重庆地区儿童珠蛋白生成障碍性贫血基因诊断分析*

孟凡飞，李 毅，蒲晓允(第三军医大学新桥医院检验科，重庆 400037)

珠蛋白生成障碍性贫血，是一组由于珠蛋白基因缺失或缺陷而引起珠蛋白合成障碍所致的遗传性溶血性贫血疾病[1]，较为常见的有α-珠蛋白生成障碍性贫血和β-珠蛋白生成障碍性贫血，分子流行病学资料表明该病在世界各地的发病存在明显的地理分布差异性，主要以热带及亚热带疟疾高发区为主，在我国则主要集中在广东、广西及周边省份。由于重庆地区人口基数大，流动人口多，病例数也不少，加强珠蛋白生成障碍性贫血的筛查对优生优育有重大意义[2]。为初步了解该地区珠蛋白生成障碍性贫血患儿的发生率及基因突变类型，本研究对2014年07月～2016年3月到本院就诊的566例贫血患儿进行珠蛋白生成障碍性贫血筛查和基因检测分析，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象 选择2014年7月～2016年3月在本院就诊的经筛选疑似珠蛋白生成障碍性贫血患儿566例，其中男性314例，女性252例，年龄0～15岁，平均年龄3.2岁(标准差为2.7岁)。

筛选标准为：采用全自动血细胞分析仪进行血常规分析。国际珠蛋白生成障碍性贫血协会[3]推荐使用的珠蛋白生成障碍性贫血筛查诊断截断值(cutoff values)是MCV<79fl和MCH<27pg，国内实验室MCV一般取值<80fl。

1.2 试剂与仪器 自动血细胞分析仪为希森美康XL2100型，血液基因组DNA提取试剂盒(离心柱型)，α-和β-珠蛋白生成障碍性贫血基因检测试剂盒(PCR+膜杂交法)均由潮州凯普生物化学有限公司提供。Thermo NanoDrop1000分光光度计，ABI Veriti PCR扩增仪。

1.3 方法

1.3.1 标本采集：采用EDTA-K2无菌真空抗凝管抽取2ml静脉血并混匀，标本采集后立即送检或保存，待测标本于-4℃保存不超过3天，-20℃保存不超过3个月。……