栀子油渣的有效成分分析

□董荣建 鲍忠赞 平阳县食品药品检验检测中心

栀子油渣的有效成分分析

□董荣建 鲍忠赞 平阳县食品药品检验检测中心

本文对栀子果和经榨油工艺的栀子油渣进行分析，比较了京尼平苷酸、山栀子苷B、绿原酸、栀子苷、西红花苷I、西红花苷Ⅱ和西红花酸7种物质成分的含量变化。结果表明：与栀子果相比，栀子油渣中的西红花苷I、西红花苷Ⅱ有所降低，栀子苷有所增高。可以进行以栀子苷为主的综合开发利用，为进一步综合利用栀子的研究提供理论依据。

随着人民生活水平的不断提高，对食用油的质量有了很高的要求，栀子不仅是一种药材和色素原料，也是一种含油丰富的新油源，含油量与大豆接近，栀子油脂肪酸主要组分是亚油酸、油酸、棕榈酸，具有调节血压、降低血清胆固醇、调节脂肪代谢等作用，受到广大消费者喜欢。目前栀子油渣大多作为废弃物处理，仅少量添加到饲料中得以利用，经济效益低。本文对栀子油渣的主要有效成分京尼平苷酸、山栀子苷B、绿原酸、栀子苷、西红花苷I、西红花苷Ⅱ和西红花酸7种物质进行分析，为进一步综合利用栀子的研究提供理论依据。农业开发有限公司提供。

材料与仪器

实验材料

栀子果和栀子油渣，由浙江星光乙腈（MERCK，色谱纯）、甲醇（MERCK，色谱纯）、乙醇（分析纯）、二次蒸馏水（自制），绿原酸（CSA号：327-97-9，纯度HPLC≥98%）、山栀子苷B（CSA号：24512-62-7，纯度HPLC≥98%）、栀子苷（CSA号：24512-63-8，纯度HPLC≥98%）、西红花酸（CSA号：27876-94-4，纯度HPLC≥98%，购于南京春秋生物工程有限公司）、京尼平苷酸（CSA号：27741-01-1，纯度HPLC≥98%）、西红花苷I（CSA号：94238-00-3，纯度HPLC≥98%）、西红花苷Ⅱ（CSA号：55750-84-0，纯度HPLC≥98%，购于上海金穂生物科技有限公司）。

仪器设备

Agilent1260型高效液相色谱仪（DAD二极管阵列检测器）、电子天平、离心机、粉碎机。

方法与结果

供试样品溶液的制备

取试样约100 g，粉碎，过40目筛，精密称量1.00 g，用80 mL 50%乙醇洗入100 mL容量瓶中，常温下提取60 min，每隔5 min振荡一次，用50%乙醇定容。3000 r/min离心10 min，取上清液过0.45 μm有机性滤膜针头滤器（弃去初滤液），滤液待测。

仪器条件

色谱柱：Agilent Zorbax SB-C18（4.6 mm×250 mm,5 μm）。流动相：乙腈（A）-0.2%磷酸溶液（B）。梯度洗脱：0～18 min（8%～15% A），18～25 min（15%～23% A），25～40 min（23%～35% A），40～50 min（35%～50%A），50～65 min（50%A）。检测波长：238、330、440nm。柱温：30 ℃。检测器采集范围：200～480 nm。流速：0.8 mL/min。进样量：10 μL。

标准曲线与检出限

按上述条件预分析供试品，根据各物质相应比例制备对照品（色谱图见图1）。精密称量对照品制备混标溶液：京尼平苷酸（37.5 μg/mL）、山栀子苷B（38.8 μg/mL）、绿原酸(37.4 μg/mL)、栀子苷(1 582 μg/mL)、西红花苷I(184 μg/mL)、西红花苷Ⅱ(40 μg/mL)与西红花酸(18.2 μg/mL)。将标准对照液逐级稀释后按2.2测定峰面积，以峰面积为Y坐标，对照品浓度(μg/mL)为X坐标，绘制标准曲线进行回归，以3倍信噪比计算检出限。结果表明7个化合物线性关系良好，检出限满足检测的要求（结果见表1）。7个化合物在不同波长下的HPLC色谱图如图1、图2、图3所示。

样品测定

准确称量栀子果和栀子油渣样品各1.00 g（一式3份），按上述条件进行分析，测定7种物质的含量；按《食品安全国家标准 食品中水分的测定》（GB 5009.3-2010）测定其水分含量，栀子果和栀子油渣水分含量分别为13.50%、9.11%。水分带入计算，取三次结果取平均值（以干基计），结果见表2。

从表2中可以看出，西红花酸在栀子油渣中未检出，其他6种成分两个样品中均检出。

经压榨后，京尼平苷酸、山栀子苷B、栀子苷和绿原酸含量有所增加，增幅分别为11.4%、10.3%、10.7%和14.5%，说明这4种物质在榨油过程中比较稳定，由于除去油脂后，总的质量减少，含量增加。西红花苷I和西红花苷Ⅱ含量有所减少，减幅分别为33.7%、38.89%，推测西红花苷I和西红花苷Ⅱ热不稳定，在榨油过程中部分损失。

精密度和稳定性试验

取2.5中栀子油渣和栀子果供试溶液，各连续进样5次，以峰面积计算精密度（RSD），7种物质峰面积的RSD均小于3%，表明仪器和色谱条件良好。取栀子果试样溶液分别在0、4、12、24 h测试，7种物质的相对偏差均小于5%，表明2.5 中制备试样液的方法稳定性良好。

回收率试验

以栀子油渣样品为空白，分别加入2.0 mL 2.3中的混合对照品溶液，按2.1和2.2方法分析，计算回收率，结果见表3。由表3可见，京尼平苷酸、山栀子苷B、绿原酸、栀子苷、西红花苷I和西红花苷Ⅱ6种物质回收率均在95%～110%之间，说明此方法适合这6种物质的含量分析；西红花酸回收率只有34.8%，明显低于其他6种物质，说明此方法不适合西红花酸的分析，需进一步开发适合西红花酸的前处理方法。

小结

目前对栀子有效成分的研究和提取加工主要是栀子苷和黄色素，杨奎、苏伟、方尚玲、孙旭群 等人研究表明栀子苷具有抗炎症、抗氧化、保肝和利胆作用。栀子黄色素的主要成分是西红花苷I和西红花苷Ⅱ，广泛应用于面制品等食品着色，它不仅安全无毒还可补充人体维生素，是一种营养型着色剂。本文通过对栀子油渣的有效成分分析，结果表明栀子油渣中还含有较高的栀子苷、西红花苷I和西红花苷Ⅱ，可见栀子油渣可以做为提取加工栀子苷和黄色素的原料。另外，研究表明栀子油渣相对于栀子果实而言，京尼平苷酸、山栀子苷B、栀子苷和绿原酸4种物质的含量随着比重的增加而增加，西红花苷I和西红花苷Ⅱ的含量随着比重的增加而减少。然而对于栀子黄色素的要求则是京尼平苷酸、山栀子苷B、栀子苷和绿原酸的含量越低越好，因此对栀子黄色素提取、分离的工艺要求更高。