响应曲面法优化Gluconobacter melanlgenu X42培养基

陈羽，徐威，位星，胡思宇

(沈阳药科大学生命科学与生物制药学院，辽宁沈阳110016)

响应曲面法优化Gluconobacter melanlgenu X42培养基

陈羽，徐威*，位星，胡思宇

(沈阳药科大学生命科学与生物制药学院，辽宁沈阳110016)

采用Plackett-Burman设计、最陡爬坡试验和中心组合试验相结合的策略对Gluconobacter melanlgenu X42转化培养基进行优化。试验结果表明:最佳转化培养基组成为麦芽抽提物0.46 g/L、蛋白胨2.07 g/L、CaCO30.70 g/L、ZnSO40.04 g/L。优化后L-山梨糖生成量提高了9.9%。可以应用响应曲面法对G.melanlgenu X42转化培养基进行优化。

生黑葡萄糖酸杆菌;培养基;响应曲面法;L-山梨糖;条件优化

维生素C是一种水溶性维生素，能够参与体内多种羟基化反应和氧化还原反应，是一类重要的细胞代谢氧化还原化合物［1］。我国发明的维生素C“二步发酵法”是经生黑葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter melanlgenu)转化D-山梨醇为L-山梨糖，再经过细菌发酵生成维生素C前体2-酮基-L-古龙酸［2］。响应曲面法(Response Surface Methodology)是一种通过合理的实验设计来收集数据，应用曲面模型及各影响因素的二次多项式来评估反应变量变化规律的设计方法。因其能恰当地利用实验设计所收集的数据，有效地评估模型中的参数，受到国内外各科学领域的广泛关注［3-4］。本研究采用响应曲面法对所构建的基因工程菌G.melanlgenu X42(pUC 19-vgb)的转化培养基进行优化，以期为企业在大规模生产中节约能耗、降低生产成本提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌种G.melanlgenu X42(pUC 19-vgb)由本课题组保藏。

1.1.2 培养基(g/L)种子培养基:山梨醇160，麦芽提取物5，CaCO32.50;转化培养基:山梨醇230，蛋白胨2，麦芽提取物0.40，CaCO30.70，ZnSO40.04。

1.2 方法

1.2.1 L-山梨糖含量的测定L-山梨糖含量的测定参见文献［5］。……