水通道蛋白在子宫内膜异位症的表达及子宫内膜细胞迁徙中的作用

苏明兰 罗志明

水通道蛋白在子宫内膜异位症的表达及子宫内膜细胞迁徙中的作用

苏明兰 罗志明

目的探讨水通道蛋白(AQP)在子宫内膜异位症的表达及子宫内膜细胞迁徙中的作用。方法分析70例子宫内膜异位症患者临床资料,异位子宫内膜作为实验组和在位内膜作为对照组,RNA干扰后腺细胞作为干扰实验组和siRNA阴性对照作为阴性对照组。观察AQP2、5、8表达及腺细胞RNA干扰后细胞穿孔计数情况。结果实验组AQP2、5、8阳性表达率均低于对照组(P＜0.05)；干扰实验组腺细胞RNA干扰后48、72、96 h细胞穿孔计数均低于阴性对照组(P＜0.05)。结论AQP2、5、8蛋白过表达和子宫内膜异位症发生过程、子宫内膜腺细胞迁徙过程均有密切的关系。

水通道蛋白；子宫内膜异位症；表达；子宫内膜细胞迁徙

子宫内膜异位症发生是逐步发展的过程,有效预防子宫内膜异位症复发已成为临床研究的热点问题,而子宫内膜异位症的发生与子宫异位内膜种植有着密切的关系［1］。目前关于子宫在位内膜和异位内膜的粘附、血管形成报道较多,但是关于子宫内膜异位症迁徙的研究却鲜有报道［2］。本研究通过对本院AQP在子宫内膜异位症的表达及子宫内膜细胞迁徙中的作用进行分析,现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 分析2009年8月～2014年7月病理科临床资料,由于子宫内膜异位症采用半根治手术或者术中诊刮内膜,得到符合条件的70例,以异位子宫内膜作为实验组,同一例患者在位内膜作为对照组。在位内膜腺细胞迁徙,将RNA干扰后腺细胞作为干扰实验组,将试剂盒中配备的siRNA阴性对照作为阴性对照组。

1.2 方法 ①通过免疫组织化学法监测AQP2、5、8蛋白表达情况；②利用RNA干扰技术沉默自子宫内膜癌腺细胞株Ishikawa中AQPS基,Realtime-PCR检测干扰后mRNA水平的抑制情况,免疫印迹检测干扰后腺细胞中AQP5蛋白表达情况,通过细胞穿孔实验检查干扰后腺细胞迁徙能力改变情况。

1.3 观察指标 ①观察两组AQP2、5、8阳性表达情况；②观察腺细胞RNA干扰后细胞穿孔计数情况。

1.4 统计学方法 采用SPSS19.0统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差(±s)表示,采用t检验；计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组AQP2、5、8阳性表达情况比较 实验组AQP2、5、8阳性表达率均低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

2.2 腺细胞RNA干扰后两组细胞穿孔计数情况比较 腺细胞RNA干扰后24 h两组细胞穿孔计数比较差异无统计学意义(P＞0.05)；干扰实验组腺细胞RNA干扰后48、72、96 h细胞穿孔计数均低于阴性对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05)。见表2。

表1 两组AQP2、5、8阳性表达情况比较［n(%)］

表2 腺细胞RNA干扰后两组细胞穿孔计数情况比较(±s,ng/ml)

表2 腺细胞RNA干扰后两组细胞穿孔计数情况比较(±s,ng/ml)

注：与阴性对照组比较,aP＜0.05,bP＞0.05

细胞穿孔计数24 h 48 h 72 h 96 h阴性对照组 70 34.3±4.2 96.2±3.3 140.4±3.6 160.4±5.8干扰实验组 70 35.6±4.5b 54.5±2.4a 70.5±2.5a 76.6±4.8at1.77 85.50 133.43 93.13P＞0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05组别 例数

3 讨论

子宫内膜异位症主要是指一些具有生长功能的子宫内膜组织在子宫以外的身体部位出现,属于妇产科常见性疾病,其近年来的发生率呈现明显增高的趋势［3］。子宫内膜异位症呈现良性形态学临床表现,但是其具有和恶性肿瘤类似的种植能力、侵袭能力和远处转移能力［4］。AQP具有促进细胞迁徙的功能,子宫内膜异位症发生过程中和子宫内膜的迁徙、粘附和新生血管形成具有密切的关系,以AQP作为切入点,干扰其基因的表达水平,检验内膜细胞在AQP干扰后迁徙情况的变化,对于明确AQP在子宫内膜异位症内膜迁徙有着重要的意义。细胞迁徙是机体重要的生理过程,其是通过离子通道进行调控的,涉及的细胞肌动蛋白动力、形态的快速改变,细胞粘附位点的重新分布。细胞内有一套整体的、严密的机制,从而对细胞迁徙进行调控［5,6］。AQP家族可以促进水分子快速被动运输,调节细胞内外渗透压平衡状态,促进细胞发生迁徙,对脂肪代谢水平进行调节,利于神经信号传导等。

本研究通过分析70例子宫内膜异位症患者临床资料,结果表明,实验组AQP2、5、8阳性表达率均低于对照组(P＜0.05),提示AQP2、5、8在子宫内膜腺上皮细胞上有表达,在位内膜上的腺上皮细胞AQP2、5、8阳性表达率高于异位内膜,干扰实验组腺细胞RNA干扰后48、72、96 h细胞穿孔计数均低于阴性对照组(P＜0.05),提示AQP5蛋白过表达参与了子宫内膜细胞的迁徙过程,干扰5基因表达可以对子宫内膜腺细胞迁徙形成抑制。

综上所述,AQP2、5、8蛋白过表达和子宫内膜异位症发生过程、子宫内膜腺细胞迁徙过程均有密切的关系。

［1］韦成厚,牛刚,沈宏伟,等.水通道蛋白1在子宫内膜异位症患者血清和腹腔液中的表达及意义.实用妇产科杂志,2012,28(4): 310-312.

［2］廖百花,张秋实,赵爱萍,等.水通道蛋白1与子宫内膜异位症新生血管形成的关系.广东医学,2013,34(16):2450-2453.

［3］黄绮丹,黄海定,吴会东,等.子宫内膜异位症不孕小鼠水通道蛋白表达及莪棱胶囊的干预作用.新中医,2014,46(7):196-199.

［4］韦成厚,周蓓,牛刚.水通道蛋白1在子宫内膜异位症发病机制的作用.广东医学,2011,32(10):1350-1352.

［5］徐科君,吴瑞瑾.水通道蛋白与子宫内膜异位症.国际生殖健康/计划生育杂志,2009,28(6):368-370.

［6］廖百花.子宫腺肌病病灶中微血管密度及水通道蛋白1的表达.实用妇产科杂志,2012,28(9):775-777.

Effect by aquaporins in expression of endometriosis and endometrial cell migration

SU Ming-lan,LUO Zhi-ming.Shenzhen Yuandong Maternal and Child Hospital,Shenzhen 518021,China

ObjectiveTo investigate effect by aquaporins (AQP) in expression of endometriosis and endometrial cell migration.MethodsClinical data of 70 endometriosis patients were analyzed.Patients with endometriosis were taken as experimental group,an those with eutopic endometrium as control group.Patients with gland cell after RNA interference were taken as interference experimental group,and those with negative siRNA as negative control group.Observation was made on expression of AQP2,5,8 and gland cell perforation count after RNA interference.ResultsThe experimental group had all lower positive expression rate of AQP2,5,8 than the control group (P＜0.05),and the interference experimental group had all lower cell perforation count in 48,72,96 h after gland cell RNA interference than the negative control group (P＜0.05).ConclusionOverexpression of AQP2,5,8 protein contains close correlation with generating process of endometriosis and endometrial cell migration

Aquaporins; Endometriosis; Expression; Endometrial cell migration

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.13.009

2016-04-28］

水通道蛋白在子宫内膜异位症的表达及子宫内膜细胞迁徙中的作用(项目编号：2012C3105018)

524013 湛江市霞山妇幼保健院(苏明兰)；广东医学院(罗志明)