对滇鸡血藤不同部位中异型南五味子丁素含量的分析

李 波 郭菊玲

（玉溪市食品药品检验所 云南 玉溪 653100）

滇鸡血藤为木兰科植物内南五味子Kadsura interior A.C. Smith的干燥藤茎，是一种临床上常用的中药材。此药主要在秋季采收，经去枝叶、切片、晒干后即可入药。滇鸡血藤具有活血补血、调经止痛、舒筋通络的作用，常用于治疗月经不调、痛经、肢体麻木瘫痪、风湿痹痛及气血虚弱诸症[1]。中成药复方滇鸡血藤膏具有活血养血、益肾的功效，其君药即为滇鸡血藤[2]。滇鸡血藤的质量标准被载于2015年版《中国药典》中。在该标准中，异型南五味子丁素是鉴别滇鸡血藤药材及对此药进行有效成分含量测定的重要指标。本文主要分析滇鸡血藤茎的韧皮部、木质部、髓部中异型南五味子丁素含量的差异性，现报告如下。

1 仪器与试药

Agilent1260高效液相色谱仪；Agilent Extend-C18（4.6mm×150mm，5µm)色谱柱；赛多利斯BP211D-OCE电子天平；异型南五味子丁素（作为对照品，中国食品药品检定研究院提供，批号为111801-201201，供含量测定用，纯度为97.6%）；滇鸡血藤药材（做为供试品，为直径在5-12cm的未切片藤茎，某药业有限责任公司生产）；甲醇、乙腈的纯度为色谱纯，水为超纯水，其余试剂的纯度为分析纯。

2 方法与结果

2.1 采用薄层色谱法对供试品进行鉴别试验 分别取供试品韧皮部、木质部、髓部的粉末状样品0.5g，加入10ml的环己烷，进行30分钟的超声处理，过滤，将滤液蒸干，在残渣中加入环己烷0.5ml使其溶解，将获得的溶液作为供试品溶液。取异型南五味子丁素对照品，加入环己烷制成1mg/1ml的溶液，将其作为对照品溶液。采用薄层色谱法进行测定：吸取上述的两种溶液各5μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(2：1)作为展开剂进行展开，然后取出晾干，置于紫外光灯(254nm)下进行检视。检测结果显示，在与对照品色谱相应的位置上，供试品三个部位的色谱分别显示出相同颜色的斑点。在相同取样量与点样量的条件下，与对照品色谱相应的位置上出现的供试品韧皮部斑点颜色较深，而供试品木质部与髓部斑点的颜色逐渐变浅。结果见图1。

图1 供试品三个部位与对照品的薄层色谱图

2.2 对供试品中异型南五味子丁素的含量进行测定除在制备供试品溶液时分别取供试品韧皮部、木质部、髓部的粉末（过三号筛）0.5g外，均按照《中国药典》2015年版一部滇鸡血藤药材[含量测定]项下记录的方法进行供试品溶液含量的测定。

2.2.1 供试品的色谱条件 色谱柱为Agilent Extend-C18（4.6mm×150mm，5µm)；流动相为甲醇-乙腈-水(10：48：42)；流量为1.0mL•min-1；柱温为30℃；检测波长为230nm；进样量为10μL。理论板数按异型南五味子丁素峰的计算应不低于8000。

2.2.2 供试品与对照品溶液的制备

2.2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取10.13mg的对照品置于10mL的容量瓶中用甲醇稀释至刻度线，再精密量取该溶液3mL，置于100mL的容量瓶中，用甲醇稀释至刻度线，摇匀即得（每1mL该溶液中含异型南五味子丁素29.7μg）。

2.2.2.2 供试品溶液的制备 分别取供试品韧皮部、木质部、髓部的粉末（过三号筛）约0.5g，进行精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入环己烷50ml，称定重量，进行超声处理(功率为360W，频率为40kHz)50分钟，放冷，再称定重量，用环己烷补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度线，摇匀、过滤即得。

2.2.3 供试品三个部位中异型南五味子丁素含量的测定分别精密吸取对照品溶液与供试品三个部位的供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪中进行测定。按干燥品计算，供试品中所含的异型南五味子丁素(C27H30O8)不得少于0.050%。检测结果显示，滇鸡血藤的韧皮部中异型南五味子丁素的含量为0.162%、其木质部中异型南五味子丁素的含量为0.116%、其髓部中异型南五味子丁素的含量为0.083%。详情见表1：

表1 供试品三个部位中异型南五味子丁素的含量分析

3 讨论

从本研究获得的薄层色谱图中可以看出，在相同取样量与点样量的条件下，与对照品色谱相应的位置上出现的供试品韧皮部斑点的颜色要深一些，几乎和对照品斑点的颜色一样深。而与对照品色谱相应的位置上出现的供试品木质部斑点、髓部斑点的颜色逐渐变浅。这一现象在使用液相色谱法对供试品相应部位进行异型南五味子丁素的含量检测时得到充分的印证。

本次试验的结果表明，采用薄层色谱法对滇鸡血藤中所含的异型南五味子丁素进行检测可初步判断其含量。在滇鸡血藤的不同部位（韧皮部、木质部、髓部）中，异型南五味子丁素的含量各不相同。在对滇鸡血藤进行异型南五味子丁素含量的检测时应保证其取样部位的均一性，避免因取样的部位不同而使检测结果出现误差。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[S].北京：中国医药科技出版社，2015:362.