关于益阳市某餐馆大肠杆菌中毒的调查报告

罗婕 田双如 徐波

（长沙医学院基础医学院 湖南长沙 410219）

关于益阳市某餐馆大肠杆菌中毒的调查报告

罗婕 田双如 徐波

（长沙医学院基础医学院 湖南长沙 410219）

目的：分析益阳市食物中毒案列流行病学特点及其流行的原因，为今后类似的相关案列采取针对性的措施提供科学依据。方法：针对此次食物中毒案列的调查进行科学的分析。结果：此次食物中毒均为因致病菌感染的食物中毒事件。

大肠杆菌 食物中毒 调查报告

大肠埃希氏菌类于肠杆菌科，归属于埃希菌属，是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一种细菌，主要寄生在大肠内。它侵入人体一些部位时，起病一般较慢，也可急性起病。轻症不发热，主要症状为腹泻，大便每天3～5次，呈黄色蛋花样带奶瓣，量多。病情继续发展则出现发热、呕吐、食欲缺乏、腹胀、中毒性肠麻痹。在出现肠麻痹前腹泻加重，可出现黏液血便。成人患者常急性起病，有脐周隐痛、腹鸣，偶有里急后重，表现为“痢疾样”。在食品安全、环境监测、疾病预防等方面造成了巨大的威胁，对人体健康造成了很大危害。下面我将深入研究一起由于大肠杆菌所引起的食物中毒事件。

1 事件的相关回顾

2015年，某餐馆， 7人聚餐，吃完饭后5-7小时内，先后5人发病。到当天深夜发病住院人数4人。发病者的主要症状是为腹泻，呕吐、腹胀、并出现发热温度均在38℃以下，少数病人出现黏液血便。发病者去益阳市四医院采用抗菌相关治疗和输液补水对症处理后，患者都痊愈并且无不良预后表现。

经过去餐馆调查，发现该公司食堂的卫生条件差，厨房餐具保存不合格，防蝇防尘设施不合格，食材也不新鲜，有些食材在餐前一到两天已经买来。经过调差和采访相关食堂相关员工，初步确定是细菌性的食物中毒事件。

2 取样

2.1 样品来源： 当天用餐所剩的食物，瘦肉1份，虾1份，蔬菜1份，餐具2份，以及患者肛拭子1份、粪便样品3份，共计9份检样。将涂抹样品保存于缓冲蛋白胨肉汤中，其余都放置在无菌袋中冷藏保存。并带回实验室检测。

3 菌种检测

实验设备及材料：冰箱、温箱、恒温水浴、显微镜、均衡器或乳钵、天平、培养皿、试管、吸管、广口瓶或三角瓶、载玻片、酒精灯、玻璃珠、试管架。

培养基和试剂：乳糖胆盐发酵管G B 4 7 8 9.2 8、乳糖发酵管GB4789.28、EC肉汤GB4789.28、伊红美蓝琼脂平板GB4789.28、生理盐水、磷酸盐缓冲稀释液GB4789.28、革兰氏染色液GB4789.28。

实验方法：

检样稀释：无菌操作，将9份样品分别放入225ml灭菌生理盐水中，玻璃瓶内放入适量玻璃珠，经充分振荡后研磨成1：10的均匀稀释液。固体检样选用均感器，以8000-10000r/min，做成1：10均匀稀释液。用1ml无菌吸管吸取1：10稀释液1ml，注入含有9ml灭菌生理盐水中充分混匀，配成1：100稀释液。另取1ml吸管重复以上操作。根据食品卫生标准［1］要求估计选择3个稀释度，每个接种度稀释3管。

乳糖发酵实验： 将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内，每一个稀释度接种3管于36+1℃温箱中培养24+2h，若全部乳糖胆盐发酵管都不产气，则报告为大肠菌群阴性，如有产气者按下列操作进行。

分离培养：将产气小管接种于伊红美篮琼脂平板上（粪便可接种于EC肉汤管内，置入44.5+0.2℃水浴锅中培养24+2h，如都不产气则报告为阴性，如产气则接种于伊红美篮平板上），置入36+1℃温箱中培养18-24h，取出，观察菌落的形态，同时做革兰氏染色及证实实验。

证实实验：在以上平板中挑取1-2个可疑菌落进行革兰氏染色，同时接种乳糖发酵管，置于36+1℃温箱中培养18-24h，观察产气状况，凡乳糖管产气且革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌，方可报告为大肠菌群阳性［2］。

产气原因：大肠菌群发酵乳糖产气；肠球菌与其他革兰氏阴性菌共同利用乳糖产气（需要几日才能进行，如果样品中原来就有乳糖，就不需要这么长时间）；产芽孢菌发酵乳糖产气；大肠菌群或非大肠菌群利用样品中的葡萄糖或其他糖类物质产气。

4 讨论

假设有30个大肠菌群在1000毫升样品中。如果按9管法接种，分别接33。3毫升。这样按照统计学的方法计算这9管中能有大肠菌群生长的概率，大概只有一管有可能有大肠菌群。如此类推，按一定公式推算出mpn表。阳性管数就是可能有大肠菌群的管。

大肠菌群阴性的致病菌也不是没有，如有些气单胞菌、类志贺邻单胞菌，也能引起腹泻。因此大肠菌群阳性不代表样品中一定有致病菌，但比大肠菌群阴性的样品有致病菌的概率更高。

5 结论

这次细菌性中毒事件由于准备不充分未能采集所有的样品和患者症状。有些样品餐馆可能已经做了消毒处理。从实验结果分析，本次食物中毒事件瘦肉中分离出的可疑菌落，经过生化检测和血清学检测，根据微生物检验国家标准《GB 4789.4-2010 食品卫生微生物学检验大肠杆菌检验》，可以明确本次食物中毒由大肠杆菌引起。大肠杆菌所引起的食物中毒大多数发生在夏秋季节。大肠杆菌所引起食物中毒主要是在肉奶类较多。预防大肠杆菌食物中毒首先应应禁止食用病畜、病禽，注意饮食、饮水卫生，对肉、禽、奶、蛋类食品加工，储存应严防污染。食用时要煮熟、煮透、存放，加工时生熟食物要分开。相关的职能部门也要做好监督抽查检查工作。

［1］中国人民共和国卫生部.食品安全国家标准食品微生物学检验大肠杆菌检验［Z］.2010

［2］.何金林.夏铁英.国内细菌性食物中毒检验进展［J］.中国卫生检验杂志，2015.12（8）：1015-1016.

R599

A

1674-2060（2016）02-0052-01

长沙医学院大学生创新性项目（医教〔2014〕10号）