孔幸珊,曾彩芳,杨佳彬
(广州医科大学附属第四医院,广东广州 511447)
高效液相色谱法测定人血清中茶碱浓度
孔幸珊,曾彩芳,杨佳彬
(广州医科大学附属第四医院,广东广州511447)
摘要:目的建立测定人体内茶碱血药浓度的高效液相色谱(HPLC)法。方法采用10%三氟乙胺沉淀处理血清样品,色谱柱为Inertsil ODS-SP柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-水(25∶75),流速1.0 mL/min,紫外检测波长274 nm,柱温25℃。结果茶碱血药浓度在2.55~40.72 μg/mL范围内与峰面积线性关系良好,回归方程为Y=45 417.2 X-4 580.0,r=0.999 8(n=6)。日内和日间精密度的RSD分别不超过4.88%和6.06%,定量限为0.2 μg/mL。结论该法快速、准确,适用于临床茶碱血药浓度监测。
关键词:茶碱;高效液相色谱法;血药浓度监测
茶碱是黄嘌呤类药物,作为嘌呤受体阻滞剂能抑制磷酸二酯酶活性,松弛支气管平滑肌[1]。其临床主要用于支气管哮喘、阻塞性肺气肿等肺部疾病[2],疗效确切,价格低廉,且不易出现耐受。但茶碱的治疗窗比较窄,临床多种常用药物均能降低茶碱的清除率[3-5],容易出现因血药浓度过高导致的药品不良反应。监测茶碱血药浓度是保证临床安全、合理使用茶碱的重要手段。为此,笔者建立了可快速测定茶碱血药浓度的高效液相色谱(HPLC)法。现报道如下。
1.1仪器
LC-20A型高效液相色谱仪(日本岛津公司,包括SIL-20A自动进样器,LC-20AT溶液输送泵,SPD-20A UV-VIS Detector,工作站,柱温箱)。Eppendorf 5424R型台式高速低温离心机;AUW120D型天平(十万分之一,日本岛津公司)。
1.2试药
茶碱对照品(批号为100121-201104,中国食品药品检定研究院);甲醇(色谱纯,MERCK公司);试验用水为去离子水,经0.45 μm滤膜过滤后使用;……