应用微波萃取-气相色谱法测定尿液中的苯丙胺类毒品

党富生黄林(．衡阳市公安局刑事科学技术研究所， 湖南 衡阳 400；．岳阳市公安局刑事科学技术研究所， 湖南 岳阳 44000)

应用微波萃取-气相色谱法测定尿液中的苯丙胺类毒品

党富生1黄林2(1．衡阳市公安局刑事科学技术研究所， 湖南 衡阳 421001；2．岳阳市公安局刑事科学技术研究所， 湖南 岳阳 414000)

使用微波萃取-气相色谱法(GC)检测人尿液包括甲基苯丙胺(MA)、3，4-亚甲二氧基苯丙胺(MDA)、3,4-亚甲二氧基甲基苯丙胺(MDMA)等苯丙胺类毒品效果进行分析，重点对萃取溶剂、用量、pH值、温度、时间等因素对萃取结果的影响进行探讨。实验显示萃取溶液选用以环己烷、pH值12，40℃持续微波10 min，使用微波萃取-气相色谱法测定人尿中甲基苯丙胺、3，4-亚甲二氧基苯丙胺、3,4-亚甲二氧基甲基苯丙胺的回收率最高，且分别高达92.25%、85.92%、91.49%，相对偏差为5.6%、5.6%、6.2%。微波萃取-气相色谱法测定尿液中苯丙胺类毒品具有快速、准确且灵敏特点。

微波萃取；气相色谱法；人尿液；苯丙胺类毒品

0 引言

苯丙胺(amphetamine)类毒品属于人工合成有机胺类兴奋药物，药物可直接作用于中枢神经和交感神经，因而苯丙胺类毒品也称为神经兴奋类毒品[1]。苯丙胺类毒品为我国常见毒品类型，对广大青少年身心健康带来巨大影响，也带来诸多社会问题。根据国内外研究成果，苯丙胺类毒品检查方法包括气相色谱法、高效液相色谱法、毛细管电泳法、高效液相色谱法-质谱联合检测等[2]。

在检测苯丙胺类毒品中，体内材料检测为当前法庭科学研究热点之一，人尿液属于广泛使用的体内材料[3]。微波萃取技术属于常用检测技术，该技术属于新型高效、自动萃取方法，已用于法庭科学领域。本文建立微波萃取-气相色谱分析方法，检测甲基苯丙胺、3，4-亚甲二氧基苯丙胺、3，4-亚甲二氧基甲基苯丙胺是三种苯丙胺类毒品，对微波萃取-气相色谱法测定尿液中的苯丙胺类毒品的效果进行分析。

1 实验材料与方法

1.1 实验材料

(1)实验设备 ①MSP-100E微波萃取仪北京雷鸣科技公司生产；②Agilent 7890A气相色谱仪美国安捷伦科技公司生产；③配氢火焰离子化检测器FID公司生产；④氮吹仪北京八方世纪科技有限公式生产；⑤Sigma 3K15高速冷冻离心机德国生产。

(2)实验材料 健康自愿者空白尿液、甲基苯丙胺盐酸盐、3，4-亚甲二氧基苯丙胺盐酸盐、3，4-亚甲二氧基甲基苯丙胺盐酸盐对照品、色谱纯甲醇；分析纯环己烷、乙酸乙酯、无水甲醇、氯仿、碳酸氢钠、异丙醇、氢氧化钠。

1.2 方法

(1)气相色谱分析条件 使用HP-5毛细管柱，规格30 m×0．32 mm×0．5μm。依据程序提升毛细管柱温度，首先加入至120℃，维持2 min后按照8℃/min速度提升至200℃；再以30℃/min速度升温至280℃，维持5min。进样口和FID温度分别为280℃、300℃；载气为氮气，流速3．0mL/min，分流比10∶1，进样体积1μL。

(2)配置标准溶液 称取甲基苯丙胺盐酸盐、3，4-亚甲二氧基苯丙胺盐酸盐、3，4-亚甲二氧基甲基苯丙胺对照品各9．92mg、7．2mg、7．14mg，将其分别加入1mL甲醇，使对照品完全溶解，再定容至2．0mL，分别配置成4．0 g/L、3．0g/L、3．0g/L标准溶液，放于-20℃环境中保存。将以上标准溶液配制成混合标准溶液，溶度分别为1．0g/L、0．1g/L。

(3)样品前处理

①微波萃取取2mL尿液放于微波样品罐，振荡摇匀后静置2h，加入4mol/L氢氧化钠3滴和6mL环己烷，振荡并以转速9000r/min离心处理10min后。取上清液，加入盐酸甲醇，常温环境内使用氮吹仪吹干，而使用100μL和300μL甲醇定容，最后取1μL进行测定。

②液液萃取取2mL尿液放于锥形瓶内，振荡并放置2h后加入4mol/L氢氧化钠3滴和6mL环己烷。再次震荡后离心处理10min，转速9000r/min。提取上清液，常温下氮吹仪吹干，使用100μL甲醇定容。取1μL溶液进行GC-FID检测。

2 结果与讨论

2.1 色谱图

微波萃取-气相色谱法可以有效分离人尿中测甲基苯丙胺、3，4-亚甲二氧基苯丙胺、3，4-亚甲二氧基甲基苯丙胺与基体，详见图1。

2.2 微波萃取条件

(1)溶剂 分别选择环己烷、乙酸乙酯、无水甲醇、氯仿、碳酸氢钠、异丙醇、氢氧化钠作为萃取剂，参照微波萃取步骤操作，实验结果显示环己烷对药体的干扰小，提取率最高。选用环己烷和甲苯为混合溶剂萃取虽然可提高提取率，但甲基苯胺、3，4-亚甲二氧基苯丙胺、3，4-亚甲二氧基甲基苯丙胺出峰干扰大；乙酸乙酯、氯仿、异丙醇混合溶剂对药体的干扰大。因而环己烷为最佳萃取溶剂。

(2)萃取温度 分别设置25℃、30℃、40℃、50℃、60℃、70℃、80℃萃取，实验结果显示萃取温与萃取率关系呈抛物线状，50℃前随温度提高，萃取率提升。温度超过50℃后干扰增多，因而40℃为最佳萃取温度。

(3)萃取时间以环己烷为萃取溶剂，在40℃下分别萃取2min、5min、8min、10min、12min、15min，2～10min内，随着萃取时间增加，萃取率也越高，10min后，萃取时间增加对萃取率影响不大，因而10min为最佳萃取时间。详见图2。

(4)萃取溶剂剂量分别选择2mL、4mL、6mL、8mL、10mL、12mL环己烷，在40℃下萃取10min。结果显示随着萃取溶剂用量增加，萃取率提升。8mL和12mL对萃取率影响不大，因而选择6mL环己烷为萃取溶液。

(5)尿液pH值将尿液pH值分别调节为9～13，选择6mL环己烷，在40℃下萃取10min。结果显示，pH至为9～12，萃取率随pH值提高而增加，尿液pH值为12和13下的萃取率差异不明显，因而尿液pH值选12。(见图3)2.3 标准曲线和最低检出限

图2 萃取时间与萃取率关系

图1 尿液色谱

图3 尿液pH值与萃取率的关系

将甲基苯丙胺、3，4-亚甲二氧基苯丙胺、3，4-亚甲二氧基甲基苯丙胺混合标准溶液加入空白尿液，制备系列标准溶液，进行GC-FID分析。根据药物峰面积绘制药物质量浓度标准曲线。最低检出限以微波萃取处理样品检测的尿液药物浓度，结果见表1。药物浓度为3mg/L的日内和日间回收率详见表2。

表1 药物标准曲线方程、相关系数和检出限

表2 药物浓度为3 mg/L的日内和日间回收率、精密度

2.4 回收率及精密度

将甲基苯丙胺、3，4-亚甲二氧基苯丙胺、3，4-亚甲二氧基甲基苯丙胺混合标准溶液加入空白尿液，配置1 mg/L、3 mg/L、5 mg/L尿液各5份，依据微波萃取和液液萃取方式分析GC-FID，计算回收率和精密度，结果详见表3。

表3 两种萃取方法的回收率和精密度

3 结语

本文采用微波萃取-气相色谱法检测人尿中苯丙胺类毒品，重点对萃取溶剂、溶剂剂量、温度、时间、pH值等因素与萃取率的关系进行分析，建立检测尿液苯丙胺类毒品检测方法，结果显示该检测方法具有快速高效特点，回收率高，可用于检测苯丙胺类毒品滥用人员尿液检测。

[1]王燕燕,孟品佳,李宁.场放大样品堆积毛细管区带电泳检测尿液中苯丙胺类毒品[J]. 分析试验室,2008,05:5-8.

[2]李 瑶,刘 荣,张 琳,王 朝 虹，等. UPLC-MS/MS法同时测定尿液中的6种苯丙胺类毒品[J]. 分析试验室,2015,09:1072-1075.

[3]张文文,孟品佳,孟梁，等.中空纤维膜液相微萃取-气相色谱/质谱法检测尿液中的苯丙胺类兴奋剂[J].分析试验室,2013,01:44-47.

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Determination of amphetamines in urine by microwave extraction and gas chromatography

using microwave extraction gas chromatography(GC) detection of human urine including methamphetamine(MA), 3,4-methylene two oxygen thamphetamine(MDA), 3,4- methylene two oxy methamphetamine(MDMA) analysis such as amphetamines, focusing on the extraction solvent, dosage, pH value. Impact of temperature, time and other factors on the extraction results. Experimental results show that the extraction solution used to cyclohexane, pH 12,40 DEG C for 10 min microwave, using microwave extraction gas chromatography method for the determination of methamphetamine in urine, 3,4- methylene two oxygen thamphetamine, recovery of 3,4- methylene two oxy methamphetamine. The highest rate and were as high as 92.25%, 85.92%, 91.49%, the relative deviation is 5.6%. 5.6%, the determination of amphetamines in urine has a rapid method of 6.2%. microwave extraction - gas chromatography, accurate and sensitive features.

microwave extraction; gas chromatography; urine; amphetamines

党富生(1982-),男,汉，大学本科,山西运城人，理化检验工程师,研究方向：从事毒物、毒品案件检验工作。