马钱子碱对人慢性粒细胞白血病KCL-22细胞的增殖及凋亡作用*

韩泽平，谢杏仪，何金花，黎毓光，吕钰冰，周嘉彬

(广州市番禺区中心医院检验科，广州 511400)

传统中药马钱子(又名番木鳖)，是马钱子科植物马钱子的干燥成熟种子，具有抗炎消肿，散结活血，通络止痛等功效，临床广泛应用于各种风湿顽痹、骨病和肿瘤以及癌性疼痛等治疗[1]。马钱子碱(Brucine)是从马钱子中提取的吲哚型结构的生物碱，是马钱子组成和发挥药效的主要成分之一。研究发现，马钱子碱不仅可在体外显著地抑制多种细胞增殖，诱导肝癌、乳腺癌、结肠癌、多发性骨髓瘤等多种癌细胞产生凋亡[2]，而且动物实验表明马钱子碱也可有效地抑制体内肿瘤的生长和转移[3，4]，成为近年来抗肿瘤药物研究的一个热点。本实验旨在研究马钱子碱在体外对人慢性粒细胞白血病细胞株KCL-22细胞的增殖及凋亡作用，为临床治疗白血病提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 主要试剂及药物 胎牛血清、RPMI 1640培养基(美国Hyclone公司)，Annexin V-FITC/PI 细胞凋亡检测试剂盒(美国ABGAB公司)，多克隆兔抗人细胞色素C(Cyt-C)，Caspase-3，Caspase-9(美国Santa Cruz公司)，Bcl-2，Bax为鼠抗人单克隆抗体(美国Cell signal公司)，兔抗人β-actin多克隆抗体及二抗(辣根过氧化物酶链接的抗鼠IgG、辣根过氧化物酶链接的抗兔IgG)均购于武汉博士德生物工程有限公司。MTS细胞增殖检测试剂盒购自Promega，Westem细胞裂解液和BCA蛋白浓度测定试剂盒均购自江苏碧云天生物制品有限公司。马钱子碱标准品，购自北京中国药品生物制品检定所(规格：20 mg/支，批号：110706-201306)。

1.2 细胞培养及药物处理 人慢性粒细胞白血病KCL-22细胞株由中山大学肿瘤防治中心惠赠。……