苏子油干预血管内皮细胞miR-21靶向调控MMP-9的机制

黄楦槟，陈金水，吴天敏，陈金雄

(福建医科大学附属第一医院中医科，福建福州 350005)



◇中医药研究◇

苏子油干预血管内皮细胞miR-21靶向调控MMP-9的机制

黄楦槟，陈金水，吴天敏，陈金雄

(福建医科大学附属第一医院中医科，福建福州 350005)

目的 探讨不同浓度苏子油干预人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC) miR-21和基质金属蛋白酶MMP-9的表达，为苏子油改善动脉粥样硬化提供依据。方法 体外培养HUVEC，以TNF-α诱导细胞进行造模，将细胞分为空白组、模型组及苏子油高、中、低剂量组。MMT法检测各组细胞A值；PT-PCR检测细胞miR-21、MMP-9基因水平；脂质体转染法将miR-21模拟物转入HUVEC细胞，Western blot检测转染后MMP-9蛋白的表达。结果 苏子油高、中、低剂量能明显改善TNF-α诱导的HUVEC损伤，且苏子油对内皮细胞的保护作用呈剂量依赖关系；RT-PCR结果显示，模型组miR-21及MMP-9的表达高，苏子油干预后，miR-21及MMP-9基因的表达逐渐减弱，且二者分别与模型组比较，差异有统计学意义(P<0.05)；细胞转染miR-21后，MMP-9蛋白的表达显著增强；miR-21与MMP-9 mRNA 3′UTR区经生物信息学软件预测存在靶向结合位点。结论 苏子油可能通过干预miR-21靶向调控MMP-9的表达对血管内皮细胞发挥保护作用，从而发挥抗动脉粥样硬化作用。

苏子油；微小RNA-21；基质金属蛋白酶-9；靶向调控；抗动脉粥样硬化

动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)是众多心脑血管疾病共同的病理基础，也是心血管系统疾病中最常见的疾病，严重危害人类健康[1]。血管内皮细胞( vascularendothelial cell, VEC)功能失调和损伤是AS形成的始动环节，会继发脂质斑块沉积、血管内膜增生、免疫细胞浸润等事件[2]。细胞外基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase 9, MMP-9)是介导动脉粥样硬化发病的一种重要炎症介质，高表达的MMP-9可促进动脉粥样硬化形成以及斑块破裂[3]。miRNA通过靶向作用于mRNA的3′UTR区域，引起mRNA的翻译抑制或降解[4]，从而在转录后水平上抑制靶基因的表达，血管内皮细胞中存在miR-21的表达，当内皮损伤时，miR-21的表达发生改变，并通过mRNA剪切和抑制蛋白翻译的方式负调控靶基因的表达[5]。……