犬血浆中特比萘芬的高效液相色谱检测方法

王东亮，聂巧，李宇琛，吴天兴，卜仕金*

(1.扬州大学兽医学院，江苏扬州 225009；2. 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，江苏扬州 225009)

犬血浆中特比萘芬的高效液相色谱检测方法

王东亮1,2，聂巧1,2，李宇琛1,2，吴天兴1,2，卜仕金1,2*

(1.扬州大学兽医学院，江苏扬州 225009；2. 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，江苏扬州 225009)

建立并优化一种简单、快速、灵敏、高选择性的HPLC方法测定犬血浆中特比萘芬血药浓度，并考察方法的稳定性。特比萘芬血浆样品经提取剂乙腈-异丙醇(用磷酸调pH至3.0)(40:60，V/V)液-液萃取后，提取液经40 ℃氮气吹干，用流动相复溶后离心过滤，取上清液20 μL进样分析，对血样处理后及标准溶液保存不同时间后的稳定性进行了考察。色谱柱Agilent 5 HC-C18(2)柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相甲醇-0.1%磷酸水(59:41，V/V)；流速0.8 mL/min；紫外检测波长223 nm；柱温35 ℃。色谱峰分离良好，无干扰。特比萘芬最低检测浓度为0.01 μg/mL，线性范围是0.02 ～ 5 μg/mL，相关回归方程:y=356.28x-2.0311(r2=0.99989)。低、中、高血浆质控样品日内RSD均小于5%，日间RSD均小于7%，方法平均回收率分别为108.9%，100.4%，102.1%。血样处理后8 h内样品能保持较好稳定性，血样处理后3次循环冻融能保持较好稳定性。血样处理后于-20 ℃条件下冻存能够保持稳定2个月，标准溶液有效保存期同样为2个月。本研究建立的特比萘芬血样浓度测定方法有较高的准确度和灵敏度，适用于候选化合物的体内药代动力学研究。

特比萘芬；血药浓度测定；稳定性；高效液相色谱法

盐酸特比萘芬是第二代丙烯胺类广谱抗真菌药，能够高选择性地抑制真菌细胞中的角鲨烯环氧化酶，抑制真菌细胞膜的形成，从而达到杀菌和抑菌的双重作用，尤其能够有效地对抗入侵角质化组织(如趾甲、毛发、皮肤)的丝状真菌[1]，已在人医临床广泛应用，而在动物方面的研究较少。……