肝星形细胞条件培养液对肝癌细胞上皮-间质转化的影响*

徐国强, 黄小琼, 孙达权, 王　伟, 陈腾祥

(1.贵州医科大学 生理学教研室， 贵州 贵阳　550025； 2.贵州医科大学 生物化学与分子生物学教研室， 贵州 贵阳　550025)



肝星形细胞条件培养液对肝癌细胞上皮-间质转化的影响*

徐国强1**, 黄小琼1, 孙达权2, 王伟1, 陈腾祥1

(1.贵州医科大学 生理学教研室， 贵州 贵阳550025； 2.贵州医科大学 生物化学与分子生物学教研室， 贵州 贵阳550025)

[摘要]目的： 探讨人肝星形细胞条件培养液(HSC-CM)对肝癌细胞(HCC)上皮-间质转化的影响。方法： 采用HSC-CM培养肝癌细胞(SMMC-7721)，细胞划痕实验和transwell小室侵袭实验检测HSC-CM对SMMC-7721迁移和侵袭的影响，激光共聚焦显微术(LSCM)和Western blot分析CM培养下SMMC-7721中上皮标志物E-cadherin、间质标志物N-cadherin和Vimentin的表达变化，Western blot检测核转录因子Snail的表达水平。结果： HSC-CM培养的SMMC-7721细胞迁移和侵袭能力增强，和常规培养的SMMC-7721细胞比较，差异有统计学意义(P<0.05)；SMMC-7721上皮标志物E-cadherin蛋白表达下调、间质标志物N-cadherin蛋白和Vimentin蛋白表达上调，核转录因子Snail表达上调，与常规培养组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。结论： HSC-CM促进了SMMC-7721的上皮-间质转化。

[关键词]癌，肝细胞； 星形细胞； 上皮-间质转化； 细胞培养； 培养基，条件性

肝癌转移和浸润(metastasis and invasion)是术后高复发和5年存活率低下的主要原因，肝癌细胞(hepatoma carcinoma cells，HCC )发生侵袭的基础是癌细胞发生上皮-间质细胞转化(epithelial-mesenchymal transitions，EMT)[1-2]。HCC发生EMT是内因和外因共同作用的结果，内因主要包括肝癌细胞自身基因突变或者基因表达紊乱而引起胞内正常蛋白组学发生改变，进而影响细胞生物学特性和行为[3-4]；外因主要是指肝癌细胞生存的微环境(tumor microenvironment)发生变化，包括细胞外基质、胞外体液pH值、激素、细胞因子等各种生物信号小分子的改变[5-7]。改变肝癌细胞生存微环境，可以延缓甚至抑制肝癌细胞恶化及侵袭。肝癌细胞微环境可分为非细胞组分和细胞组分两大类：非细胞组分主要包括肝癌细胞本身与多种癌旁细胞分泌的生长因子、细胞因子、细胞外基质以及体循环运输而来的激素等；……