……