黄 璐,刘丽华,庄运芳,陈丽红,欧小懂,梁延连
(1.河源市中心血站,广东河源 517000;2.深圳市血液中心,广东深圳 518035)
MNS血型系统是继ABO血型系统之后第二个被发现的血型系统,其复杂性仅次于Rh血型系统,迄今为止已发现47种抗原。在临床输血方面,MN血型具有重要意义,抗-M或抗-N抗体的存在可影响输血前交叉配血,甚至引起溶血性输血反应或新生儿溶血病[1]。在欧洲、美洲等许多发达国家已将红细胞MN血型鉴定作为临床输血的常规检测项目[2]。MN血型检测有血清学方法和基因分型方法,有报道由于抗体的特异性,大量输血患者或自身溶血性贫血患者检测MN血型时,采用血清学方法得到的结果并不完全可靠[3]。本文应用PCR-SSP基因分型技术鉴定因产生抗-M抗体影响交叉配血的患者样本的MN血型,成功解决交叉配血问题,现报道如下。
1.1 样本 本实验室收集交叉配血困难的患者标本14例,经谱细胞鉴定血浆中均存在抗-M抗体。
1.2 试剂 单克隆IgM性质抗-M、抗-N血清及标准谱细胞试剂(上海血液生物医药公司),抗人球蛋白试剂(美国Immucor公司),DNA抽提试剂盒(美国QIAGEN公司),PCR-SSP基因分型试剂盒(天津秀鹏生物技术公司)。
MN血型PCR-SSP基因分型试剂盒包括2种引物混合液:Mix-M与Mix-N,分别用于扩增M,N血型基因片段,其特异性扩增产物长度分别为162 bp和300 bp。试剂盒内参质控引物根据人类生长激素基因(HGH)的保守片段设计,存在于每个引物中,且在每次试验中运行,其特异性扩增产物长度为865 bp。
1.3 仪器 KA-2200血清学离心机(日本KUBOTA公司)、Eppendorf高速……